Physiological Responses of Tiger grouper Juveniles Epinephelus fuscoguttatus as effect of utilisation of Lemon Grass Oil in Sealed Transportation with high Density

i

BERKEPADATAN TINGGI

BUDIYANTI

SEKOLAH PASCASARJANA

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR

2010

ii

Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis “Respon Fisiologi Benih Ikan Kerapu Macan Epinephelus fuscoguttatus Akibat Penggunaan Minyak Sereh dalam Transportasi Tertutup Berkepadatan Tinggi” adalah karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir tesis ini.

Bogor, Oktober 2010

Budiyanti

NRP C151080181

iii

Budiyanti. Physiological Responses of Tiger grouper Juveniles Epinephelus fuscoguttatus as effectof utilisation of Lemon Grass Oil in Sealed Transportation

with high Density, Supervised by EDDY SUPRIYONO and TATAG BUDIARDI.

This research aimed to analyze the impact of lemon grass oil as anesthetic on physiological responses, growth and survival rate of tiger groupers juveniles (7 cm and 4.02 gram in average of length and weight respectively) during and post transportation. The research conducted in Laboratory of Environmental Aquaculture, Department of Aquaculture, Faculty of Fishery and Marine Science, Bogor Agricultural University for two months. A completely randomised design was applied to measure the impact of three different doses of lemon grass (10 mg/l, 20 mg/l and 30 mg/l), a solution with no lemon grass oil was used as control, with two replications. The result showed that 10 mg/l of lemon grass provided the lowest concentration of both total ammonia nitrogen (TAN) and carbon dioxide (CO2) in the transportation media (6.459 ± 1.290 mg/l and 32.561 ± 6.498 mg/l respectively). Moreover, it also provided similar physiological responses to normal fishes (i.e. blood glucose 25.19 ± 0.05 mg/dl, erythrocytes 1.28 x 106 cell/mm3, leukocytes 2.60 x 104 cell/mm3), N:L ratio 0,41%, minimum gill damaged, survival rate was 97.5% and of 1.43% growth rate.

iv

fuscoguttatus Akibat Pemanfaatan Minyak Sereh dalam Transportasi Tertutup

Berkepadatan Tinggi. Dibimbing oleh EDDY SUPRIYONO dan TATAG BUDIARDI.

Ikan kerapu merupakan komoditas perikanan laut dengan nilai ekonomis tinggi dan telah dapat dikembangkan di Indonesia melalui teknologi pengembangan budidaya. Ketersediaan benih pada setiap lokasi kegiatan budidaya ikan kerapu masih belum dapat dipenuhi secara lokal sehingga biasanya didatangkan dari daerah lain, oleh karena itu perlu suatu teknologi transportasi agar benih ikan kerapu tetap dalam kondisi baik dan tetap hidup meskipun telah mengalami berbagai keadaan selama perjalanan.

Minyak sereh merupakan salah satu alternatif pilihan yang dapat digunakan sebagai bahan anestesi dalam kegiatan transportasi sehingga dilakukan pengujian untuk mengetahui pengaruh penggunaan minyak sereh terhadap respon fisiologi.

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menganalisis pengaruh penggunaan minyak sereh terhadap respon fisiologi berupa gambaran darah (sel darah merah (SDM), sel darah putih (SDP), hemoglobin (Hb), N:L (Netrofil:Limposit) dan glukosa), histologi jaringan (insang), serta pertumbuhan dan kelangsungan hidup benih ikan kerapu macan pasca pengangkutan.

Penelitian ini dilaksanakan selama 3 bulan yaitu pada bulan Februari-April 2010 yang dilakukan di Laboratorium Lingkungan Akuakultur, Laboratorium Kesehatan Ikan Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan serta Laboratorium Fisiologi Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor.

Prosedur penelitian yang dilakukan terdiri dari dua tahapan yaitu tahap pendahuluan dan tahap inti. Tahap pendahuluan terdiri dari puasa ikan, tingkat konsumsi oksigen, dan uji LC50 minyak sereh dengan konsentrasi 10 mg/L (perlakuan A) , 20 mg/L (perlakuan B), dan 30 mg/L (perlakuan C), sedangkan tahap inti terdiri dari lama pengangkutan dan pemeliharaan. Setelah proses pengangkutan dan pemeliharaan dilakukan analisis gambaran darah, histopatologi insang, pengukuran kualitas air, pengukuran glukosa darah, pertumbuhan dan kelangsungan hidup. Rancangan percobaan yang digunakan adalah rancangan acak lengkap dengan 4 perlakuan dan 2 ulangan. Data yang diperoleh dianalisis dengan menggunakan analisis ragam (anova) dengan uji F pada selang kepercayaan 95% untuk menentukan pengaruh perlakuan. Jika perlakuan berpengaruh nyata maka dilakukan uji lanjut dengan menggunakan uji Beda Nyata Jujur (BNJ).

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ikan kerapu dapat bertahan hidup tanpa diberi pakan lebih dari 8 hari dengan kondisi ikan masih dalam keadaan aktif. Tingkat konsumsi oksigen dengan bobot rata-rata ikan 4,02±0,132 gram membutuhkan oksigen sebesar 0,352 mg O2.g-1.jam-1

Nilai SDM, SDP, Hb dan N:L rasio setelah pengangkutan selama 56 jam meliputi nilai SDM terendah dan tertinggi pada perlakuan A (1,28±0,12 sel/mm

.

3 ) dan perlakuan C (3,29±0,15 sel/mm3) jika dibandingkan dengan ikan normal (1,24±0,06 sel/mm3). Jumlah SDM setelah 7 hari pemeliharaan terendah terdapat

v

normal setelah pengangkutan. Setelah dilakukan 7 hari pemeliharaan jumlah sel darah putih tertinggi terdapat pada perlakuan C (4,27±0,30 sel/mm3) dan terendah terdapat pada perlakuan A (2,90±0,01 sel/mm3). Nilai Hb tertinggi setelah pengangkutan terdapat pada kontrol (5,65±0,35 sel/mm3) dan terendah terdapat pada perlakuan A (3,8±0,28 sel/mm3) dan setelah 7 pemeliharaan Hb tertinggi terdapat pada perlakuan C (5,7±0,71 sel/mm3) terendah terdapat pada perlakuan A (3,4±0,28 sel/mm3).

Pengukuran kadar glukosa darah pada akhir pengangkutan menunjukkan jumlah yang lebih tinggi pada perlakuan C (79,92±1,37 mg/dl) dan terendah pada perlakuan A (25,19±0,05 mg/dl) dibandingkan dengan kadar glukosa ikan normal, demikian juga kadar glukosa setelah pemeliharaan 7 hari pada perlakuan B dan C memiliki kadar glukosa yang lebih rendah dibandingkan dengan ikan normal.

Hasil pengamatan histologi menunjukkan kerusakan jaringan insang ikan kerapu macan yang berbeda pada setiap perlakuan bila dibandingkan dengan ikan normal. Pada kontrol terjadi kerusakan lebih tinggi dan terendah pada perlakuan A dibanding perlakuan yang lain, setelah pengangkutan. Tingkat kerusakan pada perlakuan K yaitu (edema, hiperplasi, hemorage dan hipertropi,) perlakuan A (hemorage dan fusi) Perlakuan B (edema, hemorage, telengiektasis dan hipertropi), Perlakuan C (hipertropi dan fusi).

Semua parameter kualitas air media selama pengangkutan menunjukkan adanya peningkatan mulai dari jam ke-0 sampai dengan jam ke-56. Hal ini disebabkan karena adanya aktifitas biologis ikan seperti respirasi, metabolisme dan ekskresi.

Kelangsungan hidup ikan tertinggi setelah pengangkutan terjadi pada perlakuan A (10 mg/L) yaitu sebesar 97,5%. Laju pertumbuhan spesifik tertinggi setelah dilakukan pemeliharaan selama satu bulan terdapat pada perlakuan A yaitu sebesar 1,43% bobot tubuh/hari dengan tingkat kelangsungan hidup 73 %. Hal ini disebabkan karena pada perlakuan A kondisi ikan lebih baik dibandingkan dengan kondisi ikan pada perlakuan lainnya, yaitu tingkat stresnya rendah sehingga nafsu makan ikan tetap baik. Pemberian minyak sereh 10 mg/L dalam air media pengepakan dapat memberikan hasil yang paling baik. Hal ini dapat dilihat dari respon fisiologi berupa gambaran darah, kadar glukosa dan histopatologi insang yang mendekati normal, dan tingkat kelangsungan hidup tertinggi pada pasca transportasi sebesar 97,5 % pada jam ke-56, serta laju pertumbuhan harian yang tinggi sebesar 1,43% bobot tubuh/hari dibandingkan dengan perlakuan-perlakuan lain. Oleh karena itu untuk transportasi sistem tertutup ikan kerapu macan dengan kepadatan 20 ekor/L dapat menggunakan minyak sereh 10 mg/L.

Kata kunci : minyak sereh, transportasi, kerapu macan, gambaran darah, histologi

vi

© Hak Cipta milik IPB, tahun 2010

Hak Cipta dilindungi Undang-Undang

Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan atau menyebutkan sumbernya. Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan, penelitian, penulisan karya ilmiah, penyusunan laporan, penulisan kritik, atau tinjauan suatu masalah; dan pengutipan tersebut tidak merugikan kepentingan yang wajar IPB

Dilarang mengumumkan dan memperbanyak sebagian atau seluruh Karya tulis dalam bentuk apa pun tanpa izin IPB

vii

BERKEPADATAN TINGGI

BUDIYANTI

Tesis

sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains pada

Program Studi Ilmu Akuakultur

SEKOLAH PASCASARJANA INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR 2010

viii Nama : Budiyanti

NRP : C151080181

Disetujui : Komisi Pembimbing

Dr. Ir. Eddy. Supriyono, M.Sc. Dr. Ir. Tatag Budiardi, M.Si. Ketua Anggota

Diketahui

Ketua Program Studi Dekan Sekolah Pascasarjana IPB Ilmu Akuakultur,

Prof. Dr. Ir. Enang Harris, M.S. Prof. Dr. Ir. Khairil A. Notodiputro, M.S.

ix

x

rahmat dan karunia-Nya sehingga proses perkuliahan dan penyusunan tesis dengan judul ”Respon fisiologi benih ikan kerapu macan epinephelus

fuscoguttatus akibat penggunaan minyak sereh dalam transportasi tertutup

berkepadatan tinggi” sebagai salah satu syarat untuk mendapatkan gelar Magister Sains pada Program Studi Budidaya Perairan Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.

Terima kasih kepada semua pihak yang telah memberikan bantuan baik moral maupun materil, utamanya kepada :

1. Dr.Ir. Eddy Supriyono, M.Sc dan Dr. Ir. Tatag Budiardi, M.Si, sebagai komisi pembimbing, atas curahan waktu, perhatian, motivasi dan pikiran mengantarkan penelitian penulis hingga selesai.

