42 Dinginkan slide
20 menit Bilas dengan Wash Buffer WBPBS-T2 kali
10 menit Blocking dengan Dako FLEX Peroxidase
5 menit Bilas dengan Wash Buffer WBPBS-T 2 kali
10 menit Antibodi primer : Monoclonal Mouse Anti-Vimentin Clone
V9 60 menit
Bilas dengan Wash Buffer WBPBS-T 2 kali 10 menit
Dako FLEX HRP 20 menit
Bilas dengan Wash Buffer WBPBS-T 2 kali 10 menit
Dako FLEX DAB + SUBSTRAT 5 menit
Bilas dengan PBS-T 2 kali 10 menit
Hematoxylin 2 menit
Bilas dengan air mengalir keran 5 menit
Dehidrasi alcohol 70, 80, absolut 15 menit
Xylene 2 kali 10 menit
Mounting medium dan coverslip Pengamatan di bawah mikroskop
310 menit
3.8.3. Instrumen Penilaian
Penilaian imunuhistokimia vimentin menggunakan skor Allred. Skor ini adalah hasil penjumlahan skor persentase dari sel yang
terwarnaiproportion score PS dan skor intensitas pewarnaannya Intensity score IS.
33,34
43
Observasi PS PS atau
IS Observasi IS
tidak ada
yang terwarnai
tidak terwarnai
kurang dari 1 sel terwarnai
1 intensitas
pewarnaan lemah
1 – 10 sel terwarnai
2 intensitas
pewarnaan sedang
11 – 33 sel terwarnai
3 intensitas
pewarnaan kuat
34 -
66 sel
terwarnai 4
67 – 100 sel terwarnai
5
Tabel 3.2. Penilaian proportion score PS dan intensity score IS
Gambar Proposi Score PS dan intensitas Score IS
44
Skor Total = Proporsi skor PS + Intensitas Skor IS
Skor total Interpretasi
– 2 Negatif
3-4 Positif lemah
5-8 Positif kuat
Tabel 3.3. Skor total imunohistokimia vimentin
3.9. Defenisi Operasional
Pada penelitian ini digunakan batasan sebagai berikut : 1. Adenokarsinoma endometrium
Defenisi : Kasus keganasan endometrium dengan hasil
histopatologis adenokarsinoma endometrium yang didapat dari pembedahan histerektomi total atau radikal histerektomi, kuretase
mengambil jaringan
endometriumserviks dengan
sendok kuretase maupun biopsi Mengambil sebagian kecil jaringan
endometriumserviks, dengan memasukkan selang kecil Pippel melalui serviks ke dalam uterus
44
Cara ukur : Histopatologi
2. Adenokarsinoma serviks Defenisi
: Kasus
keganasan serviks
dengan hasil
histopatologis adenokarsinoma
serviks yang
didapat dari
45
pembedahan histerektomi total atau radikal histerektomi, kuretase mengambil
jaringan endometriumserviks
dengan sendok
kuretase maupun biopsi Mengambil sebagian kecil jaringan endometriumserviks, dengan memasukkan selang kecil Pippel
melalui serviks ke dalam uterus
44
Cara ukur : Histopatologi
3. Uji Vimentin Defenisi
: Pemeriksaan imunohistokimia protein yang membentuk filament intermediate dengan antibodi primer berupa
Monoclonal Mouse Anti-Vimentin Clone V9.
45
Cara ukur : Imunohistokimia dengan penilaian Allred
Alat ukur : Hitung visual
Kategori : 1. Positif
: ≥ 3
2. Negatif : 0-2
Skala ukur : Nominal
4. Umur Defenisi
: Usia yang terhitung sejak dilahirkan hingga saat penelitian dilaksanakan
46
Cara ukur : Kalender dalam hitungan tahun
Skala ukur : Rasio