Uji akurasi Uji selektivitas spesifisitas

57 Tabel 20. Data uji presisi penetapan kadar vitamin A dalam matriks minyak goreng sawit No. Bobot Sampel Pengenceran Luas Area Kadar Vit. A Kadar Vit. A SD IUg RSD RSD 23 RSD g IUg Rata-rata IUg Horwitz Horwitz 1 2,5147 25 84957 23,56 2 2,4991 25 85404 23,83 3 2,5593 25 85028 23,17 23,48 0,46 1,97 7,26 4,84 4 2,5138 25 86478 23,99 5 2,5942 25 84535 22,73 6 2,5343 25 85764 23,60 7 2,4914 25 167239 46,83 8 2,5104 25 167814 46,63 9 2,5336 25 167056 46,00 46,74 0,90 1,93 6,54 4,36 10 2,5004 25 170554 47,58 11 2,5777 25 168170 45,51 12 2,4902 25 170849 47,86 13 2,5045 25 258306 71,96 14 2,4904 25 261964 73,39 15 2,5092 25 252020 70,07 71,28 1,33 1,87 6,14 4,09 16 2,5055 25 257386 71,67 17 2,4901 25 252416 70,72 18 2,5202 25 252344 69,86 Kurva Kalibrasi yang digunakan untuk perhitungan presisi vitamin A n a Intersep b Slope r 12 51,9937563 35825,84683 0,999973 58 Tabel 21. Data uji akurasi penetapan kadar vitamin A dalam matriks minyak goreng sawit No Bobot Sampel g Vit. A yang ditambahkan IU Pengenceran Luas Area Vit. A total IU Vit. A dari sampel IU Rekoveri Vit. A Rata-Rata Rekoveri SD RSD 1 1,2647 28,98 25 84610 59,0063 29,6952 101,15 98,40 1,87 1,90 2 1,2317 28,98 25 81711 56,9833 28,9203 96,84 3 1,2402 28,98 25 82138 57,2813 29,1199 97,18 4 1,2507 28,98 25 82822 57,7586 29,3664 97,98 5 1,2413 28,98 25 82067 57,2317 29,1457 96,92 6 1,2504 28,98 25 83783 58,4292 29,3594 100,31 7 1,2307 57,96 25 163743 114,2269 57,5229 97,94 98,76 1,81 1,83 8 1,2439 57,96 25 164669 114,8731 58,1399 97,89 9 1,2503 57,96 25 165772 115,6428 58,4390 98,70 10 1,2468 57,96 25 164814 114,9743 58,2754 97,83 11 1,2416 57,96 25 164546 114,7872 58,0324 97,93 12 1,2592 57,96 25 169434 118,1982 58,8550 102,39 13 1,2577 86,94 25 254429 117,5094 89,6489 101,06 98,29 1,50 1,52 14 1,2425 86,94 25 249940 174,3769 88,5654 98,71 15 1,2404 86,94 25 247577 172,7280 88,4157 96,98 16 1,2506 86,94 25 249957 174,3888 89,1428 98,06 17 1,2503 86,94 25 249607 174,1445 89,1214 97,80 18 1,2407 86,94 25 247784 172,8724 88,4371 97,12 Kurva Kalibrasi yang digunakan untuk perhitungan akurasi vitamin A n a Intersep b Slope r 12 51,9937563 35825,84683 0,999973 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 min 0.00 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25 1.50 1.75 2.00 2.25 2.50 mVx10 Detector A:325nm A 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 min 0.00 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25 1.50 1.75 2.00 2.25 2.50 mVx10 Detector A:325nm V it am in A 7. 8 79 1694 90 B Gambar 8. Kromatogram A campuran senyawa kimia yang sedang di- lakukan uji selektivitasnya: butil hidroksi anisol, butil hidroksi toluena, propil galat, tersier butil hidrokuinon, vita- min D, vitamin E dan beta karoten dan kromatogram B baku vitamin A dalam matriks sampel minyak goreng sawit yang dianalisis menggunakan KCKT kolom C18 pada kondisi optimum dengan komposisi fase gerak yang yang terdiri dari campuran asetonitril dan air 80:20 laju alir 1,75 mLmenit dengan detektor UV pada panjang gelombang 325 nm. Data yang diperoleh menunjukkan bahwa kromatogram yang dihasilkan tidak diganggu oleh adanya senyawa-senyawa yang sengaja ditambahkan ke dalam minyak goreng sawit dan pada uji t diperoleh hasil yang tidak berbeda bermakna bila dibandingkan dengan hasil dari presisi yang telah dilakukan, sehingga dapat disimpulkan bahwa metode analisis yang digunakan memenuhi syarat uji selektivitas spesifitas terhadap analit: senyawa anti oksidan butil hidroksi anisol, butil hidroksi toluena, propil galat, tersier butil hidrokinon, vitamin yang larut dalam minyak vitamin D dan vitamin E dan senyawa kimia alami yang terdapat dalam minyak goreng sawit beta karoten.