2. Dr.Ir. Kukuh Nirmala, M.Sc, selaku Penguji Luar Komisi yang telah memberikan saran yang sangat berarti untuk kesempurnaan tesis ini.

3. Terima kasih kepada anak-anakku tercinta (Ardi, Windu, Fitri, Kiki, Novi dan Iman) atas segala doa, dukungan dan motivasi serta pengorbanan yang tak terhingga nilainya.

4. Terima kasih yang tak terhingga kepada ayahanda La Budu dan ibunda Wa Dalima (alm) yang telah membesarkan penulis, kakakku serta keluarga besarku atas segala doa, dukungan dan kasih sayangnya..

5. Rektor Universitas Dayanu Ikhsanuddin (Unidayan) dan Dekan Fakultas Perikanan Unidayan yang telah memberikan kesempatan penulis untuk melanjutkan studi pada Institut Pertanian Bogor (IPB).

6. Beasiswa Program Pasca Sarjana (BPPS) yang telah membantu penulis dalam pembiayaan perkuliahan dan penelitian.

7. Lembaga penelitian dan pengabdian masyarakat (LPPM) Unidayan yang telah membantu sebahagian biaya penelitian penulis.

8. Bapak Ir. Tamar Mustari, M.S dan Muh. Chaidir Undu, S.Pi atas dukungannya baik moril maupun materil selama penulis menyelesaikan studi.

9. Teman-teman akuakultur 2008 terutama minor lingkungan (Riza, Ade, Pak Gian, Edo, Supasman, Pak Sumo, Pak Is, Pak Kadir, dan Isye), serta teman-teman yang tidak bisa disebut satu persatu atas segala bantuan, dorongan semangat yang diberikan kepada penulis sehingga penelitian ini selesai.

10. Teman-teman Pondok Edulweis”88” Rusman Prasetya, M.Si, Supasman, Siti Rahmaniar, Nurmin Amin, Jamal Harimuddin, M.Si,

Asmadin, S.Pi, La Ode Rusyamin, Al Azhar serta Hendrawan atas bantuan dan motivasinya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian.

Sesungguhnya kesempurnaan hanyalah milik Allah, mohon maaf bila dalam tesis ini masih ada kekurangan, semoga hasil penelitian ini dapat berguna bagi kemajuan ilmu pengetahuan dan bermanfaat bagi semua pihak, khususnya kepada penulis kiranya dapat menjadi bekal setelah menyelesaikan studi nantinya.

xi

alm. La Budu dan ibu Wa Dalima. Penulis merupakan anak ke empat dari empat bersaudara.

Tahun 1984 penulis lulus dari MAN Bau Bau dan pada tahun yang sama lulus seleksi masuk program studi Budidaya Perairan, Jurusan Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Dayanu Ikhsanuddin (Unidayan)

Tahun 1992 penulis diterima sebagai salah satu staf pengajar pada lingkungan Unidayan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, dan pada tahun 2008 penulis diberikan kesempatan untuk melanjutkan studi dan diterima sebagai salah satu mahasiswa sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor pada Mayor Ilmu Akuakultur, dengan bantuan biaya dari BPPS.

xii I.

II.

III.

DAFTAR TABEL ... DAFTAR GAMBAR ... DAFTAR LAMPIRAN ... PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang ... 1.2 Perumusan Masalah ... 1.3 Tujuan Penelitian ... 1.4 Manfaat Penelitian ... 1.5 Hipotesis ... TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Taksonomi dan Morfologi ... 2.2 Sereh ………. 2.3 Transportasi ……….. 2.3.1 Kemasan ……….. 2.3.2 Kepadatan Ikan ……….... 2.4 Persyaratan Media Pengangkutan ……….

2.4.1 Oksigen Terlarut (DO)………. 2.4.2 Suhu ……….

` 2.4.3 Salinitas ………

2.4.4 Karbondioksida ……… 2.4.5 Derajat Keasaman (pH) ………... 2.4.6 Alkalinitas ……… 2.4.7 Kesadahan ……… 2.4.8 Amoniak ……….. 2.4.9 Nitrit ……… 2.5 Anastesi ……….

2.5.1 Tahapan Anastesi ………. 2.6 Stres ……….. 2.7 Histopatologi dan Gambaran Darah Ikan ……….. 2.7.1 Histopatologi Ikan ………... 2.7.2 Gambaran Darah Ikan ……….. METODE PENELITIAN

3.1 Waktu dan Tempat ... 3.2 Alat dan Bahan ... 3.3 Prosedur Penelitian ...

3.3.1 Puasa Ikan ... 3.3.2 Tingkat Konsumsi Oksigen ... 3.3.3 Uji Letal Konsentrasi (LC) ... 3.3.4 Analisis Darah ... 3.3.5 Analisis Histopatologi ... 3.3.6 Kualitas Air ... 3.3.7 Derajat Kelangsungan Hidup dan Laju

Pertumbuhan Spesifik ... 3.3.8 Prosedur Pengangkutan ...

xiv xv xvi 1 3 3 4 4 5 6 8 10 10 10 11 11 12 12 12 13 13 14 15 16 17 19 19 19 19 23 23 23 23 23 24 24 26 26 27 27

xiii IV.

V.

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil ... 4.1.1 Puasa Ikan ... 4.1.2 Tingkat Konsumsi Oksigen... 4.1.3 Uji Letal Konsentrasi (LC) ... 4.1.4 Analisis Darah ... 4.1.5 Analisis Histopatologi ... 4.1.6 Analisis Kualitas Air ... 4.1.7 Kelangsungan Hidup (SR) ... 4.1.8 Laju Pertumbuhan Spesifik Ikan Kerapu Macan 4.2 Pembahasan ... KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan ... 5.2 Saran ... DAFTAR PUSTAKA ... LAMPIRAN ...

30 30 30 30 31 36 37 41 42 43 51 51 52 58

xiv

Halaman

1 Susunan kimia minyak sereh wangi ... 8

2 Tahapan anastesi pada ikan ... 18

3 Tahapan anastesi dan pemulihan ... 18

4 Parameter air yang diukur dan alat yang digunakan... 26

5 Kemampuan puasa ikan kerapu macan ... 30

6 Hasil pengamatan tingkat mortalitas ikan kerapu selama uji LC50-96 jam 31 7 Konsentrasi TAN media pengepakan ... 40

xv

Halaman

1 Benih ikan kerapu macan (Epinephelus fuscoguttatus) ... 6

2 Jumlah sel darah merah pasca pengangkutan dan 7 hari pemeliharaan... 32

3 Jumlah sel darah putih pasca pengangkutan dan 7 hari pemeliharaan... 33

4 Konsentrasi Hb pasca pengangkutan dan 7 hari pemeliharaan ... 34

5 Perbandingan N:L rasio pasca pengangkutan dan 7 hari pemeliharaan... 34

6 Kadar glukosa pasca pengangkutan dan 7 hari pemeliharaan ... 35

7 Perubahan histopatologi insang pasca pengangkutan ... 36

8 Perubahan histopatologi insang setelah 7 hari pemeliraan ... 37

9 Suhu media pengangkutan benih ikan kerapu macan... 38

10 Salinitas media pengangkutan benih ikan kerapu macan... 38

11 pH media pengangkutan benih ikan kerapu macan... 38

12 DO media pengangkutan benih ikan kerapu macan ... 39

13 CO2 media pengangkutan benih ikan kerapu macan... 40

14 15 Kesadahan media pengangkutan benih ikan kerapu macan ... 41

16 Alkalinitas media pengangkutan benih ikan kerapu macan ... 41

17 Kelangsungan hidup benih ikan kerapu macan setelah pengangkutan... 42

18 Kelangsungan hidup benih ikan kerapu macan setelah pemeliharaan... 42

xvi

Halaman 1 Analisi probit uji LC50

2 Prosedur pengukuran kondisi histologi insang ikan kerapu macan ... 63

-96 jam ... 60

3 Gambaran darah ikan kerapu macan pasca pengangkutan dan hasil analisis statistik... . 66

4 Gambaran darah ikan kerapu macan setelah 7 hari pemeliharaan dan analisis statistik ... 69

5 Suhu rata-rata media air pengepakan ... 70

6 Konsentrasi salinitas rata-rata media pengepakan ... 70

7 pH rata-rata media air pengepakan ... 70

8 DO rata-rata media air pengepakan ... 70

9 Karbondioksida rata-rata media air pengepakan ... 71

10 TAN rata-rata media air pengepakan ... 71

11 NH3 12 Kesadahan rata-rata air media pengepakan ... 72

rata-rata media air pengepakan ... 71

13 Alkalinitas rata-rata air media pengepakan ... 72

14 Nitrit rata-rata air media pengepakan ... 72

15 Jumlah ikan hidup selama pengangkutan ... 72

16 T ingkat kelangsung hidup ikan selama pengangkutan ... 73

17 Jumlah ikan mati selama pengangkutan ... 73

18 Kelangsungan hidup selama pemeliharan ... 73

19 Preserntase ikan hidup selama pemeliharaan ... 74

20 Pengukuran bobot tubuh selama pemeliharaan ... 74

xvii

menyelesaikan sesuatu urusan, kerjakanlah dengan

sungguh-sungguh urusan selanjutnya (Q.S. 94: 6-7). Tiada

seorangpun yang dapat mengetahui dengan pasti apa yang

akan diperolehnya besok .. (Q.S. 31:34)

Saya persembahkan karya terindah ini dengan penuh rasa

haru dan bangga kepada :

Anak-anakku tercinta Ardi Purnama, Windu Sukendar,

Fitrianti, Rizki Kamelia, Nofita Sari dan

Muh. Satiman yang senantiasa

mengobarkan semangatku untuk bekerja keras

menyelesaikan karya ini.

Orang tuaku, kakakku serta keluarga besarku yang selalu

memotivasiku dalam penyelesaian karya ini.

Ikan kerapu merupakan komoditas perikanan laut dengan nilai ekonomis tinggi dan telah dapat dikembangkan di Indonesia melalui teknologi pengembangan budidaya. Penggunaan ikan rucah sebagai sumber utama pakan telah dapat digantikan dengan pakan buatan yang teknologi pembuatannya telah dikembangkan oleh Balai Riset Perikanan Budidaya Air Payau, Maros Sulawesi Selatan (Nur 2007). Demikian pula perangkat lunak dalam penentuan lokasi budidaya yang sesuai dengan pengembangan budidaya ikan kerapu yang berkesinambungan (Halide 2007). Daerah produksi benih ikan kerapu macan terletak di wilayah Bali, Situbondo, Lampung, sedangkan daerah budidaya atau pembesaran terletak di wilayah Jakarta, Lombok dan Makassar. Karena jarak antara daerah pembenihan dan daerah pembesaran relatif jauh, maka diperlukan suatu teknologi transportasi yang dapat mempertahankan tingkat kelangsungan hidup benih agar tetap tinggi dan waktu yang selama mungkin.

