30
3.4.3.2 Bahan Penelitian a. Tahap pengujian MPN
Bahan yang digunakan antara lain air minum isi ulang dan larutan lactose broth.
b. Tahap penanaman ke media selektif
Bahan yang digunakan antara lain media selektif EMB agar.
c. Pewarnaan Gram
Bahan yang digunakan antara lain larutan pewarnaan Gram ungu kristal karbol, safranin, alkohol
96,lugol, aquadest, minyak emersi.
d. Tahap uji biokimia
Bahan yang digunakan antara lain adalah larutan uji gula-gula yang terdiri dari glukosa, laktosa, maltosa,
mannitol, sukrosa, media SIM, media cair MR-VP, media agar miring sitrat, alpha naftol, KOH 40.
31
3.4.4 Alur Penelitian
Gambar 3.1 Alur penelitian
3.5 Analisis data
Data yang telah terkumpul diolah dan disajikan dalam bentuk tabel. Selanjutnya hasilnya dibandingkan dengan persyaratan air minum berdasarkan
Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 492MenkesperIV2010.
Pewarnaan Gram
Pengumpulan sampel dari Depot Air Minum isi Ulang DAMIU di Kelurahan Pisangan-
Cirendeu Sebanyak 500ml sampel dari tiap-tiap DAMIU di tampung di wadah steril
Uji pendugaan presumptive test
Hasil + Hasil -
Uji tidak dilanjutkan ke tahap selanjutnya
Inokulasi ke EMB agar
Uji IMVIC Interpretasi hasil
Hasil positif koloni diduga E.coli
Hasil - Uji tidak dilanjutkan
ke tahap selanjutnya
Uji gula-gula Interpretasi
menggunakan tabel MPN seri 3 tabung
Hasil : Jumlah koliform100ml air
Pembuatan proposal penelitian Lulus uji proposal
32
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Uji Most Probable Number MPN Koliform
4.1.1 Tahap Uji Pendugaan Presumptive Test
Sampel air minum isi ulang yang diambil di depot dari kelurahan Pisangan dan Cirendeu sebanyak 9 depot, diuji menggunakan metode most
probable number dengan seri 3 tabung setiap pengencerannya. Tahap pertama yang dilakukan yaitu uji pendugaan presumptive test dengan
menggunakan media berupa lactose broth karena merupakan media untuk mendeteksi adanya bakteri koliform. Hasil positif ditandai dengan
terbentuknya gas dalam tabung durham dan bersifat asam bila warna
media menjadi kuning yang dapat dilihat pada gambar 4.1.
Gambar 4.1 A Hasil negatif pada lactose broth, B Hasil positif pada lactose broth
Berdasarkan gambar diatas maka didapatkan hasil positif apabila terbentuk gas pada tabung durham. Di dalam lactose broth mengandung
pepton dan ekstrak daging yang menyediakan nutrien penting untuk metabolisme bakteri. Laktosa yang terkandung juga menyediakan sumber
karbohidrat yang dapat difermentasi oleh bakteri koliform. Keberadaan bakteri koliform ditandai dengan adanya gas di dalam tabung durham,
A B