Uji biokimia dengan uji gula-gula dan uji IMViC

30

3.4.3.2 Bahan Penelitian a. Tahap pengujian MPN

Bahan yang digunakan antara lain air minum isi ulang dan larutan lactose broth.

b. Tahap penanaman ke media selektif

Bahan yang digunakan antara lain media selektif EMB agar.

c. Pewarnaan Gram

Bahan yang digunakan antara lain larutan pewarnaan Gram ungu kristal karbol, safranin, alkohol 96,lugol, aquadest, minyak emersi.

d. Tahap uji biokimia

Bahan yang digunakan antara lain adalah larutan uji gula-gula yang terdiri dari glukosa, laktosa, maltosa, mannitol, sukrosa, media SIM, media cair MR-VP, media agar miring sitrat, alpha naftol, KOH 40. 31

3.4.4 Alur Penelitian

Gambar 3.1 Alur penelitian

3.5 Analisis data

Data yang telah terkumpul diolah dan disajikan dalam bentuk tabel. Selanjutnya hasilnya dibandingkan dengan persyaratan air minum berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 492MenkesperIV2010. Pewarnaan Gram Pengumpulan sampel dari Depot Air Minum isi Ulang DAMIU di Kelurahan Pisangan- Cirendeu Sebanyak 500ml sampel dari tiap-tiap DAMIU di tampung di wadah steril Uji pendugaan presumptive test Hasil + Hasil - Uji tidak dilanjutkan ke tahap selanjutnya Inokulasi ke EMB agar Uji IMVIC Interpretasi hasil Hasil positif koloni diduga E.coli Hasil - Uji tidak dilanjutkan ke tahap selanjutnya Uji gula-gula Interpretasi menggunakan tabel MPN seri 3 tabung Hasil : Jumlah koliform100ml air Pembuatan proposal penelitian Lulus uji proposal 32

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Uji Most Probable Number MPN Koliform

4.1.1 Tahap Uji Pendugaan Presumptive Test

Sampel air minum isi ulang yang diambil di depot dari kelurahan Pisangan dan Cirendeu sebanyak 9 depot, diuji menggunakan metode most probable number dengan seri 3 tabung setiap pengencerannya. Tahap pertama yang dilakukan yaitu uji pendugaan presumptive test dengan menggunakan media berupa lactose broth karena merupakan media untuk mendeteksi adanya bakteri koliform. Hasil positif ditandai dengan terbentuknya gas dalam tabung durham dan bersifat asam bila warna media menjadi kuning yang dapat dilihat pada gambar 4.1. Gambar 4.1 A Hasil negatif pada lactose broth, B Hasil positif pada lactose broth Berdasarkan gambar diatas maka didapatkan hasil positif apabila terbentuk gas pada tabung durham. Di dalam lactose broth mengandung pepton dan ekstrak daging yang menyediakan nutrien penting untuk metabolisme bakteri. Laktosa yang terkandung juga menyediakan sumber karbohidrat yang dapat difermentasi oleh bakteri koliform. Keberadaan bakteri koliform ditandai dengan adanya gas di dalam tabung durham, A B