Pada umumnya transportasi ikan hidup dilakukan dengan dua sistem yaitu sistem terbuka dan sistem tertutup. Pada pengangkutan dengan sistem terbuka digunakan drum atau bak yang dilengkapi dengan aerasi, sedangkan pada pengangkutan ikan dengan sistem tertutup digunakan kantong plastik dan stirofom. Transportasi ikan hidup dapat diartikan sebagai suatu tindakan memindahkan ikan dalam keadaan hidup dengan memberikan perlakuan tertentu untuk menjaga kelangsungan hidup ikan tetap tinggi sampai ke lokasi tujuan

(Syamdidi et al. 2006). Selanjutnya Berka (1986) menyatakan, bahwa

transportasi ikan hidup dipengaruhi oleh kualitas air yaitu parameter fisika dan

kimia air seperti oksigen terlarut, suhu, pH, karbondioksida, dan amoniak (NH3).

Teknologi transportasi benih ikan kerapu yang umum digunakan saat ini dengan sistem tertutup. Hasil penelitian menunjukkan bahwa transportasi sistem tertutup benih ikan kerapu ukuran 7-8 cm dengan kepadatan 25 ekor dalam 2 liter air selama 12 jam memberikan kelangsungan hidup sebesar 92,99%. Selanjutnya dinyatakan, pengangkutan benih ukuran 6-7 dan 7-8 cm sering mengalami kendala kantong plastik yang bocor dan kempes karena tertusuk duri sirip punggung

Penelitian ini merupakan aplikasi dari peningkatan teknologi pengangkutan yang sering dilakukan oleh pembudidaya. Dengan meningkatnya kepadatan ikan yang diangkut, maka tingkat metabolisme juga akan meningkat, dan mengakibatkan tingginya tingkat stres yang dialami oleh ikan karena menurunnya kualitas air. Oleh karena itu diperlukan metode yang dapat menurunkan aktivitas metabolisme dan respirasi, sehingga ikan tidak banyak bergerak dan tidak banyak memerlukan oksigen untuk respirasinya. Salah satu metode yang digunakan

untuk menurunkan aktivitas tersebut adalah dengan anastesi (Suryaningrum et al.

2005).

Penggunaan bahan anastesi seperti penggunaan ether, propoxate dan quinaldine sulfat serta MS-222 telah menurunkan tingkat mortalitas selama

pengangkutan ikan hidup. Akan tetapi, bahan anestesi tersebut telah dilarang

penggunaannya karena dapat meninggalkan residu dalam tubuh ikan. Hal ini sesuai dengan Keputusan Menteri Kelautan dan Perikanan, Nomor: KEP.20/MEN/2003 tanggal 9 Juni 2003, tentang larangan penggunaan bahan kimia sintetis sebagai obat bius.

Berdasarkan hal tersebut perlu ada bahan anastesi alternatif misalnya

bahan anastesi alami. Minyak sereh (Cymbopogon sp.) merupakan salah satu

tanaman dengan manfaat yang beragam. Minyak atsiri yang dikandung oleh

Cymbopogon olivieri dapat membunuh larva nyamuk Anopheles stepensi vector

malaria (Hadjiakhoondi et al. 2003). Minyak sereh (Cymbopogon citratus)

berperan sebagai anti jamur dan protozoa (Mahanta et al. 2007).

Minyak sereh merupakan minyak atsiri yang mampu menurunkan tingkat metabolisme ikan dengan cara memingsankan atau menenangkan ikan. Menurut

de Sousa et al. (2005) tanaman sereh bersifat menenangkan (sedatif) dan

membantu proses pencernaan serta berbau harum dengan aroma yang khas. Senyawa geraniol dan sitronelol yang terkandung dalam minyak sereh berperan penting dalam mekanisme anastesi melalui jaringan pernafasan. Minyak sereh dianggap cukup potensial untuk dikembangkan sebagai bahan pembius dalam proses transportasi organisme akuakultur. Efektifitas minyak sereh sebagai obat

bius pada kepiting bakau (Scylla serata Forskal) telah dilaporkan oleh Semarlan

salah satu bahan anastesi dalam kegiatan transportasi ikan kerapu macan belum tersedia sehingga dianggap perlu untuk dilakukan penelitian ini.

1.2 Perumusan masalah

Transportasi ikan hidup adalah salah satu upaya memindahkan ikan dalam keadaan hidup dengan memberikan perlakuan tertentu untuk menjaga agar kelangsungan hidup ikan tinggi serta efek negatif pasca transportasi tetap rendah sampai ke tujuan. Semakin jauh jarak yang ditempuh, semakin dituntut suatu teknologi yang mampu mempertahankan ikan agar tetap hidup dalam waktu yang lama. Jadi semakin lama ikan dapat dipertahankan hidupnya, maka semakin jauh jarak yang dapat dijangkau sehingga dapat meningkatkan jangkauan distribusi.

Penggunaan bahan anastesi kimia sintetis mampu menurunkan tingkat

mortalitas ikan hidup selama pengangkutan. Akan tetapi penggunaan bahan

anestesi tersebut telah dilarang penggunaannya karena dapat meninggalkan residu dalam tubuh ikan. Berdasarkan hal tersebut perlu ada bahan anastesi alternatif

misalnya bahan anastesi alami. Minyak sereh (Cymbopogon sp.) merupakan salah

satu tanaman dengan manfaat yang beragam. Dinyatakan oleh de Sousa et al.

(2005) bahwa tanaman sereh (Cymbopogon schoenanthus) bersifat menenangkan

(sedatif) dan membantu proses pencernaan serta berbau harum dengan aroma yang khas.

Namun demikian, informasi mengenai kegunaan minyak sereh sebagai salah satu bahan anastesi dalam kegiatan akuakultur, khususnya dalam kegiatan transportasi ikan kerapu macan belum tersedia. Dengan demikian dianggap perlu untuk dilakukan penelitian ini terutama pengangkutan benih ikan kerapu macan

1.3 Tujuan Penelitian

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menganalisis dampak penggunaan minyak sereh terhadap respon fisiologi berupa gambaran darah (sel darah merah, sel darah putih, hemoglobin, N:L rasio dan glukosa), histologi jaringan (insang), serta pertumbuhan dan kelangsungan hidup benih ikan kerapu macan pasca pengangkutan.

1.4 Manfaat Penelitian

Hasil dari penelitian ini dapat dijadikan sebagai informasi tentang konsentrasi minyak sereh yang efektif dalam kegiatan transportasi ikan kerapu macan dan pengembangannya.

1.5 Hipotesis

Hipotesis yang diajukan pada penelitian ini adalah pemberian minyak sereh yang tepat dalam media transportasi tertutup dapat mengurangi tingkat stres dan kondisi fisiologi ikan tetap terjaga sehingga tingkat kelangsungan hidup dan pertumbuhan pasca pengangkutan tetap tinggi.

Menurut Cornish (2004), klasifikasi ikan kerapu macan adalah :

Phylum : Chordata

Sub Phylum : Vertebrata

Super Species : Gnathostotamata

Class : Teleostei

Sub Class : Actinopterygii

Ordo : Perciformes

Sub Ordo : Percoide

Family : Serranidae

Sub Family : Epinephelinae

Genus : Epinephelus

Spesies : Epinephelus fuscoguttatus

Kerapu macan memiliki nama umum Brown-marbled Grouper, di Perancis

dengan nama Merou marron dan di Spanyol dengan nama Mero manchado.

Selanjutnya, kerapu macan memiliki nama sinonim Serranus horridus, Serranus

taeniocheirus dan Serranus lutra (Heemstra dan Randall 1993).

Menurut Heemstra dan Randall (1993), panjang standar ikan kerapu macan 2,6 sampai 2,9 kali lebar badannya, dan panjang kepala seperempat kali panjang standar. Sirip ekor umumnya membulat, sirip punggung memanjang di mana jarinya yang keras berjumlah kurang lebih sama dengan jari lunaknya, jari-jari sirip keras berjumlah 6 – 8 buah, sedangkan sirip dubur berjumlah 3 buah, jari-jari sirip ekor berjumlah 15 – 17 buah dan bercabang dengan jumlah 13 – 15 buah. Warna tubuhnya sawo matang, perut bawah agak keputihan dan badannya terdapat titik berwarna merah kecoklatan serta tampak pula 4 – 6 baris warna gelap yang melintang hingga ekornya.

Heemstra dan Randal (1993) menerangkan bahwa habitat ikan kerapu macan adalah daerah terumbu karang yang dangkal dan perairan dengan dasar berbatu, dengan kedalaman hingga 60 meter. Juvenil ikan kerapu macan ditemukan pada areal padang lamun. Dilaporkan bahwa dalam lambung ikan kerapu macan terdapat ikan, kepiting dan cephalopoda. Di alam ikan kerapu

hidup pada kisaran salinitas 34,259 – 34,351 g/L, suhu 27 – 29 oC, oksigen terlarut 3,95 – 4,28 ml/L, nitrat 1,00 – 6,00 µg.at/L, fosfat 0,80 – 1,40 µg.at/L

(Langkosono 2006). Menurut Sutarmat et al. (2003) ikan kerapu dapat hidup dan

tumbuh pada kisaran kadar garam 22-32 g/L dan suhu 26 – 31o

Gambar 1 Ikan kerapu macan (Epinephelus fuscoguttatus)

2.2 Sereh

Klasifikasi tanaman sereh adalah sebagai berikut :

Kingdom : Plantae

Subkingdom : Tracheobionta Superdivision : Spermatophyta

Division : Magnoliophyta

Class : Liliopsida

Subclass : Commelinidae

Order : Cyperales

Family : Poaceae

Genus : Cymbopogon Spreng

Species : Cymbopogon citratus (DC. Ex Nees) Stapf.

(Dimodifikasi dari USDA 2009).

C.

Secara geografis, ikan kerapu macan terdistribusi pada wilayah Indo-Pasifik, termasuk laut merah namun tidak ditemukan di Teluk Persia, Hawaii atau Polinesia Perancis. Ikan kerapu macan dapat ditemukan di hampir semua kepulauan tropis lautan Indonesia dan Pasifik Barat (dari timur hingga Samoa dan Phoenix Island) sepanjang pantai timur Afrika hingga Mozambique, dan juga dilaporkan terdapat di Madagaskar, India, Thailand, Indonesia, Pantai tropis Australia, Jepang, Filipina, Papua Nugini dan Kaledonia Baru (Heemstra dan Randall 1993).

Sereh merupakan tanaman tropis yang tumbuh dalam rumpun yang lebat dan dapat mencapai ketinggian 1,8 meter dan lebar rumpun 1,2 meter (Anonim 2009). Daun sereh menyerupai pita dengan lebar 1,3 – 2,5 cm dan panjang 0,9 meter dengan ujung daun yang melengkung ke arah tanah. Daunnya berwarna hijau kebiruan dan beraroma seperti jeruk ketika diremas. Daun tanaman sereh digunakan sebagai penyedap rasa makanan dan obat-obatan. Minyak yang berasal dari batang sereh disuling dan dimanfaatkan dalam industri parfum.

