29
cuci dengan air mengalir.Keringkan preparat dengan kertas tissue yang ditempelkan di sisi belakang ulasan jangan sampai merusak
ulasan lalu biarkan mengering di udara. Hasil pewarnaan bakteri Gram negatif akan berwarna merah dan bakteri Gram positif
berwarna ungu. Apabila hasil pewarnaan menunjukkan Gram negatif, amati morfologi dan lanjutkan dengan melakukan uji
IMVIC dan uji gula-gula.. Jika kultur dugaan tersebut E. coli maka akan menunjukkan sifat Gram negatif dan morfologi sel berbentuk
batang pendek.
23
3.4.3 Alat dan Bahan Penelitian 3.4.3.1 Alat Penelitian
a. Tahap pengujian MPN
Alat yang digunakan dalam tahapan ini yaitu: tabung reaksi, tabung durham, gelas kimia, mikropipet,
botol sampel, pinset, pembakar bunsen, timbangan, magnetic stirer; inkubator, penangas air, autoklaf, lemari
pendingin refrigerator, plastik tahan panas, rak tabung, tissue, karet, kapas, spidol, label, alkohol swab, laminar air
flow. b. Penanaman ke Media selektif
Alat yang digunakan yaitu bunsen,korek,laminar air flow, jarum inokulasi ose bulat, label, spidol,
inkubator, lemari es. c. Pewarnaan Gram
Alat yang digunakan antara lain glass objek, bunsen,jarum inokulasi ose bulat, rak pewarnaan, botol
aquadest, tissue, bunsen,korek, spidol, mikroskop.
d. Uji biokimia
Alat yang digunakan yaitu tabung reaksi,laminar air flow, label, spidol, rak tabung reaksi, inkubator,
bunsen,korek, jarum inokulasi ose bulat dan jarum.
30
3.4.3.2 Bahan Penelitian a. Tahap pengujian MPN
Bahan yang digunakan antara lain air minum isi ulang dan larutan lactose broth.
b. Tahap penanaman ke media selektif
Bahan yang digunakan antara lain media selektif EMB agar.
c. Pewarnaan Gram
Bahan yang digunakan antara lain larutan pewarnaan Gram ungu kristal karbol, safranin, alkohol
96,lugol, aquadest, minyak emersi.
d. Tahap uji biokimia
Bahan yang digunakan antara lain adalah larutan uji gula-gula yang terdiri dari glukosa, laktosa, maltosa,
mannitol, sukrosa, media SIM, media cair MR-VP, media agar miring sitrat, alpha naftol, KOH 40.
