34
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Determinasi Binatang Undur-Undur Darat
Binatang undur-undur darat yang digunakan dalam penelitian ini dideterminasi agar tidak terjadi kesalahan dalam menggunakan binatang undur-
undur darat sehingga pada akhirnya dapat dikonfirmasi bahwa binatang yang dipakai memang benar binatang undur-undur darat Myrmileon sp.. Bukti
determinasi dapat dilihat pada lampiran 1.
B. Pembuatan Simplisia Uji dan Preparasi Bahan
Pembuatan simplisia uji sesuai tata cara yang tertera pada halaman 24. Preparasi bahan sesuai tata cara yang tertera pada halaman 26-27.
C. Percobaan Pendahuluan
1. Waktu resapan stabil glukosa
Reaksi antara glukosa dan reagen GOD-PAP merupakan reaksi enzimatis yang menghasilkan senyawa berwarna, karena itulah maka perlu dilakukan uji
stabilitas glukosa untuk mengetahui Operating Time OT dari reaksi tersebut. Penentuan OT ini bertujuan untuk mengetahui waktu resapan saat senyawa
berwarna yang terbentuk memberikan resapan yang stabil pada pengukuran
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
H O
H H
OH CH
2
OH H
OH OH
H OH
OH H
H C
OH H
OH CH
2
OH H
O
OH OH
+ O
2
+ H
2
O
2
glukosa GOD
asam glukonat hidrogen
peroksida
H
2
O
2
H
2
N
N N
CH
3
O
CH
3
PAP
OH
O N
N CH
3
N O
CH
3
+ +
+ H
2
O
fenol hidrogen
peroksida
4 amino-antipirin
kuinonimin
berwar na merah muda
menggunakan spektrofotometri visible. Pengukuran dilakukan pada panjang gelombang 500 nm sesuai pada leaflet enzim GOD-PAP selama 60 menit.
Reagen GOD-PAP bekerja secara enzimatik dengan prinsip adanya GOD glucose oxidase yang akan mengkatalisis oksidasi glukosa menjadi asam
glukonat dan hydrogen peroksida. Hidrogen peroksida akan bereaksi dengan adanya enzim peroksidase, bersama dengan fenol dan 4-amino-antipirin
membentuk senyawa kuinonimin yang berwarna merah muda. Intensitas warna merah muda yang terbentuk sebanding dengan konsentrasi glukosa. Reaksi yang
terjadi adalah sebagai berikut:
Gambar 4. Reaksi enzimatik antara glukosa dan reagen GOD-PAPDiaSysy, 2006
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Data penetapan waktu resapan stabil glukosa standar 100 mgdl tampak dalam tabel VI.
Tabel VI. Data hasil penetapan waktu resapan stabil larutan glukosa standar Waktu menit
Resapan 5
0,336 10
0,361 15
0,365 20
0,365 25
0,364 30
0,364 35
0,363 40
0,362 45
0,361 50
0,361 55
0,361 60
0,360
Grafik hubungan resapan glukosa murni 100 mgdl pada ? 500 nm terhadap waktu seperti berikut:
Gambar 5. Grafik hubungan resapan glukosa murni 100 mgdl pada ? 500 nm terhadap waktu
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Dari grafik pada gambar 5 dapat dilihat bahwa pada menit ke-15 sampai menit ke- 35 memberikan grafik yang relatif datar, artinya pada menit tersebut terjadi reaksi
yang stabil dan sempurna antara glukosa murni dengan pereaksi GOD-PAP. Hal ini berarti penetapan kadar glukosa darah dapat dilakukan pada menit ke-15-35
setelah pemberian pereaksi GOD-PAP. Akan tetapi untuk lebih meminimalkan perbedaan resapan, maka pengerjaan OT dilakukan dari menit ke-15 sampai 35.
2. Penetapan panjang gelombang maksimum