33
BAB III METODE PENELITIAN
3.1. Desain Penelitian
Desain penelitian yang dilakukan menggunakan survey deskriptif dan menghitung jumlah koloni bakteri dengan menggunakan metode TPC
Total Plate Count.
3.2. Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta, pada bulan Januari2016 sampai
dengan Juni 2016.
3.3. Populasi dan Sampel Penelitian 3.3.1.
Populasi Penelitian
Penjual siomay yang berada di SD negeri di kelurahan Pisangan, Cirendeu,
dan Cempaka putih 3.3.2.
Sampel Penelitian
Sampel berupa siomay yang diambil dari beberapa SD Negeri di kelurahan Pisangan, Cirendeu, dan Cempaka putih.
Sampel diblender kemudian dilakukan pengenceran dalam media cair Nutrient
Broth NB dengan konsentrasi 10
-1
, 10
-2
, 10
-3
, 10
-4
, 10
-5
, 10
-6
,10
-7
.
3.4. Variabel Penelitian
Variabel penelitian ini adalah siomay variabel bebas, bakteri Eschericia coli
dan Salmonella sp variabel terikat.
3.5. Alat dan Bahan Penelitian 3.5.1. Alat Penelitian
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah gelas beker 250mL dan 500mL, tabung erlenmeyer 250 ml dan 500 ml, tabung ukur 100 ml dan 10 ml,
tabung reaksi, rak tabung reaksi, cawan petri, bunsen, spatula, pinset, pipet, ose, batang L, korek api, tip 1000
μ dan 100 μ, mikropipet 1000 μL dan 100 μL,
blender, autoklaf, oven, inkubator, kulkas, laminan, vortex, timbangan, hot plate,magnetic stir, tisu, kapas, handscoon, masker, larutan untuk pewarnaan Gram,
mikroskop, minyak immersi, dan swab kapas kering.
3.5.2. Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah siomay, media Nutrient Broth
NB, Nutrient Agar NA, Salmonella Shigella Agar SSA, dan Eosin Methylen
Blue Agar EMB.
3.6. Cara Kerja Penelitian 3.6.1. Tahap Persiapan
3.6.1.1. Sterilisasi Alat dan Bahan A. Sterilisasi basah
Bahan dan alat yang di sterilisasi dalam autoklaf yaitu media NA, EMB, NB, SSA, akuades dalam tabung Erlenmeyer dan tabung reaksi, dan tip. Bahan dan alat
baik yang belum digunakan dan sudah digunakan terlebih dahulu dibungkus dengan plastik tahan panas, lalu dimasukkan kedalam autoklaf selama ± 1-2 jam.
B. Sterilisasi kering
Bahan dan alat yang di sterilisasi dalam oven seperti cawan petri, spatula dan pinset. Sebelum dimasukan ke dalam oven telah dibungkus dengan kertas. Kemudian
masukkan kedalam oven ± 1 jam hingga mencapai suhu 150˚C.
3.6.1.2. Pengambilan dan Persiapan Sampel
Sampel dibeli di penjual siomay di SD Negeri yang terdapat di kelurahan pisangan, cirendeu, dan cempaka putih, sampel dibeli kisaran pukul 09.00-12.00
WIB. Kemudian sampel yang telah dibeli dimasukkan di lemari es dengan suhu 3 C
sehingga kondisi sampel tidak mengalami perubahan. Ketika sampel akan digunakan sebelumnya terlebih dahulu diblender sampai halus dan encer, lalu ditimbang dengan
ukuran 10 gram.
Kategori