Sterilisasi lingkungan kerja Sterilisasi bahan tumbuhan indukan Sterilisasi bahan eksplan

3.3.2 Sterilisasi lingkungan kerja

Pembersihan laboratorium dilakukan setiap hari terutama untuk penyeleksian botol kultur yang terkontaminasi. Pengepelan dan penyemprotan rak kultur dengan alkohol juga dilakukan secara berkala. Pembersihan tempat kerja laminar air flow cabinet dapat dilakukan dengan mengelap permukaan atau meja kerja menggunakan kapas atau tisu yang telah disemprot alkohol 70. Lalu, sebelum dan selama pemakaian, blower atau peniup udara dalam laminar air flow cabinet harus dinyalakan untuk menghindari adanya kontaminan yang masuk ke dalam botol kultur ketika penanaman. Kemudian sebelum melakukan pekerjaan maka dilakukan penyemprotan dengan alkohol 70 terhadap kedua telapak tangan, botol kultur, ataupun alat-alat yang akan digunakan dalam penanaman.

3.3.3 Sterilisasi bahan tumbuhan indukan

Proses dan tahapan karantina bahan indukan meliputi : 1. Penyemprotan dengan fungisida dan bakterisida atau antibiotika setiap sore secara bergiliran. - Fungisida Antracol 1 gl dan Bakterisida Agrept 1 gl dicampur dan dilarutkan - Antibiotika Amoxiciline 200 mll 2. Penyemprotan dengan hormon tunas atau Hyponex hijau + GA setiap pagi secara bergiliran - Hormon tunas 10 mll - Hyponex Hijau 2 gl + GA 100 mll 3. Penggunaan Dekastar N Tinggi pada media tanam 4. Penyemprotan dengan insektisida

3.3.4 Sterilisasi bahan eksplan

Pulai yang sudah dikarantina dan akan diambil sebagai eksplan diberi perlakuan sterilisasi yang meliputi sterilisasi eksplan di luar laminar air flow cabinet dan sterilisasi eksplan di dalam laminar air flow cabinet. Adapun tahapan sterilisasi eksplan di luar lamiar air flow cabinet meliputi : 1. Pemotongan eksplan dari bahan indukan 2. Pengolesan dengan alkohol 70 3. Pencucian dengan air 4. Pencucian dengan detergen 10 menit 5. Pencucian menggunakan air hingga bersih Sedangkan tahapan sterilisasi eksplan di dalam laminar air flow cabinet meliputi : 1. Pencucian menggunakan air steril selama ± 5 menit 2. Perendaman dengan HgCl 2 0,01 mg100 ml selama 7-10 menit 3. Perendaman menggunakan clorox 5 selama ± 3 menit 4. Perendaman dengan larutan betadine 0,5 ml100 ml selama 7-10 menit 5. Pembilasan dengan air steril sebanyak 3 kali masing-masing selama 5 menit. 3.3.5 Pembuatan media 3.3.5.1 Pembuatan larutan stok