Sereh (Cymbopogon sp.) merupakan salah satu tanaman dengan manfaat

yang beragam. Minyak atsiri yang dikandung oleh C. olivieri dapat membunuh

larva nyamuk Anopheles stepensi vector malaria (Hadjiakhoondi et al. 2003).

Minyak sereh (C. citratus) berperan sebagai anti jamur dan protozoa (Mahanta et

al. 2007).

Komponen kimia dalam minyak sereh wangi cukup kompleks, namun komponen yang terpenting adalah sitronelal dan geraniol. Kedua komponen tersebut menentukan intensitas bau harum, serta nilai harga minyak sereh wangi. Menurut Guenther (1950), komponen utama penyusun minyak sereh wangi adalah sebagai berikut:

1. Geraniol ( C

10H18

Geraniol merupakan persenyawaan yang terdiri dari 2 molekul isoprene dan 1 molekul air, dengan rumus bangun adalah sebagai berikut :

0 )

CH

3 - C = CH - CH2 --- CH2 - C = CH - CH2 - OH

CH

3 CH3

2. Sitronellol ( C

10H20

CH

0 )

Rumus bangunnya adalah sebagai berikut:

3 - C = CH - CH

2 --- CH2 - CH - CH2 - CH2 - OH

CH

3. Sitronellal (C 10 H 16

CH

O)

Rumus bangunnya adalah sebagai berikut:

3 - C = CH – CH2 --- CH2 - C = CH - C - H

CH

3 CH

Tabel 1 Susunan kimia minyak sereh wangi

3

Susunan kimia sereh wangi yang ditanam adalah seperti pada Tabel 1.

No Senyawa Penyusunan Kadar (%)

1 2 3 4 5 6 7 8

Sitronellal Geraniol Sitronellol Geraniol Asetat Sitronellil Asetat L – Limonene

Elemol & Seskwiterpene lain Elemene & Cadinene

32 – 45 12 – 18 12 – 15 3 – 8 2 – 4 2 – 5 2 – 5 2 – 5 Sumber : Ketaren (1985)

2.3 Transportasi

Transportasi ikan hidup dapat diartikan sebagai suatu tindakan memindahkan ikan dalam keadaan hidup dengan memberikan perlakuan tertentu. Untuk menjaga agar kelangsungan hidup ikan tetap tinggi setelah sampai ditempat tujuan, maka diperlukan perlakuan-perlakuan tertentu yang diharapkan mampu mempertahankan ikan agar tetap hidup dalam jangka waktu yang lama.

Menurut Jangkaru (2001), secara garis besar pengangkutan ikan hidup dibagi dalam dua sistem yaitu sistem terbuka dan sistem tertutup. Pada pengangkutan sistem terbuka, ikan yang diangkut berhubungan langsung dengan udara bebas, sebaliknya pengangkutan sistem tertutup, ikan yang diangkut akan terlindungi dari udara bebas dan juga dari sinar matahari, sistem ini banyak dipraktekkan untuk pengangkutan jarak jauh dan lama (lebih dari 24 jam). Waktu pengangkutan sebaiknya dilakukan pada sore atau malam hari, pada suhu rendah. demikian pada waktu pembongkaran sebaiknya pada sore atau malam hari.

Sebelum ditransportasikan, ikan sebaiknya dipuasakan terlebih dahulu selama 24 jam dengan tujuan untuk mengosongkan saluran pencernaan agar

metabolisme menurun. Faktor yang sangat penting dalam transportasi adalah ketersediaan oksigen terlarut yang memadai. Akan tetapi hanya dengan faktor ini saja tidak menjamin ikan berada dalam kondisi yang baik. Kemampuan ikan untuk mengkonsumsi oksigen juga dipengaruhi oleh toleransi ikan terhadap stres,

suhu air, pH, konsentrasi CO2, akumulasi amoniak, ikan terlalu aktif, infeksi

bakteri, dan luka fisik akibat penanganan yang kasar.

Hal penting yang perlu diperhatikan dalam transportasi ikan hidup adalah (a) meningkatkan suplai oksigen dengan cara mengganti udara dengan oksigen murni, meningkatkan tekanan pada wadah, dan mengurangi konsumsi oksigen rata-rata (b) mengontrol metabolisme, dengan cara mengurangi laju buangan metabolisme dan menetralisasi atau menghilangkan hasil metabolisme (Nemoto 1957).

Menurut Huet (1971), faktor utama yang mempengaruhi transportasi ikan hidup dengan mempertimbangkan persediaan oksigen dalam alat transportasi antara lain :

(a) Spesies ikan: kebutuhan ikan terhadap oksigen bervariasi sesuai dengan spesiesnya.

(b) Umur dan ukuran ikan: ikan yang lebih kecil memiliki kebutuhan oksigen lebih tinggi dibandingkan dengan ikan yang lebih besar.

(c) Ketahanan relatif ikan: ikan yang diberi pakan alami lebih tahan dibandingkan dengan ikan yang diberi pakan buatan, serta ikan dalam kondisi yang siap memijah memiliki daya tahan yang rendah

(d) Suhu air: pada suhu rendah mengakibatkan kadar oksigen di dalam air tinggi, karena kebutuhan oksigen ikan akan menurun.

(e) Lama waktu angkut: makin pendek jarak angkut makin tinggi kepadatannya. (f) Cara angkut dan lama istrahat: makin cepat pengangkutan dan makin baik

prasarana pengangkutan serta waktu istrahat yang pendek, kemungkinan keberhasilan pengangkutan makin besar.

(g) Sifat alamiah alat pengangkut: pengangkutan dengan wadah kayu menyebabkan peningkatan suhu air lebih lambat dibandingkan dengan wadah logam, tetapi wadah kayu dapat mengisolasi panas dalam wadah.

(h) Kondisi klimatologi: hal ini dipengaruhi oleh suhu air di dalam wadah maupun kandungan oksigen terlarutnya.

Liviawaty dan Afrianto (1990), menyatakan bahwa goncangan dapat berdampak positif yaitu membantu difusi oksigen ke dalam air. Selain oksigen yang cukup dalam kantong plastik, yang perlu diperhatikan ikan harus sehat, serta kualitas air dan kondisi pengangkutan yang memadai.

2.3.1 Kemasan

Kemasan yang baik dalam pengangkutan sistem tertutup adalah

menggunakan plastik polyetilen dengan ketebalan plastik 0,03 mm, karena ringan,

mudah didapat dan murah, Liviawaty dan Afrianto (1990). Lebih lanjut dikatakan bahwa, penggunaan kantong plastik pada pengangkutan jarak jauh sebaiknya diletakkan di dalam kotak stirofom untuk mengurangi kontak yang terjadi antara air di dalam kantong dengan temperatur lingkungan yang relatif lebih panas. Garbrards (1965) menyatakan bahwa penggunaan wadah plastik yang diletakkan dalam stirofom meningkatkan kelangsungan hidup 99,9%.

2.3.2 Kepadatan ikan

Kepadatan ikan adalah bobot ikan yang berada dalam suatu wadah dalam waktu tertentu. Kepadatan ikan yang diangkut bergantung pada volume air, berat ikan, spesies, ukuran ikan, lama pengangkutan, suplai oksigen dan suhu (Jhingran dan Pullin 1985). Kepadatan yang biasa digunakan dalam pengangkutan ikan

kerapu macan adalah berkisar antara 10-12 ekor/kantong., 200kasi pribadi )

2.4 Persyatan Media Pengangkutan

Air sebagai media, baik untuk perawatan maupun pemberokan sebelum dan sesudah pengangkutan harus memenuhi persyaratan bagi kesehatan ikan, yaitu bebas dari partikel tanah, bahan organik, kontaminasi hama, parasit atau penyakit , bahan-bahan polusi yang dapat mengganggu kesehatan dan kehidupan ikan (Jhingran dan pullin 1985). Kualitas air yang paling berpengaruh terhadap

kelangsungan hidup ikan antara lain: Oksigen terlarut, suhu, salinitas, CO2 , pH

2.4.1 Oksigen Terlarut

Oksigen terlarut (DO) adalah banyaknya kandungan oksigen yang terlarut di dalam suatu perairan yang dinyatakan dalam mg/L. Kelarutaan oksigen dalam air dipengaruhi oleh suhu, salinitas, agitasi dan tekanan. Menurut Boyd (1982), kelarutan oksigen dalam air menurun dengan meningkatnya suhu dan kelarutan gas dalam air menurun dengan meningkatnya salinitas. Tekanan udara terhadap oksigen terlarut dapat mempercepat proses kelarutan dan pelepasan oksigen.

Konsentrasi DO adalah salah satu parameter kualitas air yang penting. Kekurangan oksigen merupakan penyebab utama kematian ikan secara mendadak dan dalam jumlah yang besar. Mempertahankan kondisi oksigen dalam kisaran normal akan membantu mempertahankan kondisi ikan selama penanganan. Konsentrasi DO yang terlalu rendah menimbulkan pengaruh yang buruk terhadap kesehatan ikan seperti anoreksia, stres pernapasan, hipoksia jaringan, ketidak sadaran, bahkan kematian (Wedemeyer 1996).

Langkosono (2006) menyatakan bahwa DO yang baik bagi ikan kerapu adalah 3,95-4,28 ml/L, sedangkan Pescod dan Okun (1973) menyatakan bahwa

kandungan O2 terlarut yang baik untuk kehidupan ikan harus lebih dari 2 ppm.

Menurut Huet (1971) kadar terendah yang dapat ditoleransi oleh ikan dalam pengangkutan adalah 2-3 mg/L. Kebutuhan ikan akan oksigen berbeda-beda, bergantung pada spesies, ukuran, aktivitas ikan, toleransi terhadap stres, suhu, pH,

CO2 dan amoniak (Boyd 1992).

2.4.2 Suhu

Kelarutan gas-gas dalam air termasuk oksigen dipengaruhi oleh suhu. Jhingran dan Pullin (1985) menyatakan bahwa kriteria temperatur yang ideal untuk pengangkutan ikan tropis adalah 20-24ºC. Peningkatan suhu dapat menyebabkan penurunan konsentrasi oksigen terlarut, karena akan meningkatkan laju metabolisme dan konsumsi oksigen ikan. Penurunan suhu air akan mengakibatkan respon imunitas menjadi lambat, nafsu makan dan pertumbuhan berkurang (Wedemeyer 1996). Kisaran suhu air yang optimal untuk pemeliharaan

ikan kerapu macan adalah 26-31ºC (Sutarmat et al. 2003). Menurut Langkosono

Berka (1986) menyatakan bahwa kandungan oksigen terlarut bukan merupakan faktor pembatas dalam transportasi ikan hidup apabila suhu air tidak banyak berubah sehingga tidak mempengaruhi aktifitas metabolisme ikan. Suhu sangat mempengaruhi tingkat konsumsi oksigen, peningkatan suhu akan meningkatkan laju metabolisme dan menyebabkan konsumsi oksigen pada jaringan lebih tinggi, sehingga kandungan oksigen terlarut berkurang (Berka

1986). Menurut Wibowo et al. (1997) pada suhu 21-27 0C cenderung terjadi

peningkatan metabolisme sehingga laju respirasi dan ekskresi amoniak meningkat.

