Tempat dan Waktu Definisi Operasional Disain Penelitian

BAB III METODE PENELITIAN

3.1. Tempat dan Waktu

Penelitian telah dilaksanakan di Laboratorium Terpadu Universitas Sumatera Utara dimulai dari tanggal 30 Mei sampai dengan 22 Juli 2009.

3.2. Variabel Penelitian

3.2.1. Variabel Independen

a. Monosodium Glutamate MSG. b. Vitamin C.

3.2.2. Variabel Dependen

a. Jumlah sperma. b. Morfologi sperma.

3.3. Definisi Operasional

a. Jumlah sperma adalah banyaknya sperma yang diperoleh dari cauda epididimis dalam spermaml suspensi. b. Morfologi sperma normal dan abnormal yang diperoleh dari cauda epididimis. 1 Morfologi sperma normal yaitu mempunyai bentuk kepala seperti kait pancing dan ekor panjang lurus. Suparni : Pengaruh Pemberian Vitamin C Terhadap Jumlah Sperma Dan Morfologi Sperma Mencit Jantan Dewasa Mus musculus, L. Yang Dipaparkan Monosodium Dlutamate MSG, 2009. 2 Morfologi sperma abnormal mempunyai bentuk kepala tidak beraturan, dapat berbentuk seperti pisang, atau tidak beraturan amorphous, atau terlalu bengkok, dan ekornya tidak lurus bahkan tidak berekor, atau hanya terdapat ekornya saja tanpa kepala Washington et al., 1983.

3.4. Bahan dan Alat Penelitian

3.4.1. Bahan Penelitian

Bahan biologis. Bahan biologis yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah mencit jantan Mus musculus L. strain DD Webster dewasa fertil berumur ± 3 bulan dengan berat badan 25-35 gram yang diperoleh dari Unit Pra Klinik LPPT Universitas Gajah Mada UGM Yogyakarta. Jumlah hewan uji perkelompok ditentukan dengan rumus t-1 n-1 ≥ 15. ϑικα t adalah jumlah perlakuan dalam penelitian ini ada 5 kelompok perlakuan dan n adalah jumlah ulangan perkelompok, maka jumlah n yang diharapkan teoritis adalah 5 Federer, 1963. Sehingga jumlah keseluruhan hewan coba yang diperlukan dalam penelitian ini adalah sebanyak 25 ekor yang dipilih dari hasil perbanyakan untuk keperluan penelitian. Persetujuan ethical clearance dari Komisi Etika Penelitian Kesehatan Wilayah Sumatera Utara Medan. Bahan kimia. Bahan kimia yang dibutuhkan untuk meneliti efek pemberian vitamin C terhadap jumlah sperma dan morfologi sperma mencit jantan dewasa yang dipaparkan MSG adalah Monosodium glutamate murni, Vitamin C, NaCl 0,9, Giemsa, Eosin-Y, Alkohol 70 Merck dan Aquadest. Suparni : Pengaruh Pemberian Vitamin C Terhadap Jumlah Sperma Dan Morfologi Sperma Mencit Jantan Dewasa Mus musculus, L. Yang Dipaparkan Monosodium Dlutamate MSG, 2009.

3.4.2. Peralatan Utama Penelitian

Alat utama yang digunakan dalam penelitian antara lain: jarum oval Gavage, bak bedah dan dissecting set, gelas arloji, cawan petri, batang pengaduk, timbangan balance dengan ketelitian 0,01 gram, objek glas, cover glass, spuit insulin 1 ml, kamar hitung Improved Neubauer dan mikroskop cahaya.

3.5. Disain Penelitian

Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental yang didisain mengikuti Rancangan Acak Lengkap RAL. Penelitian ini terdiri atas 5 kelompok perlakuan, yaitu: a Kelompok I P0 = terdiri dari 5 ekor mencit jantan dewasa yang diberi larutan NaCl 0,9 sebanyak 0,5 ml secara intraperitoneal selama 30 hari. b Kelompok II P1 = terdiri dari 5 ekor mencit jantan dewasa yang diberi MSG 4 mgg berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml larutan NaCl 0,9 secara intraperitoneal setiap hari selama 15 hari selanjutnya 15 hari berikutnya diberikan larutan NaCl 0,9 sebanyak 0,5 ml secara intraperitoneal setiap hari. c Kelompok III P2 = terdiri dari 5 ekor mencit jantan dewasa yang diberi MSG 4 mgg berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml larutan NaCl 0,9 secara intraperitoneal setiap hari selama 30 hari. d Kelompok IV P3 = terdiri dari 5 ekor mencit jantan dewasa yang diberi MSG 4 mgg berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml larutan NaCl 0,9 Suparni : Pengaruh Pemberian Vitamin C Terhadap Jumlah Sperma Dan Morfologi Sperma Mencit Jantan Dewasa Mus musculus, L. Yang Dipaparkan Monosodium Dlutamate MSG, 2009. secara intraperitoneal setiap hari selama 15 hari pertama, selanjutnya 15 hari berikutnya diberikan vitamin C 0,2 mgg berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml aquadest secara oral setiap hari. e Kelompok V P4 = terdiri dari 5 ekor mencit jantan dewasa yang diberi MSG 4 mgg berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml larutan NaCl 0,9 secara intraperitoneal setiap hari selama 15 hari pertama, selanjutnya 15 hari berikutnya pemberian MSG diteruskan disertai dengan pemberian vitamin C 0,2 mgg berat badan yang dilarutkan dalam 0,5 ml aquadest secara oral setiap hari. Mencit ditempatkan ke dalam kelompok secara random. P4 P3 P2 P1 P0 0 15 30 hari Λαρυταν ΝαΧλ 0,9 ΜΣΓ Λαρυταν ΝαΧλ 0,9 ΜΣΓ ΜΣΓ ςιταmιν Χ ΜΣΓ ΜΣΓ + ςιταmιν Χ ΜΣΓ Λαρυταν ΝαΧλ 0,9 Suparni : Pengaruh Pemberian Vitamin C Terhadap Jumlah Sperma Dan Morfologi Sperma Mencit Jantan Dewasa Mus musculus, L. Yang Dipaparkan Monosodium Dlutamate MSG, 2009.

3.6. Pelaksanaan Penelitian