BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian
4.1.1 Determinasi dan Sertifikasi
Hasil determinasi menunjukkan bahwa tanaman gambir yang digunakan dalam penelitian ini adalah Uncaria gambier, Roxb.. yang
tergolong suku Rubiaceae. Hasil determinasi dapat dilihat pada lampiran 1. Adapun Eugenol yang digunakan sebagai campuran senyawa uji telah
disertifikasi sebagai Eugenol for synthesis oleh Merck. Sertifikasi Eugenol dapat dilihat pada lampiran 2.
4.1.2 Karakteristik Simplisia dan Senyawa Uji Campuran
Tabel 2. Hasil Karakteristik Simplisia dan Senyawa Uji Campuran
Kar ak
ter is
tik Serbuk katekin
Eugenol Campuran
katekin dan Eugenol
Syarat Standar
Sampel Syarat
Sampel Pemerian
a. Bentuk
Serbuk Serbuk
Serbuk Cair
Cair Cair
b. Warna
Putih- Kuning
kecoklatan Kuning
Putih kekuningan
Bening kekuningan
Bening kekuningan
Bening kekuningan
c. Bau
Khas Khas
Khas Khas
Khas Khas
d. Rasa
khelat khelat
Khelat Pedas
Pedas Pedas-pahit
Kelarutan Tidak larut
air Tidak larut
air Tidak larut
air Tidak larut
air, Mudah larut
dengan DMSO
Jarak lebur 175-177
o
C 174-177
o
C 174-177
o
C -
- -
Spektrum UV
279 nm 292 nm
292 nm -
- -
Kadar Abu Maks 7
0.053 0.062
- -
-
Kadar Air Maks 7
0.047 0.044
- -
- Rendemen
Min 40 -
49.30 -
- -
Kemurnian 100 93.32
79.73 100
99.9 -
Berat jenis -
- -
1.064 - 1.070
1.065 -
The Merck Index.2006; WHO.1998; SNI gambir 01-3391-2000 Farmakope Indonesia Ed. IV
4.1.3 Jumlah Kepadatan Sel
Perhitungan jumlah kepadatan sel dilakukan dengan menggunakan Haemocytometer. Sel yang telah diinkubasi ditambahkan tripanblue dengan
pengenceran 10x kemudian dilihat di bawah mikroskop. Syarat jumlah kepadatan sel yang digunakan dalam tiap sumuran dalam penelitian ini adalah
5 x 10
3
selmL. Adapun jumlah kepadatan sel yang diperoleh ialah 1.51 x 10
6
selmL. Maka, jumlah suspensi sel yang harus dipipetkan dalam tiap sumuran adalah sebanyak 3.31 µLsumuran kemudian ditambahkan medium DMEM
berserum ad 100 µL. Perhitungan kepadatan sel dapat dilihat pada lampiran 17 .
4.1.4 Uji Efek Antiproliferatif
a. Pengujian Efek Antiproliferatif Campuran Katekin Gambir Uncaria
gambier Roxb dan Eugenol terhadap sel HeLa Tabel 3. Hasil Pengujian Efek Antiproliferatif Campuran Katekin Gambir
Uncaria gambier Roxb dan Eugenol 24 jam
Kons [µg
mL] Rata-
rata Abs.
DMSO Std.
dev. Rata-
rata Abs.
Sampel Std.
dev. Hidup
Inhibisi Log
kons. Probit
IC
50
3.125 0.463
0.039 0.430
0.104 92.87
7.13 0.495
3.5316 372.4
μg mL 6.25
0.472 0.029
0.404 0.015
85.59 14.41
0.796 3.9375
12.5 0.477
0.045 0.440
0.003 84.28
15.72 1.097
3.9931 25
0.466 0.007
0.352 0.043
74.55 25.45
1.398 4.3380
50 0.458
0.025 0.334
0.012 72.93
27.07 1.669
4.3872 100
0.451 0.004
0.314 0.030
69.62 30.38
2 4.4842
200 0.448
0.018 0.242
0.086 54.02
45.98 2.301
4.8970
Tabel 4. Hasil Pengujian Efek Antiproliferatif Campuran Katekin Gambir Uncaria gambier Roxb dan Eugenol 48 jam
Kons [µg
mL] Rata-
rata Abs.