2.4.3 Salinitas

Salinitas perairan menggambarkan kandungan garam dalam suatu perairan. Pada umumnya salinitas disebabkan oleh 7 ion utama yaitu : natrium (Na), kalium

(K), kalsium (Ca), magnesium (Mg). Klorit (Cl), sulfat (SO4) dan bikarbonat

(HCO3). Salinitas dinyatakan dalam satuan g/kg atau promil (‰) (Effendi 2003).

Salinitas ikan kerapu berkisar antara 34,259 – 34,351‰ (Langkosono 2006). Sedangkan menurut Kantor Menteri Negara dan Lingkungan Hidup (1988) salinitas untuk ikan kerapu adalah berkisar antara 33 – 35 ‰.

2.4.4 Karbondioksida (CO2)

Karbondioksida dalam air pada umumnya merupakan hasil respirasi dari

ikan dan mikroba. Kadar CO2 lebih tinggi dari 10 mg/L diketahui bersifat racun

bagi ikan. Kadar karbondioksida tinggi juga menunjukkan lingkungan air yang asam meskipun demikian karbondioksida diperlukan dalam proses pembufferan.

Kadar karbondioksida lebih dapat ditoleransi oleh ikan dibandingkan

dengan amoniak, bahkan banyak ikan yang hidup pada air dengan kadar CO2

lebih besar dari 60 mg/L (Boyd 1992). Kadar CO2 sebesar 50 - 100 mg/L dapat

membunuh ikan dalam waktu yang relatif lama. Kadar CO2 dalam air juga

mempengaruhi nilai pH air. Apabila kandungan CO2 dalam air tinggi maka nilai

pH air rendah dan sebaliknya bila kandungan CO2

2.4.5 pH

rendah maka nilai pH tinggi (Boyd 1992).

Nilai pH merupakan suatu ekpresi dari konsentrasi ion hidrogen (H+) di

dalam air. Nilai pH sangat penting sebagai parameter kualitas air karena ia mengontrol tipe dan laju kecepatan reaksi beberapa bahan di dalam air. Selain itu

ikan dan makhluk-makhluk akuatik lainnya hidup pada selang pH tertentu, sehingga dengan diketahuinya nilai pH maka kita akan tahu apakah air tersebut sesuai atau tidak untuk menunjang kehidupan mereka.

Besaran pH berkisar dari 0 (sangat asam) sampai dengan 14 (sangat basa/alkalin). Nilai pH kurang dari 7 menunjukkan lingkungan yang masam sedangkan nilai diatas 7 menunjukkan lingkungan yang basa (alkalin), sedangkan pH = 7 disebut sebagai pH netral. Fluktuasi pH air sangat ditentukan oleh alkalinitas air tersebut. Apabila alkalinitasnya tinggi maka air tersebut akan mudah mengembalikan pH-nya ke nilai semula dari setiap "gangguan" terhadap perubahan pH. Dengan demikian kunci dari penurunan pH terletak pada penanganan alkalinitas dan tingkat kesadahan air.

2.4.6 Alkalinitas

Alkalinitas secara umum menunjukkan konsentrasi basa atau bahan yang mampu menetralisir kemasamaan dalam air. Secara khusus, alkalinitas sering disebut sebagai besaran yang menunjukkan kapasitas pembufferan dari ion bikarbonat, dan sampai tahap tertentu ion karbonat dan hidroksida dalam air. Ketiga ion tersebut di dalam air akan bereaksi dengan ion hidrogen sehingga menurunkan kemasaman dan menaikan pH. Alkalinitas biasanya dinyatakan

dalam satuan ppm (mg/l) kalsium karbonat (CaCO3). Air dengan kandungan

kalsium karbonat lebih dari 100 ppm disebut sebagai alkalin, sedangkan air dengan kandungan kurang dari 100 ppm disebut sebagai lunak atau tingkat alkalinitas sedang (Boyd 1992).

Pada umumnya lingkungan yang baik bagi kehidupan ikan adalah dengan nilai alkalinitas diatas 20 ppm. Air alami yang memiliki alkalinitas 40 mg/L atau

lebih CaCO3

2.4.7 Kesadahan

akan lebih produktif daripada yang alkalinitasnya dibawah nilai tersebut (Moyle 1945; Mairs 1966 diacu dalam Boyd 1982).

Kesadahan sangat penting artinya bagi para pembudidaya karena kesadahan merupakan salah satu petunjuk kualitas air yang diperlukan bagi ikan. Tidak semua ikan dapat hidup pada nilai kesadahan yang sama. Dengan kata lain, setiap jenis ikan memerlukan prasarat nilai kesadahan pada selang tertentu untuk

hidupnya. Disamping itu, kesadahan juga merupakan petunjuk yang penting dalam hubungannya dengan usaha untuk memanipulasi nilai pH.

Secara lebih rinci kesadahan dibagi dalam dua tipe, yaitu: (1) kesadahan

umum ("general hardness" atau GH) dan (2) kesadahan karbonat ("carbonate

hardness" atau KH). Kesadahan umum atau "general hardness" merupakan

ukuran yang menunjukkan jumlah ion kalsium (Ca++) dan ion magnesium (Mg++)

dalam air. Ion-ion lain sebenarnya ikut pula mempengaruhi nilai GH, akan tetapi pengaruhnya diketahui sangat kecil dan relatif sulit diukur sehingga diabaikan. Kesadahan karbonat atau KH merupakan besaran yang menunjukkan kandungan

ion bikarbonat (HCO3-) dan karbonat (CO3

--• 0 - 70 ppm : sangat rendah (sangat lunak)

) di dalam air. Dalam akuarium air tawar, pada kisaran pH netral, ion bikarbonat lebih dominan, sedangkan pada akuarium laut, ion karbonat lebih berperan. Disamping dua tipe kesadahan tersebut, dikenal pula tipe kesadahan yang lain yaitu yang disebut sebagai kesadahan total. Kesadahan total merupakan penjumlahan dari kesadahan umum

dan kesadahan karbonat (O-fish.com). Berikut adalah kriteria selang kesadahan

yang biasa digunakan:

• 70 - 140 mg/l : rendah (lunak)

• 140 - 210 mg/l : sedang

• 210 - 320 mg/l : agak tinggi (agak keras)

• 320 - 530 mg/l : tinggi (keras)

Sawyer dan McCarty 1967 diacu dalam Boyd 1992 mengklasifikasikan derajat kesadahan air sebagai berikut:

• 0 - 75 mg/l : lunak

• 75 - 100 mg/l : sedang

• 150 - 300 mg/l : sadah

• >320 mg/l : sangat sadah

2.4.8 Amoniak

Amonia adalah produk sisa metabolisme yang utama dari ikan, dikeluarkan melalui insang dan urine. Sumber utama amonia di perairan berasal dari ekskresi amoniak oleh ikan atau sisa metabolisme (Boyd 1992).

Dalam perairan, amonia terdapat dalam dua bentuk, yakni; NH (amonia +₄

terionisasi, karena memiliki ion positif) dan NH3 (tak terionisasi, karena tidak

memiliki ion), yang secara keseluruhan disebut total ammonia nitrogen (TAN),

proporsinya sangat bervariasi bergantung pada pH dan suhu. Jika pH dan suhu

meningkat maka jumlah NH3 meningkat, demikian pula sebaliknya. NH3 adalah

bentuk amonia yang lebih beracun dibanding NH4+ bagi organisme perairan

(Spotte 1970). Bentuk kandungan NH3 dan NH4+ dalam air bergantung pada

konsentrasi ion hidrogen dalam air. Air dengan pH yang rendah memiliki ion

hidrogen lebih banyak sehingga bentuk NH4+ lebih dominan, sehingga NH4+

lebih tidak beracun dibandingkan NH3.. Jika pH meningkat di atas 7,2 maka

jumlah ion hidrogen akan berkurang dan mengakibatkan NH3 lebih dominan.

Apabila konsentrasi amoniak pada lingkungan meningkat maka ekskresi amoniak pada ikan akan menurun sehingga kadar amoniak dalam darah dan jaringan akan meningkat (Boyd 1992). Di dalam wadah pengangkutan ikan ekskresi amoniak penting diketahui karena jika ikan yang terus menerus

terekspos NH3 pada konsentrasi lebih dari 0,02 mg/l dapat menurunkan

pertumbuhan dan semakin rentan terhadap penyakit (Boyd 1992). Toksisitas akut

amonia untuk ikan laut berkisar 0.54 mg/L NH3-N untuk Centropristis striata

(Weirich dan Riche 2006 dalam Rodriguez et al. 2007) sampai 1.77 mg/L NH3-N

untuk Menidia beryllina (Miller et al. 1990 dalam Rodriguez et al. 2007).

2.4.9 Nitrit

Nitrit merupakan senyawa antara selama proses oksidasi amonia menjadi

nitrat (NO3), reaksinya berlangsung dengan cepat dan dipengaruhi oleh jumlah

konsentrasi amonia yang dioksidasi sehingga memiliki orde reaksi 2 (K2). Colt

(2006) menyatakan nitrit yang berbahaya adalah jika nitrit bergabung dengan ion

hidrogen membentuk asam nitrous (HNO2

Menurut Lewis et al. (1986) toksisitas nitrit (NO

-N) yang berupa asam kuat dan karena tidak bermuatan listrik sehingga dengan bebas dapat berdifusi melintasi membran insang atau melalui transpor aktif.

2-N) bagi ikan nila untuk

LC50-96 jam pada pH 7,9 adalah 16 mg/L, 5 mg/L (Losordo et al. 1977), dan

batas aman nitrit adalah < 1 mg/L (Timmons et al. 2002). Mekanisme efek toksik

bereaksi dengan besi II (Fe2+) menghasilkan besi III (Fe3+). Hal ini akan mengurangi kemampuan sel darah merah untuk mengikat oksigen, yang

mengakibatkan penyakit darah coklat (methemoglobin) yang dapat mematikan

ikan karena kekurangan oksigen (hypoxia) (Wiesman et al. 2007). Almedras

(1987 diacu dalamRodriguez et al. 2007) menyatakan bahwa nitrit kurang toksik

terhadap ikan laut. Toksisitas akut nitrit terhadap ikan laut antara 30 mg/L NO2-N

untuk Paralichthys orbignyanus (Bianchini et al. 1996 diacu dalamRodriguez et

al. 2007) sampai 675 mg/L NO2

LC

-N untuk Chanos chanos (Almedras 1987 diacu

dalam Rodriguez et al. 2007).

Kurang toksiknya nitrit terhadap ikan laut disebabkan oleh adanya garam

(NaCl) pada media air laut. Masser et al. (1999) menyebutkan bahwa sodium dan

klorida dapat menghambat (block) nitrit berdifusi ke insang ikan selama proses

osmoregulasi. Oleh karena itu, untuk menekan toksisitas nitrit pada budidaya ikan tawar biasanya diberikan garam (NaCl) 0.02-0.2 %.

