Dari data gambar diatas dapat dilihat bahwa operating time dicapai pada menit ke 30.
J. Validasi Metode Pengukuran Aktivitas Antioksidan
Validasi metode analisis merupakan suatu tindakan penilaian terhadap parameter tertentu, berdasarkan percobaan laboratorium, untuk membuktikan bahwa
parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaannya. Validasi metode analisis bertujuan untuk memastikan dan mengkonfirmasi bahwa metode analisis
tersebut sudah sesuai atau tidak. Terdapat beberapa parameter analisis yang harus dipertimbangkan dalam validasi metode analisis antara lain lineritas, presisi dan
spesifisitas.
1. Linearitas
Suatu metode analisis yang menggambarkan kemampuan suatu alat memperoleh hasil pengujian yang sebanding dengan kadar konsentrasi dalam zat uji
pada rentang kadar tertentu. Linearitas metode penentuan konsentrasi rutin dan ekstraksi etanolik fraksi air dengan spektrofotometri uv-vis dengan cara membuat
kurva hubungan antara konsentrasi pada sumbu x dan absorbansi pada sumbu y. Linearitas rutin dan ekstraksi etanolik fraksi air dengan DPPH ditetapkan
dengan range 80-120 dengan melakukan replikasi 3 kali. Hubungan antara konsentrasi antara absorbansi yang diimplementasikan dalam persamaan regresi linier
dan korelasi. Pengujian parameter ini dilakukan sebanyak 3 kali replikasi. Linearitas dinyatakan dalam koefisien korelasi r. Menurut Kingston 2004 linearitas apabila
R coefficient relative persamaan kurva baku mencapai 0,99 atau mendekati nilai 1.
Contoh dari kurva regresi pada seri baku rutin dan kurva sampel fraksi seperti gambar di bawah ini. Kurva dipilih dari 3 replikasi karena memiliki koefisien relatif
yang terbaik.
Gambar 15. Kurva Seri Baku Rutin
Gambar 16. Kurva Baku Fraksi Air
y = 2,6114x - 0.,3456 R = 0.9998
0.1 0.2
0.3 0.4
0.5 0.6
0.7 0.8
10 20
30
A b
s
konsentrasi
Kurva Seri Baku Rutin
Series1 Linear Series1
y = 0,1203x + 0.1942 R = 0.9996
0.1 0.2
0.3 0.4
0.5 0.6
0.7 0.8
200 400
600
A b
s
Konsentrasi
Kurva Baku Fraksi Air
Series1 Linear Series1
Salah satu kurva seri rutin yang baik dari 3 replikasi, yakni persamaan regresi linear y = 2,6114x -0,3457 dan r =0,9998 sedangkan kurva seri ekstraksi etanolik
fraksi air yang baik dari 3 replikasi, yakni persamaan regresi linear y = 0,1203x + 0,1942 dan r =0,9996. Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai r yang sudah
sesuai dengan yang dipersyaratkan yakni r 0.99. Jadi metode ini memiliki nilai linearitas yang baik untuk pengukuran aktivitas antioksidan fraksi air ekstrak etanol
biji trembesi dengan metode DPPH.
2. Presisi