DMSO Std.
dev. Rata-
rata Abs.
Sampel Std.
dev. Hidup
Inhibisi Log
kons Probit
IC
50
3.125 0.358
0.050 0.320
0.097 89.39
10.61 0.495
3.7519 178.24
μg mL 6.25
0.444 0.176
0.316 0.031
71.17 28.83
0.796 4.4408
12.5 0.427
0.136 0.295
0.006 70.53
29.47 1.097
4.4583 25
0.365 0.079
0.247 0.095
67.67 32.33
1.398 4.5407
50 0.328
0.003 0.216
0.015 65.85
34.15 1.669
4.5903 100
0.335 0.012
0.186 0.029
55.52 44.48
2 4.8592
200 0.331
0.017 0.164
0.035 49.55
50.45 2.301
5.0100
Tabel 5. Hasil Pengujian Efek Antiproliferatif Campuran Katekin Gambir Uncaria gambier Roxb dan Eugenol 72 jam
Kons [µg
mL ] Rata-
rata Abs.
DMSO Std.
dev. Rata-
rata Abs.
Sampel Std.
dev. Hidup
Inhibisi Log
kons Probit
IC
50
3.125 0.349
0.119 0.294
0.025 84.24
15.76 0.495
3.9931 73.45
μg mL 6.25
0.301 0.037
0.213 0.038
70.76 29.24
0.796 4.4524
12.5 0.281
0.072 0.192
0.060 68.33
31.67 1.097
4.5230 25
0.263 0.011
0.164 0.012
62.36 37.64
1.398 4.6480
50 0.259
0.019 0.141
0.009 54.45
45.55 1.669
4.8870 100
0.251 0.027
0.121 0.070
48.21 51.79
2 5.0426
200 0.247
0.019 0.092
0.047 38.17
61.83 2.301
5.3002
Perhitungan IC menggunakan persamaan: Y = a + bx lampiran 19
b. Pengujian Efek Antiproliferatif Kontrol Pembanding Cisplatin terhadap
sel HeLa Tabel 6. Hasil Pengujian Efek Antiproliferatif Kontrol Pembanding
Cisplatin 24 jam
Kons [µg mL
] Rata-rata
Abs. sampel
Rata-rata Abs
Blangko Std.
dev. Hidup
Inhibisi Log
kons. Probit
IC
50
1.5 0.302
0.479 0.073
63.05 36.95
0.176 4.6681
4.305 μg
mL 3
0.279 0.067
58.25 41.75
0.447 4.7930
4.5 0.387
0.013 51.98
48.02 0.653
4.9408 6
0.225 0.045
46.97 53.03
0.778 5.0753
7.5 0.197
0.058 41.13
58.87 0.875
5.2250 9
0.166 0.079
34.66 65.34
0.954 5.3934
Tabel 7. Hasil Pengujian Efek Antiproliferatif Kontrol Pembanding Cisplatin 48 jam
Kons [µg mL
] Rata-
rata Abs.
sampel Rata-rata
Abs Blangko
Std. dev.
Hidup Inhibisi
Log konsent
rasi Probit
IC
50
1.5 0.296
0.513 0.045
57.70 42.30
0.176 4.8058
2.904 μg
mL 3
0.257 0.055
50.10 49.90
0.447 4.9975
4.5 0.247
0.046 48.15
51.85 0.653
5.0476 6
0.217 0.002
42.30 57.70
0.778 5.1942
7.5 0.179
0.026 34.88
65.12 0.875
5.3880 9
0.119 0.026
23.2 76.80
0.954 5.7323
Tabel 8.Hasil Pengujian Efek Antiproliferatif Kontrol Pembanding Cisplatin 72 jam
Kons [µg
mL] Rata-
rata Abs.
sampel Rata-rata
Abs Blangko
Std. dev.
