3.3.1 Penelitian pendahuluan
Penentuan  nilai  konsentrasi  letal  median  LC
50
ekstrak  daun  jambu  biji daging  buah  merah  P.  guajava  var.  pomifera  dilakukan  dalam  penelitian
pendahuluan.  Diagram  alir  prosedur  penelitian  pendahuluan  disajikan  pada Gambar 3.
Gambar 3 Diagram alir prosedur kerja penelitian pendahuluan Ikan nila masing-masing sebanyak 1 kg diaklimatisasi dalam 3 wadah toples
berbeda yang berisikan media air sebanyak 3 L.  Selanjutnya, larutan ekstrak daun jambu  biji  daging  buah  merah  dengan  konsentrasi  5,  10,  15,  dan  20
ditambahkan  pada  masing-masing  toples.    Pengamatan  dilakukan  selama  3  jam terhadap  tingkat  mortalitas  ikan.  Data  jumlah  ikan  yang  mati  diolah  dengan
analisis probit SPSS 16.0 untuk penentuan nilai konsentrasi letal median LC
50
ekstrak daun jambu biji daging buah merah.
Ikan Nila Oreochromis niloticus
Pengujian ikan dalam toples yang masing-masing berisikan ekstrak daun P. guajava var. pomifera dengan tingkatan
konsentrasi 5, 10, 15, dan 20
Pengamatan jumlah mortalitas ikan selama 3 jam
Rekapitulasi data hasil pengujian Penimbangan masing-masing ikan
sebanyak 1 kg untuk setiap toples
Penyiapan 4 buah toples sebagai wadah pengujian yang masing-
masing berisikan media air
Metode  pembuatan  ekstrak  daun  jambu  biji  daging  buah  merah diacu  dari
Birdi et al. 2010, jenis ekstraksi yang digunakan adalah maserasi. Ekstrak dibuat berdasarkan perbandingan antara daun jambu biji daging buah merah dan pelarut
polar  aquades,  yaitu  1:16.  Mekanisme  pembuatannya  dilakukan  dengan menghaluskan sejumlah daun jambu biji daging buah merah dengan perbandingan
tertentu  menggunakan  blender.  Daun  yang  telah  dihaluskan  dimasukkan  dalam Beaker  glass  yang  berisi  pelarut  dengan  volume  tertentu,  kemudian    proses
ekstraksi  dilakukan  hingga  volume  ekstrak  daun  jambu:pelarut  tereduksi  ΒΌ bagian  volume  asal.  Selanjutnya,  ekstrak  kasar  disaring  dengan  kertas  saring.
Hasil  penyaringan  dijadikan  larutan  stok  ekstrak  daun  jambu  biji    daging  buah merah dengan konsentrasi 100.
3.3.2 Penelitian inti