2.5 Anastesi

Anastesi secara umum didefinisikan sebagai suatu keadaan yang disebabkan oleh aplikasi agen eksternal yang menyebabkan hilangnya sensasi melalui depresi pada sistem syaraf. Anastesi dapat berupa anastesi lokal atau umum bergantung

pada aplikasi anastesi tersebut (Ackerman et al. 2009).

Anastesi berperan dalam kegiatan transportasi ikan bandeng air tawar

(Hendrajat et al. 2006) dan sockeye salmon (Woody 2002), serta membantu dalam

kegiatan penanganan penyakit ikan (Wildgoose 2000). Demikian pula dalam kegiatan penelitian untuk mengetahui aktivitas otak ikan Atlantik salmon yang

diberi kejutan listrik (Robb et al. 2003), pertumbuhan ikan gilthead bream (Sparus

auratus) yang diberi pakan beberapa jenis asam amino (Gomez-Requeni et al. 2003), gangguan perkembangan gonad ikan grass carp yang dibudidayakan di

daerah tropis (Glasser et al. 2003), sampling panjang dan berat ikan Atlantic

salmon (Salmo salar) (Berril et al. 2003) serta peningkatan kadar LH dan

mempercepat proses ovulasi ikan karper (Cyprinus carpio L.) baik dalam skala

laboratorium dan kondisi alamiah (Mikolajczyk et al. 2003).

50 adalah konsentrasi material (obat bius) dalam air yang diasumsikan

kepercayaan 95% umumnya berasal dari analisis statistik terhadap kematian organisme uji setelah dilakukan pengujian terhadap beberapa konsentrasi larutan bius dalam jangka waktu tertentu. Kisaran waktu organisme diekspos dalam

larutan bius harus dituliskan secara spesifik (misalnya 96 h LC50) (NIWA

Ecotoxicology Laboratory 1998).

Obat bius dapat disuntikkan langsung ke tubuh ikan, namun kebanyakan

prosedur anastesi dilakukan dengan cara dip atau bath treatment dalam sebuah

static bath atau dengan aliran air. Pada suatu kasus, obat bius dilarutkan secara langsung ke dalam air, dikasus lain, obat bius harus dilarutkan terlebih dahulu dalam pelarut organik kemudian dilarutkan ke dalam air. Ikan kemudian dipaparkan dalam larutan bius dengan konsentrasi obat bius yang telah ditentukan berdasarkan waktu pemaparannya. Konsentrasi obat bius umumnya dinyatakan

dalam satuan ppm yang setara dengan mg/L atau gram per kubik meter air (g/m3

a. Berpindahnya bahan penenang atau pembius dari lingkungan ke dalam muara

pernafasan organisme.

) (Bowser 2001). Pada prinsipnya proses penenangan atau pembiusan pada ikan

meliputi tiga tahap yaitu :

b. Difusi membran dalam tubuh yang menyebabkan terjadinya penyerapan bahan

penenang ke dalam darah.

c. Sirkulasi darah dan difusi jaringan menyebarkan substansi tersebut ke seluruh

tubuh. Kecepatan distribusi dan penyerapan oleh sel ini sangat beragam, bergantung pada persediaan darah dan kandungan lemak pada setiap jaringan.

Dengan sifat bahan pembius yang mudah larut dalam air dan lemak, proses difusi zat penenang dalam aliran darah melalui insang terjadi sangat cepat. Masuknya cairan penenang ke dalam sistem darah akan disebarkan ke seluruh tubuh termasuk otak dan jaringan lain. Pengaruh bobot zat penenang terhadap ikan ditentukan oleh kadar zat penenang yang terkandung dalam jaringan otak atau sarafnya (Hunn 1970 diacu dalam Pratiwi 2000).

2.5.1 Tahapan anastesi

Dalam kegiatan anastesia pada ikan, ikan secara berturut-turut mengalami perlambatan pergerakan dan perlambatan reaksi terhadap stimuli yang diberikan;

lambatnya laju respirasi, kehilangan kontrol keseimbangan dan pada akhirnya ikan tidak dapat merespon stimuli dari luar (Davis 2000).

Tabel 2 Tahapan anastesi pada ikan (Summerfelt dan Smith, 1990 diacu dalam

Cooke et al. 2004)

Tahapan

anastesi Deskripsi Karakteristik

0 Normal Reaktif terhadap stimuli eksternal, laju bukaan

operkulum dan detak jantung normal

1 Light sedation Secara perlahan-lahan kehilangan reaktifitas terhadap stimuli, secara perlahan-lahan laju bukaan operkulum menurun namun keseimbangan masih terjaga

2 Deep sedation Reaktivitas terhadap semua stimuli hilang secara total, namun demikian masih reaktif terhadap stimuli yang keras

3 Kehilangan

keseimbangan secara parsial

Elastisitas otot hilang secara sebagian, pergerakan ikan tidak teratur, peningkatan laju bukaan operkulum hanya reaktif ketika ikan disentuh dengan keras.

4 Kehilangan

keseimbangan secara total

Elastisitas otot dan keseimbangan hilang secara total, laju bukaan operkulum menjadi rendah, kehilangan refleksi spinal

5 Kehilangan

reaktifitas reflex

Reaktifitas hilang secara total, pergerakan operkulum menjadi lambat dan tidak teratur, denyut jantung menjadi lamban, kehilangan semua bentuk reflex

6 Medullary collapse

Tidak ada pergerakan operkulum yang diikuti oleh berhentinya detak jantung.

Tabel 3 Tahapan anastesi dan pemulihan (dimodifikasi dari Summerfelt dan

Smith 1990; Keene et al. 1998 diacu dalam Mylonas et al. 2005).

Tahapan Deskripsi Tingkah laku

Anastesia

A Kehilangan

keseimbangan

3 Kehilangan keseimbangan secara total, pergerakan

ikan hanya disebabkan dari sirip dada, pergerakan operkulum normal

A5 Deep anastesia Tidak ada pergerakan, kehilangan responsitas

terhadap stimuli berupa sentuhan, pergerakan operkulum lamban dan tidak teratur

Pemulihan

R3 Mulai pulih Keseimbangan pulih secara menyeluruh dan

permanen, pergerakan operkulum normal

R Pulih

secara total

5 Reponsif terhadap stimuli visual, dapat berenang

2.6. Stres

Proses pembiusan yang dilakukan untuk menenangkan atau memingsankan ikan merupakan suatu tindakan yang menyebabkan ikan menjadi stres. Akibat yang ditimbulkan karena pengaruh stres adalah ikan memberikan respon yang dimulai dengan respon neuroendokrin. Respon ini meliputi proses-proses fisiologi yang melibatkan sistem saraf dan sistem hormon/endokrin yang disebut sebagai pengaruh primer. Akibat yang ditimbulkan dari pengaruh primer yaitu adanya gangguan metabolik dan osmotik secara cepat yang disebut sebagai pengaruh sekunder. Dengan kata lain ketika ikan dihadapkan pada kondisi stres maka sistem neuroendokrin akan melepaskan hormon ke dalam darah. Hal ini menyebabkan naiknya konsentrasi dari substansi ini yang kemudian mengganggu

proses-proses fisiologis yang disebut dengan respon stress primer. Pengaruh

primer dan sekunder merupakan faktor-faktor fisiologi yang dapat diukur. Hormon utama yang dihasilkan dari respon primer adalah dilepaskannya senyawa cathecholamin (adrenalin dan noradrenalin) dan corticosteroid (cortisol dan cortison). Pengaruh sekunder meliputi gangguan osmoregulasi, penurunan asam ascorbic darah, perubahan dalam ikatan oksigen dan hemoglobin, naiknya metabolisme laktat dan lipid, perubahan kimia darah dan hematologi serta turunnya daya kekebalan tubuh terhadap penyakit. Disamping itu pengaruh sekunder juga dapat menaikkan kadar gula darah (hiperglisemia) (Spotte 1992).

2.7 Histopatologi dan Gambaran Darah Ikan 2.7.1 Histopatologi ikan

Histologi adalah cabang ilmu biologi yang mempelajari tentang jaringan. Patologi adalah kajian tentang penyakit atau kajian tentang adaptasi yang tidak cukup terhadap perubahan lingkungan eksternal dan internal (Spector 1993). Histopatologi adalah metode yang sensitif dan secara biologis dapat mengukur efek stres hewan terhadap lingkungan. Perubahan histopatologi merupakan indikator faktor stres terhadap lingkungan.

2.7.2 Gambaran Darah Ikan

Sel darah tersusun atas sel darah merah (eritrosit) dan sel darah putih (leukosit), dan kedua tipe sel ini terbentuk pada jaringan hematopoetik ginjal. Volume darah pada ikan lebih sedikit dibandingkan dengan vertebrata lainnya,

yaitu sekitar 3% dari berat tubuhnya. Darah mempunyai fungsi vital diantaranya adalah mengedarkan nutrien seperti ke seluruh sel-sel tubuh, membawa oksigen ke seluruh jaringan tubuh serta membawa hormon dan enzim ke organ yang memerlukannya, menjaga keseimbangan tubuh dan untuk mengangkut hasil buangan metabolisme seperti karbon dioksida dan asam laktat. Darah juga

membawa materi ion anorganik Na+, Mg2+, Cl-, dan senyawa organik seperti

hormon, vitamin, dan beberapa protein plasma. Pemeriksaan darah penting artinya untuk mendiagnosa suatu penyakit dan kondisi ikan. Penyimpangan fisiologi ikan menyebabkan komponen-komponen darah juga mengalami perubahan. Perubahan gambaran darah dapat menentukan kondisi atau status kesehatan ikan (Wedemeyer 1996).

