yang disertai kelarutannya yang sempurna dalam konsentrasi asam asetat 1,0 Suptijah 2004.
Menurut Suptijah 2006 untuk menghasilkan kitosan dengan nilai DD derajat deasetilasi sebesar 84 dibutuhkan pemanasan pada suhu 130 °C
selama 4 jam atau suhu 120 °C selama 6 –7 jam. Perendamanan dengan NaOH
selain dapat meningkatkan derajat deasetilasi dapat juga mengakibatkan terjadinya depolimerisasi, oleh karena itu perendaman dilakukan pada suhu yang tidak
terlalu tinggi dan waktu yang singkat.
4.2 Penelitian Utama
Tahap penelitian utama yakni tahap pengujian efektivitas transdermal patch chitoplast antibakteri yang selanjutnya dilakukan pengujian pengaruh
konsentrasi kitosan dalam chitoplast. Waktu pengambilan sampel dilakukan saat sebelum menggunakan plester, jam ke-24 dan jam ke-48. Pengamatan terhadap
pengaruh kitosan dalam chitoplast dilakukan secara objektif berupa total plate count TPC dan derajat infeksi pada luka.
4.2.1 Efektivitas chitoplast sebagai transdermal patch antibakteri
Transdermal adalah salah satu rute untuk penghantaran obat dan salah satu bentuk sediaan transdermal adalah patch potongan. Sediaan patch ada dua tipe
yaitu patch tipe membran dan patch tipe matriks. Efektivitas suatu sediaan farmasi ditentukan oleh jumlah obat yang terlepas dari pembawa dan selanjutnya
terpenetrasi. Jumlah obat yang terlepas dari sediaan patch tipe membran ditentukan oleh reservoir dan polimer yang berfungsi sebagai membran
pengontrol pelepasan, sedangkan sediaan tipe matriks ditentukan oleh komposisi matriks pembentuknya Hendradi et al. 2010.
Plester yang dimodifikasi dengan kitosan dalam bentuk penyerapan larutan kitosan menggunakan larutan kitosan sebanyak 8 tetes konversi 4 mgml.
Menurut Summit 1983, beberapa derajat kelarutan jenis zat dianggap penting dalam absorpsi perkutan, yaitu absorpsi suatu zat dari luar kulit ke posisi bawah
kulit yang masuk ke dalam aliran darah. Hal ini ditunjukan oleh adanya konsentrasi pada daerah absorpsi dan koefisien partisi yang mempengaruhi jumlah
kelarutan zat dalam minyak mineral dan air sebanyak 1mgml sehingga dapat meresap ke dalam kulit. Dengan demikian, melalui hasil konversi jumlah tetesan
kitosan tersebut diharapkan kitosan sudah cukup optimal dalam mempercepat proses penyerapan dan penyembuhan luka.
Sistem penyampaian obat secara transdermal telah dikembangkan untuk menyajikan pemberian obat dalam keadaan steady state selama 72 jam 3 hari.
Penelitian ini menggunakan perlakuan selama 24 jam dan 48 jam dilatarbelakangi oleh analisis pengujian bakteri yang dapat dihambat selama 2 hari. Wang 1992
meneliti bahwa konsentrasi kitosan yang lebih tinggi 1,0-1,5 dapat menginaktivasi bakteri S. aureus setelah 2 hari di inkubasi dalam medium pada
pH 5,5-6,5. Hal ini berbeda bila
dibandingkan dengan jenis plester komersil lainnya yang menggunakan salah satu bahan kimia seperti pavidone iodine. Pada
pengujian antibakteri pada kontrol positif, sampel yang digunakan menggunakan zat aktif pavidone iodine yang merupakan zat aktif murni yang umum digunakan
sebagai zat aktif obat pada salah satu plester komersil. Povidone iodine merupakan salah satu pengobatan luka secara kimiawi yang sering kali digunakan
dalam penyembuhan luka. Pavidone iodine memiliki efek antimikroba yang dapat menciptakan lingkungan lembab dan dapat menginduksi angiogenesis. Obat ini
juga dilaporkan dapat mencegah inflamasi, namun pavidone iodine 10 dikatakan pula memiliki efek menghambat pertumbuhan fibroblast pada
percobaan kultur in vitro Ballin et al 2002 dalam Atik dan Januarsih 2009.
Pavidone iodine memiliki keuntungan dapat mempercepat proses reepitelisasi dan dapat memberikan suasana lembab pada luka sayat, namun bila
dibandingkan dengan menggunakan kitosan, kitosan dapat menstimulir pembentukan jaringan baru pada bagian luka tanpa suasana yang lembab pada
bagian kasa setelah melalui proses pengeringan. Pillai et al. 2009 menuturkan bahwa kitosan dapat digunakan sebagai pembentuk fibroblast dalam aplikasi
sebagai bahan benang, bahan penutup dan substrat yang bersifat biodegradable untuk pertumbuhan epitel kulit manusia dari hasil penelitian yang dilaporkan.
Beberapa jenis plester komersil juga masih menggunakan bahan kimia tambahan seperti zat silver yang akan berpengaruh pada sebagian kulit yang sensitif
terhadap alergi zat silver.
Penyembuhan luka yang normal merupakan suatu proses yang kompleks dan dinamis, tetapi mempunyai suatu pola yang dapat diprediksi. Proses
penyembuhan luka dapat dibagi menjadi tiga fase pokok, yaitu homeostasis dan inflamasi, proliferasi, maturasi dan remodeling. Proses penyembuhan luka terdiri
dari tiga tahap, yaitu : 1 sel inflamatori dari jaringan sekeliling akan berpindah ke arah tempat luka, 2 fibroblast kelihatan dan mulai menghasilkan serat
penghubung kolagen yang memberi tensile strength ke jaringan yang dihasilkan dan 3 secara serentak, kapiler-kapiler mulai terbentuk menyediakan tempat
dengan nutrient dan oksigen serta sel epithelial pada ujung dari luka mulai terisi pada daerah di bawah luka sehingga epithelium terbentuk dan luka dapat
disembuhkan Wikesman et al. 2007 dalam Atik dan Januarsih 2009.
4.2.2 Uji total plate count TPC pada hewan coba
