Prosedur pemeriksaan Penetapan kadar gentamisin dalam serum dengan metode Fluorescence Polarization Imuno Assay

Serum dari subjek penelitian yang telah disimpan dalam freezer dikeluarkan dan dibiarkan pada temperatur kamar selama 30 menit, kemudian dihomogenkan dengan vortex mixer.

3.7.2 Prosedur pemeriksaan

Disiapkan : Cuvet : untuk tempat serum pemeriksaan Air : untuk membersihkan cuvet pada saat rotor beroperasi Cleaner : untuk mencuci cuvet pada saat rotor beroperasi

3.7.3 Penetapan kadar gentamisin dalam serum dengan metode Fluorescence Polarization Imuno Assay

Prinsip metode ini adalah reaksi antigen-antibodi yaitu kompetisi antara antigen yang tidak bertanda dalam memperebutkan tempat ikatan yang terbatas dari antibodi spesifik. Pada reaksi ini yang berperan sebagai antigen bertanda adalah larutan gentamisin fluorocein tracer, sedangkan antigen tidak bertanda adalah gentamisin dalam sampel serum yang dianalisa Cobas Integra System TDM, 2004. Apabila antigen bertanda terikat antibodi, maka fluorophore tidak bebas berotasi sehingga bila dikenai cahaya akan terjadi polarisasi dan bila antigen bertanda bebas, akan terjadi rotasi yang lebih besar sehingga molekul menjadi acak dan bila cahaya diemisikan akan terjadi depolarisasi. Apabila kadar gentamisin dalam sampel serum rendah maka semakin kecil jumlah antigen bertanda yang terikat, sehingga akan menghasilkan polarisasi yang rendah dan begitu sebaliknnya. Poppy Anjelisa Z.Hasibuan : Pemantauan Efektivitas Terapi Gentamisin Dosis Berganda Bolus Intravenus Terhadap Infeksi Pada Penyakit Paru Obstruktif Kronis, 2008. USU Repository©2008 Cara kerja alat penetapan kadar obat dalam serum: a. aktifkan tombol power monitor, tombol alat chemistry autoanalyzer COBAS INTEGRA 400 ROCHE dan Central processing unit CPU, biarkan 2-3 menit. b. alat akan mencuci jarum sampel dan jarum reagen selama 5-6 menit, sambil menyesuaikan temperatur. c. masukkan serum pada rak ise dengan posisi dua dan D protein pada posisi delapan. Kemudian rak ise masukkan ke dalam alat chemistry autoanalyzer COBAS INTEGRA 400 ROCHE. Alat telah siap dioperasikan. d. untuk kalibrasi pada monitor cursor diarahkan pada posisi order, kalibrasi, parameter yang akan diperiksa save, kemudian klik secara berurutan. Untuk control pada monitor cursor diarahkan pada posisi quality control, parameter yang akan diperiksa, save kemudian klik secara berurutan. Untuk membaca hasil pemeriksaan pada monitor, klik start dan secara berurutan, klik result, kalibrasi, parameter dan kontrol.

3.7.4 Penetapan kadar kreatinin dalam serum metode Jaffe