2.7.2.1 Sel Darah Merah

Sel darah merah terbentuk di jaringan hematopoetik ginjal dan pada ikan

merupakan sel yang terbanyak. Lagler et al. (1977) membagi darah ikan

berdasarkan warna dan fungsinya yaitu sel darah merah (eritrosit) dan sel darah

putih (leukosit). Sel darah merah ikan pada umumnya mempunyai inti dengan

bentuk oval hingga bundar, intinya kecil dengan sitoplasma, berwarna merah

kekuningan dan berukuran 10 x 11 μm sampai 12 x 13 μm dengan diameter inti

4-5 μm dan jumlah sel darah merah 1,43 x 106 sel/mm3 sampai 3,18 x 106

sel/mm3. Pada ikan bertulang keras jumlah sel darah merah dalam keadaan

normal berkisar antara 1,05-3,00 x 106 sel/mm3

Jumlah sel darah putih lebih sedikit dibandingkan dengan sel darah merah. Penyimpangan sel darah putih dari keadaan normal mempunyai arti klinis penting untuk evaluasi proses penyakit (Dallman dan Brown 1989). Sel darah putih dibedakan menjadi dua golongan berdasarkan ada tidaknya butir-butir (granula) . Sel darah merah berfungsi sebagai transport oksigen. Rendahnya jumlah eritrosit menandakan ikan menderita anemia dan kerusakan organ ginjal, sedangkan tingginya jumlah eritrosit menandakan ikan dalam keadaan stres (Wedemeyer dan Yasutake 1977; Nabib dan Pasaribu 1989). Faktor-faktor yang mempengaruhi jumlah sel darah merah adalah spesies, perbedaan induk (genetik), kondisi nutrisi, aktifitas fisik, dan umur (Dallman dan Brown 1989).

dalam sel, yaitu agranulosit dan granulosit. Agranulosit dibagi menjadi limposit, trombosit, dan monosit, sedangkan granulosit berupa netrofil. Sel darah putih berdiferensiasi pada ginjal menjadi beberapa tipe khusus seperti limposit, netrofil, dan trombosit. Netrofil berfungsi melawan penyakit bersama-sama dengan eosinofil yang disebabkan oleh organisme mikroseluler seperti bakteri dan virus. Sifat melawan penyakit ini disebut sifat fagositik yaitu memakan dan

menghancurkan sel penyebab penyakit (Lagler et al. 1977). Secara normal pada

individu yang sehat jumlah sel darah putih di dalam darah adalah 1% dari total

jumlah darah. Sel darah putih tidak berwarna, jumlahnya setiap mm3 berkisar

20.000-150.000 butir (Affandi dan Tang 2002). Peningkatan sel darah putih dapat disebabkan oleh penyakit, infeksi, parasit, stres akibat penanganan dan pengaruh lingkungan (Guyton dan Hall, 1997). Kadar limfosit pada ikan kerapu normal adalah 72% dari total leukositnya, sedangkan yang diberi perlakuan

hormon steroid LHRHa dosis 50 mg/kg bobot tubuh yaitu 54,5% (Fris et al.

2003). Limfosit merupakan jenis leukosit yang paling dominan dalam leukosit dengan kisaran 71,1-82,88% dari total leukosit (Rostagi 1997).

Jumlah limfosit yang tinggi dalam sirkulasi darah akan diimbangi dengan jumlah netrofil yang rendah dan sebaliknya. Penurunan jumlah limfosit dalam darah terjadi karena sebagian besar limfosit dari sirkulasi darah berkonsentrasi

dalam jaringan dimana terjadi peradangan (Jawad et al. 2004)

2.7.2.3 Hemoglobin

Hemoglobin adalah protein dalam eritrosit yang tersusun atas protein globin tidak berwarna dan pigmen heme yang dihasilkan dalam eritrosit. Blaxhall (1972) menyatakan bahwa kadar hemoglobin merupakan indikator anemia, selanjutnya Anderson dan Swicki (1993) menyatakan bahwa peningkatan kadar hemoglobin menunjukkan ikan berada dalam keadaan stres. Siakpere (2005) menyatakan bahwa secara fisiologis, hemoglobin menentukan tingkat ketahanan tubuh ikan dikarenakan hubungannya yang sangat erat dengan daya ikat oksigen oleh darah. Kemampuan darah untuk mengangkut oksigen bergantung pada kadar Hb dalam

darah (Lagler et al. 1977). Wells et al. (2005) menyatakan bahwa 1 gram

2.7.2.5 Glukosa

Tingkat glukosa darah merupakan indikator terjadinya stres awal pada ikan karena tingkat glukosa darah sangat sensitif terhadap hormon yang mengatur stres (Mazeaud dan Mazeaud 1991). Stres dapat disebabkan oleh berbagai faktor seperti perubahan kualitas air atau penanganan yang salah pada waktu pengangkutan, sehingga dapat menyebabkan ikan mengalami hiperglisemia dan mempengaruhi kesehatan ikan, pertumbuhan dan kelangsungan hidup (Carmichael 1984;

Robertson et al. 1988; Barton dan Iwama 1991). Mekanisme terjadinya

hiperglisemia (tingkat glukosa darah tinggi) akibat stres yaitu dengan pemecahan glikogen otot dan hati melalui jalur glikogenolisis yang akan menghasilkan glukosa (Mazeaud dan Mazeaud 1981).

Keberadaan glukosa darah ditentukan oleh pakan, waktu akhir makan, status simpanan glikogen hati, stadia perkembangan dan musim (Mazeud dan Mazeud 1981). Apabila kadar glukosa darah mengalami penurunan dari tingkat normal, maka hormon insulin, tiroid, glukagon, epinefrin dan steroid dengan segera akan berfungsi untuk meningkatkan glukosa darah ke tingkat normal melalui pemecahan glikogen, deaminasi asam amino dan konversi dari gliserol yang merupakan bagian dari molekul lemak. Jika jumlah glukosa darah mengalami peningkatan diatas nilai normal, maka hanya hormon insulin yang dapat berperan dalam menurunkan glukosa ke level normal melalui transport aktif glukosa dalam darah untuk masuk ke dalam seluruh sel tubuh (Mazeud dan Mazeud 1981).

Penelitian ini dilaksanakan selama 2 bulan dari bulan Februari sampai dengan bulan April 2010. Kegiatan pemeliharaan benih ikan dilakukan di Laboratorium Lingkungan Akuakultur, analisis darah dan histologi insang dilakukan di Laboratorium Kesehatan Ikan, Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Pengujian kadar glukosa darah dilakukan di Laboratorium Fisiologi Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor.

3.2 Bahan dan Alat

Bahan yang digunakan dalam penelitan ini adalah sebagai berikut: kantong plastik, es batu, minyak sereh , dan benih ikan kerapu macan ukuran 7±0,5 cm. Alat yang digunakan adalah sebagai berikut: kotak stirofom (ukuran 100 x 50 x

34 cm3

3.3 Prosedur Penelitian

), akuarium untuk wadah pemeliharaan, termometer, pH-meter, DO-meter dan spektrofotometer.

3.3.1 Puasa Ikan

Puasa ikan dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui kemampuan ikan bisa bertahan hidup tanpa diberi makan. Penentuan puasa ikan dilakukan dengan

cara menyiapkan akuarium berukuran 40 × 32 × 30 cm3

3.3.2 Tingkat Konsumsi Oksigen

yang telah dibersihkan dan dikeringkan selama 2 hari kemudian diisi air laut sebanyak 25 liter yang diaerasi selama 2 hari lalu dimasukkan ikan kerapu macan berukuran 7±0,5 cm sebanyak 10 ekor. Pengamatan tingkah laku ikan serta kualitas air dilakukan setiap hari. Kualitas air yang ukur yaitu oksigen terlarut dengan menggunakan DO-meter, suhu dengan termometer dan pH dengan pH-meter

Tingkat konsumsi oksigen (TKO) ditentukan bertujuan untuk menghitung kebutuhan oksigen benih ikan kerapu macan per jam, dengan cara menyiapkan 3 stoples bervolume 3 liter yang telah dibersihkan dan dikeringkan, kemudian diisi air bersalinitas 31 g/l yang sebelumnya diaerasi selama 3 hari hingga jenuh. Ikan uji yang digunakan berukuran 7±0,5 cm dengan bobot 4,02 gram. Ikan uji dipuasakan selama 2 hari kemudian dimasukkan kedalam wadah masing-masing

dengan kepadatan 3 ekor setiap wadah, kemudian ditutup dengan penutup plastik. Kandungan DO diukur setiap jam selama 4 jam dengan memasukkan DO-meter ke dalam stoples.

3.3.3 Uji Letal Konsentrasi (LC50-96 jam)

Uji letal konsentrasi yang mematikan selama 96 jam (LC50-96 jam) dengan

4 tingkat konsentrasi termasuk kontrol. Untuk mendapatkan konsentrasi yang dikehendaki dilakukan pengenceran dari larutan stok berkonsentrasi 1000 ppm,

dengan menggunakan rumus: N1V1 = N2V2

3.3.4 Analisis Darah

. Selanjutnya konsentrasi tersebut ditetapkan sebagai konsentrasi perlakuan yaitu perlakuan A (60 ppm), B (80 ppm), C (100 ppm), D (120 ppm) dan E (140 ppm), kemudian ikan yang sudah dipuasakan selama 48 jam dimasukkan kedalam media yang sudah mengandung konsentrasi minyak sereh tertentu, lalu diamati tingkah laku ikan sampai ada perlakuan yang mengalami kematian 50%.

Analisis darah yang dilakukan selama penelitian meliputi parameter :

1) Sel darah merah (eritrosit)

Penghitungan jumlah sel darah merah dilakukan pada ikan normal, pasca pengangkutan dan 7 hari setelah pemeliharaan. Pengamatan dan penghitungan jumlah sel darah merah dilakukan berdasarkan prosedur dari Blaxhall dan Daisley (1973). Darah diambil dari ikan dengan menggunakan injeksi yang terlebih dahulu telah diisi dengan cairan antikoagulan untuk mencegah terjadinya penggumpalan darah. Darah yang tersedot dimasukkan kedalam ependorf, dan kemudian darah dihisap dengan menggunakan pipet pencampur sampai dengan skala 0,5 dan ditambahkan dengan larutan hayems yang dihisap dengan menggunakan pipet yang sama hingga mencapai skala 101. Setelah itu, pipet digoyang membentuk angka delapan selama 3-5 menit. Tetesan pertama dibuang dan tetesan berikutnya diteteskan kedalam hemositometer dan ditutup dengan kaca penutup. Penghitungan dilakukan pada 5 kotak kecil yaitu pada sudut kiri atas, sudut kanan atas, sudut kiri bawah, sudut kanan bawah dan pada bagian tengah.

Jumlah sel darah merah yang terhitung dikonversikan dengan rumus :

2) Sel darah putih (leukosit)

Penghitungan jumlah sel darah putih dilakukan pada ikan normal, pasca pengangkutan dan 7 hari setelah pemeliharaan. Pengamatan dan penghitungan jumlah sel darah putih dilakukan berdasarkan prosedur dari Blaxhall dan Daisley (1973). Metode pengambilan darahnya sama dengan metode pengambilan darah merah. Darah dihisap dengan pipet pencampur sampai dengan skala 11. Kemudian pipet digoyangkan hingga membentuk angka delapan selama 3-5 menit. Tetesan pertama dibuang, dan tetesan selanjutnya diteteskan diatas hemositometer lalu ditutup dengan kaca penutup. Penghitungan dilakukan pada 5 kotak besar.

