20
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
3.3.2 Preparasi Alat
Alat dari kaca, gelas dan medium untuk pertumbuhan mikroba yang akan digunakan dalam penelitian ini disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu
121
ᵒ
C tekanan 1 atm selama 15 menit.
3.3.3 Pembuatan Media Pertumbuhan 3.3.3.1
Nutrient Agar NA Miring
Media
Nutrient Agar NA dibuat
dengan menimbang sebanyak 28 gram
Nutrient Agar NA
dan dilarutkan dalam 1 liter aquadest kemudian dihomogenisasi dengan magnetic stirrerdan dipanaskan dengan menggunakan hot plate. Medium
kemudian diambil ±5 mL dan dimasukan pada tabung reaksi.Medium disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu 121
ᵒ
C
selama 15 menit, setelah disterilisasi media dimiringkan 45
º
dan dipadatkan.
3.3.3.2 Lactose broth LB
Cara membuat media Lactose broth LB dengan menimbang sebanyak 13 gram LB dan dilarutkan dalam 1 liter aquadest kemudian dihomogenisasi dengan
magnetic stirrer dan dipanaskan dengan menggunakan hot plate. Sebanyak 10 ml media dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham dan
disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu 121
º
C selama 15 menit. 3.3.3.3
Eosin Methylene Blue Agar EMBA
Medua Eosin Methylene Blue Agar EMBA dibuat dengan menimbang sebanyak 37,5 gram EMBA dan dilarutkan dalam 1 liter aquadest kemudian
dihomogenisasi dengan magnetic stirrer dan dipanaskan dengan menggunakan hot plate. Medium disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu 121
º
C selama 15 menit.
21
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
3.3.3.4 Sulfide Indole Motility SIM
Media Sulfide Indole Motility SIM dibuat dengan menimbang sebanyak 30 gram SIM dan dilarutkan dalam 1 liter aquadest kemudian dihomogenisasi
dengan magnetic stirrer dan dipanaskan dengan menggunakan hot plate. Medium kemudian diambil ±5 mL dan dimasukan pada tabung reaksi. Medium disterilisasi
menggunakan autoklaf pada suhu 121
º
C selama 15 menit.
3.3.3.5 Methyl Red-Voges Proskauer MRVP
Media Methyl Red-Voges Proskauer MRVP dibuat dengan cara menimbang sebanyak 17 gram MRVP dan dilarutkan dalam 1 liter aquadest
kemudian dihomogenisasi dengan magnetic stirrer dan dipanaskan dengan menggunakan hot plate. Medium kemudian diambil ±5 mL dan dimasukan pada
tabung reaksi. Medium disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu 121
º
C selama 15 menit.
3.3.3.6 Simmons Citrate Agar
Media Simmons Citrate Agar dibuat dengan minimbang sebanyak 23 Gram Simmons Citrate Agardan dilarutkan dalam 1 liter aquadest kemudian
dihomogenisasi dengan magnetic stirrer dan dipanaskan dengan menggunakan hot plate. Medium kemudian diambil ±7mL dan dimasukan pada tabung reaksi.
Medium disterilisasi menggunakan autoklaf pada suhu 121
º
C selama 15 menit, setelah disterilisasi media dimiringkan 45
º
dan dipadatkan.
3.3.4 Uji Coliform
Kategori