4.3.5 Uji robustness.

Pada uji robustness, dilakukan analisis terhadap sampel minyak goreng sawit yang sama pada uji presisi, namun pada metode tersebut dilakukan sedikit perubahan kecil seperti: perubahan penambahan atau pengurangan jumlah pereaksi yang digunakan, perubahan komposisi fase gerak, perubahan laju alir, dan perubahan merek kolom. Data hasil uji robustness dengan perubahan penambahan jumlah pereaksi menjadi: n- pentana 3 mL, larutan antioksidan butil hidroksi toluena 3 mL dan larutan tetra-n-butil amonium hidroksida 10,5 mL dapat dilihat pada Tabel 23. Data hasil uji robustness dengan perubahan pengurangan jumlah pereaksi n-pentana 2 mL, larutan antioksidan butil hidroksi toluena 2 mL dan larutan tetra-n-butil amonium hidroksida 9,5 mL dapat dilihat pada Tabel 24. Data hasil uji robustness dengan perubahan komposisi fase gerak asetonitril:air 81:19 dan laju alir 1,74 mLmenit dapat dilihat pada Tabel 25. Data hasil uji robustness dengan perubahan komposisi fase gerak asetonitril:air 79:21 dan laju alir 1,76 mLmenit dapat dilihat pada Tabel 26. Data hasil uji robustness dengan perubahan menggunakan merek kolom yang berbeda dapat dilihat pada Tabel 27. Dari Tabel 23–27 menunjukkan dalam uji t diperolah nilai t hitung lebih kecil dari t tabel, sehingga dapat disimpulkan hasil pengujian kondisi normal dengan hasil pengujian pada kondisi yang sedang diuji robutsnessnya memberikan hasil uji yang tidak berbeda bermakna.

4.3.6 Uji batas deteksi dan batas kuantisasi

Pada penentuan uji batas deteksi dan batas kuantisasi dibuat larutan vitamin A dalam matriks minyak goreng sawit dengan konsentrasi 0,4988 IUg sampai dengan 9,9970 IUg. Kurva regresi kadar vitamin A terhadap tinggi noise dengan sinyal pada penentuan uji batas deteksi dan batas kuantisasi dapat dilihat pada Gambar 9. 2 4 6 8 10 12 14 16 18 2 4 6 8 10 12 Kadar V it. A IUg Pe rba nd ing an tin gg i n ois e t erh ad ap tin gg i s iny al SN Gambar 9. Kurva regresi kadar vitamin A terhadap tinggi noise dengan sinyal SN. 61 Tabel 22. Data uji selektivitas spesifisitas vitamin A dalam matriks minyak goreng sawit No Bobot Sampel Pengenceran Luas Area Kadar Vit. A Kadar Vit. A SD Uji t g IUg Rata-Rata IUg IUg t Hitung t Tabel 1 2,5087 25 169742 47,20 2 2,5419 25 173729 47,68 3 2,5703 25 168767 45,81 47,36 0,99 1,609 2,228 4 2,5007 25 172544 48,13 5 2,5098 25 168382 46,80 6 2,4949 25 173673 48,56 Kurva Kalibrasi yang digunakan untuk perhitungan uji selektivitas spesifisitas n a Intersep b Slope r 12 51,9937563 35825,84683 0,999973