Hidup Inhibisi
Log konsen
trasi Probit
IC
50
1.5 0.255
0.542 0.044
47.05 52.95
0.176 5.0753
1.626 μg
mL 3
0.215 0.051
39.67 60.33
0.447 5.2611
4.5 0.198
0.020 36.53
63.47 0.653
5.3451 6
0.144 0.022
29.89 70.11
0.778 5.5273
7.5 0.101
0.004 18.63
81.37 0.875
5.8927 9
0.087 0.086
16.05 83.95
0.954 5.9945
Perhitungan IC menggunakan persamaan: Y = a + bx lampiran 20
A. Grafik Hubungan Antara Hidup dengan Waktu Inkubasi
1. Hubungan Antara Hidup dengan Waktu Inkubasi Sampel
Grafik 1. Hubungan antara hidup dengan waktu inkubasi sampel
2. Hubungan Antara Hidup dengan Waktu Inkubasi Cisplatin
Grafik 2. Hubungan antara Hidup dengan Waktu Inkubasi 10
20 30
40 50
60 70
80 90
100
24 jam 48 jam
72 jam
H id
u p
Waktu inkubasi
Hubungan Antara Hidup dengan Waktu Inkubasi
3.125 µgmL 6.25 µgmL
12.5 µgmL 25 µgmL
50 µgmL 100 µgmL
200 µgmL linier 3.125 µgmL
linier 6.25 µgmL linier 12.5 µgmL
linier 25 µgmL linier 50 µgmL
10 20
30 40
50 60
70
24 jam 48 jam
72 jam
H id
u p
Hubungan Antara Waktu Inkubasi Terhadap Hidup
1.5 µgmL 3 µgmL
4.5 µgmL 6 µgmL
7.5 µgmL 9 µgmL
linier 1.5 µgmL linier 3 µgmL
linier 4.5 µgmL
B. Grafik Hubungan Antara Hidup dengan IC
50
1. Hubungan Antara Hidup dengan IC
50
Sampel
Grafik 3. Hubungan Waktu Inkubasi Terhadap IC
50
2. Hubungan Antara Hidup dengan IC50 Cisplatin
Grafik 4. Hubungan Waktu Inkubasi terhadap IC
50
50 100
150 200
250 300
350 400
24 jam 48 jam
72 jam
IC
50
p p
m
Hubungan Waktu Inkubasi Terhadap IC
50
IC50 Campuran Katekin Gambir Uncaria
gambier, Roxb. dan Eugenol
1 1
2 2
3 3
4 4
5 5
24 jam 48 jam
72 jam
IC
50
pp m
Hubungan Waktu Inkubasi Terhadap IC
50
IC50 Cisplatin
C. Grafik Hubungan Antara Log Konsentrasi dengan Probit
1. Hubungan Antara Hidup dengan Probit Sampel
Grafik 5. Hubungan antara Log Konsentrasi dengan Probit
2. Hubungan Antara Hidup dengan Probit Cisplatin
Grafik 6. Hubungan antara Log Konsentrasi dengan Probit -
1,000 2,000
3,000 4,000
5,000 6,000
0,796 1,097
1,398 1,699
2 2,301
Pr ob
it
Hubungan Antara Log Konsentrasi dengan Probit
24 Jam 48 Jam
72 Jam
- 1,000
2,000 3,000
4,000 5,000
6,000 7,000
0,477 0,653
0,778 0,875
0,954
Pr ob
it
Hubungan Antara Log Konsentrasi dengan Probit
24 Jam 48 Jam
72 Jam
4.2 Pembahasan