Elimasni: Perbanyakan Bibit Kemenyan Sumatrana Styrax benzoin Dryander Secara Kultur Jaringan, 2005
USU Repository ©2006
16
4.2.3. Sterilisasi Eksplan dan Penanaman Eksplan
Daun muda tanaman kemenyan diambil lalu dicuci dengan air detergen dan dibilas dengan air kran. Bahan disterilasi dalam kondisi aseptik dalam alkohol 70 selama 1 menit
dan diikuti dengan pemindahan ke dalam larutan bayclin 10 dan 20 masing-masing selama 15 menit masing-masing diseling dengan pembilasan memggunakan akuades sebanyak 3
kali. Eksplan dipotong sebesar 1.Ocm dan ditanam pada 16 perlakuan media yang sudah dibuat. Kultur diinkubasi dengan penyinaran 1000 lux selama 16 jamhari, dengan suhu
25-27 OC. Kultur dipelihara selama 90 hari dan pengamatan dilakukan setiap 3 hari sekali. Terhadap setiap kultur akan dilakukan pengamatan yaitu persentase kultur terkontaminasi,
pertumbuhan kultur: jumlah tunas, tinggi tunas, pertambahan jumlah daun, jumlah akar, persentase kultur mengkalus. Jika pada media perlakuan dihasilkan kalus embriogenik maka
kalus tersebut diregenerasi dalam media MSO media MS tanpa zat pengatur tumbuh. Kondisi ruangan kultur dipelihara sama seperti pada saat inisiasi. Pada fase ini dilakukan
pengamatan kemampuan kultur beregenerasi menjadi tanaman, seperti jumlah planlet terbentuk..
4.2.4. Regenerasi tanaman
Terhadap kalus yang terbentuk pada kultur akan dilakukan regenerasi kalus menjadi tanaman dengan cara memindahkan kalus ke dalam media regenerasi. Sebagai media
regenerasi digunakan media MSO media MS tanpa zat pengatur tumbuh dan MS yang diperkaya dengan zat pengatur tumbuh. Kondisi ruangan kultur dipelihara sama seperti pada
saat inisiasi. Pada fase ini dilakukan pengamatan kemampuan kultur morfogenik beregenerasi menjadi tanaman, seperti jumlah tunas dan tunas beralcar, jumlah tunas per-
eksplan, jumlah akar dan kecepatan pertumbuhan, hasil diferensiasi kalus setelah di subkultur, respon tunas pada media perakaran, dan kecepatan pertumbuhan. Faktor-faktor
lain juga akan dioptimasi untuk mendapatkan kondisi optimum pertumbuhan dan perkembangan kalus.
Elimasni: Perbanyakan Bibit Kemenyan Sumatrana Styrax benzoin Dryander Secara Kultur Jaringan, 2005
USU Repository ©2006
17
4.3. Organisasi dan Analisis Data