Jumlah sel darah putih yang terhitung dikonversikan dengan rumus :

Jumlah sel darah putih = ∑ sel darah putih terhitung x 50 sel/mm

4) Kadar Hemoglobin (Hb)

3

3) _{Diferensiasi Leukosit}

Dengan cara menghitung jumlah neutrofil, limfosit, monosit, trombosit dalam darah tersebut dengan pengamatan dilakukan sebanyak 10 lapang pandang kemudian perhitungan dalam bentuk persentase

Pengukuran kadar hemoglobin pada prinsipnya adalah mengkonversikan hemoglobin dalam darah ke dalam bentuk asam hematin oleh asam klorida dan dinyatakan dalam persen (% Hb). Kadar HB dilakukan pada ikan normal, pasca pengangkutan dan 7 hari setelah pemeliharaan (Anderson dan Swicki 1993). Prosedur pengukuran kadar hemoglobin. Mula-mula darah diisap menggunakan

pipet sahli hingga skala 20 mm3, kemudian dipindahkan ke dalam tabung Hb yang

berisi HCl 0,1 N sampai skala 10 (kuning). Didiamkan selama 3–5 menit agar Hb bereaksi dengan HCl membentuk asam hematin, kemudian diaduk dan ditambahkan aquadestila (sedikit demi sedikit) hingga warnanya sama dengan standar. Pembacaan skala dilakukan dengan melihat tinggi permukaan larutan yang dikocok dengan skala lajur g% yang menunjukkan banyaknya Hb dalam gram setiap 100 ml darah dan dinyatakan dalam persentase (% Hb).

4. Glukosa Darah

Pengukuran dilakukan untuk mengevaluasi tingkat stres pada ikan. Prosedur pengukuran glukosa darah ikan yaitu: darah diambil dari ikan dengan menggunakan injeksi yang telah diisi dengan cairan antikoagulan untuk mencegah terjadinya penggumpalan darah. Darah yang tersedot dimasukkan ke dalam tabung ependorf, kemudian disentrifuge dengan kecepatan 12.000 rpm selama 5 menit. Setelah terbentuk lapisan-lapisan yang terdiri dari lapisan plasma yang jernih di bagian atas, selanjutnya ambil 10 µ l lapisan plasma tambahkan kedalam tabung reaksi berisi 1 ml regen (glucose liquicolor) selanjutnya dihomogenkan dengan menggunakan vortex, diinkubasi selama 10 menit pada suhu kamar, baca

nilai absorban pada spektrofotometer dengan λ 500 nm. Kadar glukosa darah

diukur mengikuti Wedemeyer dan Yatsuke (1977) yaitu : Absorban sampel

Glukosa darah = x Konsentrasi standar Absorban standar

Analisis Histopatologi

Histopatologi dilakukan pada ikan normal, pasca pengangkutan, dan setelah pemeliharaan 7 hari diukur di Laboratorium Kesehatan ikan Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan IPB. Jaringan yang diamati adalah insang. Pengamatan dilakukan dengan membuat preparat histologi. Prosedur pembuatan preparat histologi insang disajikan pada Lampiran 2.

3.3.6 Kualitas Air

Parameter kualitas air yang diukur dalam penelitian ini seperti terlihat pada Tabel 4 dan dilakukan pengukuran setiap 24 jam sekali.

Tabel 4 Parameter air yang diukur dan alat yang digunakan

Parameter Satuan Metode/alat yang digunakan

Suhu oC Termometer

Salinitas g/L Refraktometer

pH pH-meter

Oksigen terlarut (DO) mg/L DO-meter

Karbon dioksida (CO2) mg/L Titrasi (larutan NaOH 0,0227 N, indikator phenolphthalein

(pp), indikator Methyl Orange 0,05%

Amoniak mg/L Pereaksi uji amoniak (1 tetes MnSO4

Nitrit

, 0,6 ml phenat, 0,5 ml chlorox) Spektofotometer panjang gelombang 630

mg/L Sulfanilamit 5 tetes, NED 5 tetes Spektofotometer panjang

gelombang 543

Alkalinitas mg/L Titrasi (PP 2 tetes, BCG+MR 2 tetes, HCl 0,0200 N)

Kesadahan mg/L Titrasi (Buffer hardnes 1 ml, EBT 2-3 tetes, EDTA 0,0141

3.3.7 Derajat Kelangsungan Hidup dan Laju Pertumbuhan Spesifik

Pengamatan kelangsungan hidup (survival rate, SR) ikan kerapu macan

dilakukan setiap 6 jam sekali selama pengangkutan. Derajat kelangsungan hidup ikan kerapu ditentukan dengan menggunakan rumus (Effendi 1978) :

% 100

x No

Nt Sr =

Keterangan :

SR = derajat kelangsungan hidup (%)

Nt = jumlah hewan uji pada akhir penelitian (ekor) No = jumlah hewan uji pada awal penelitian (ekor)

Laju pertumbuhan spesifik (spesific growth rate, SGR) ikan kerapu macan

ditentukan dengan menggunakan rumus (Zonneveld 1991) : %

100 ) 0 ln (ln

x t

W Wt

SGR= −

Keterangan: SGR = Laju pertumbuhan spesifik

Wt = Berat tubuh ikan pada waktu t

W0 = Berat tubuh ikan pada awal penelitian

t = Waktu penelitian

3.3.8 Prosedur Pengangkutan

Penelitian ini terdiri dari 4 perlakuan masing-masing 2 ulangan. Setiap kantong dilengkapi dengan kran pengeluaran air, kemudian diisi air laut dan

oksigen dengan perbandingan 1 : 3 kemudian diikat dengan karet gelang, setelah

itu dimasukkan ke dalam kotak stirofom dan diberi es batu kemudian ditutup. Pengangkutan dilakukan secara simulasi yaitu dengan memasukkan stirofom ke dalam bak kemudian air dialirkan dari kran dan juga digerakkan dengan pompa. Pengamatan keadaan ikan dilakukan setiap 6 jam dengan cara mengeluarkan kantong dari stirofom, sedangkan pengambilan sampel air dilakukan setiap 24 jam sekali dengan mengalirkan air dari kran sehingga kantong tetap dalam keadaan tertutup.

3.4 Rancangan Percobaan

Penelitian ini terdiri dari 4 perlakuan dengan 2 ulangan. Rancangan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan model rancangan menurut (Steel dan Torrie 1989) :

Yij = µ + τi + έij

Keterangan:

Yij = data pada perlakuan ke-i dan ulangan ke-j

µ = nilai tengah data

τi = pengaruh perlakuan ke-i

έij = kesalahan percobaan pada perlakuan ke-i dan ulangan ke-j

Rancangan perlakuannya adalah sebagai berikut:

K = Tanpa minyak sereh

A = Minyak sereh dosis 10 mg/L

B = Minyak sereh dosis 20 mg/L

C = Minyak sereh dosis 30 mg/L

3.5 Pengumpulan Data

Data yang dikumpulkan adalah data kematian ikan, berat ikan, TAN, suhu,

pH, oksigen, CO2

3.6 Analisis Data

, salinitas, alkalinitas, kesadahan, nitrit, sel darah merah, sel darah putih, hemoglobin, hematokrit, glukosa darah, dan histologi insang. Kemudian data yang terkumpul digunakan untuk menghitung nilai parameter penelitian yaitu tingkat kelangsungan hidup, laju pertumbuhan spesifik (SGR), kualitas air, jumlah SDM, jumlah SDP, hematokrit, hemoglobin, N:L rasio, dan glukosa. Kemudian histologi insang digunakan untuk mengetahui tingkat kerusakan yang terjadi pada insang. Data glukosa darah digunakan untuk mengetahui tingkat stres pada ikan.

Data berupa TAN, amoniak, sel darah merah, sel darah putih, hemoglobin, hematokrit, N:L rasio, glukosa darah, kelangsungan hidup dan laju pertumbuhan dianalisis dengan menggunakan analisis ragam (anova) dengan uji F pada selang kepercayaan 95 % untuk menentukan apakah perlakuan berpengaruh. Jika perlakuan berpengaruh nyata, maka untuk melihat perbedaan antar perlakuan diuji

lanjut dengan menggunakan uji Beda Nyata Jujur (BNJ). Data kualitas air dianalisis secara deskriptif dengan menampilkan tabel dan grafik, sedangkan histopatologi menggunakan gambar. Analisis data dilakukan dengan bantuan program Ms Excel 2003 dan SPSS 16.0

4.1.1 Puasa Ikan

Pemuasaan ikan dilakukan pada awal penelitian yaitu sebelum dilakukan pengepakan, dengan tujuan untuk mengetahui lama waktu ikan hidup tanpa diberi makan. Kemampuan puasa ikan dapat dilihat pada Tabel 5. Dari hasil puasa ikan didapatkan bahwa ikan kerapu macan dengan bobot rata-rata 4,02±0,132 gram mampu bertahan hidup dalam keadaan puasa lebih dari 8 hari.

Tabel 5 Kemampuan puasa ikan Hari

ke-

Σ ikan hidup

(ekor) Σ ikan mati (ekor) SR (%) Suhu

(ºC) pH

DO

(mg/L) Tingkah laku ikan

1 2 3 4 5 6 7 8 10 10 10 10 10 10 10 10 0 0 0 0 0 0 0 0 100 100 100 100 100 100 100 100 27 26 26 26 26 27 26 26 7,4 7,2 7,1 7,4 7 7,2 7 7,1 5,8 5,5 4,8 4,6 4,3 4,8 4,3 4,2 Berenang aktif Berenang aktif Berenang aktif Berenang aktif Berenang aktif Berenang aktif Berenang aktif Berenang aktif

4.1.2 Tingkat Konsumsi Oksigen

Pengukuran tingkat konsumsi oksigen (TKO) dilakukan pada awal penelitian sebelum pengepakan ikan, untuk mengetahui kebutuhan oksigen ikan per jam. Dari hasil uji TKO ikan kerapu macan, diperoleh bahwa pada ukuran

ikan 4,02 gram membutuhkan oksigen sebesar 0,352 mg O2.g-1.jam-1, sehingga

kebutuhan oksigen untuk ikan kerapu macan ukuran 4,02 gram yang diangkut

selama 56 jam adalah sebesar 79,24 mg O2.g-1.jam-1

4.1.3 Uji Letal Konsentrasi (LC)

.

Berdasarkan hasil uji pendahuluan, maka dilakukan uji lanjut untuk mendapatkan kisaran kritis konsentrasi mematikan 50% ikan uji selama 96 jam

(LC50-96 jam) dengan menggunakan 5 konsentrasi yaitu 60 mg/l, 80 mg/l, 100

Tabel 6 Hasil pengamatan tingkat mortalitas ikan kerapu selama uji LC50

Perlakuan (mg/L)

-96 jam

Waktu pengamatan/jumlah mortalitas Total

24 48 72 96

0 - - - - -

60 - - 1 - 1

80 1 2 1 1 5

100 2 2 2 1 7

120 2 3 2 1 8

140 3 4 2 1 9

Berdasarkan atas hasil analisis probit, diperoleh estimasi konsentrasi kritis

50% mortalitas ikan kerapu macan selama 96 jam (LC50-96 jam) adalah 85,93

mg/L. Dengan demikian, nilai ini menunjukkan bahwa pada konsentrasi 85,93 mg/L dapat mematikan 50% ikan kerapu macan selama 96 jam. Berdasarkan pada kriteria Walker (1990) menunjukkan bahwa minyak sereh memiliki tingkat

toksisitas > 100-1000 mg/L.

Hubungan antara tingkat mortalitas dan homogenitas pengaruh minyak sereh sebagai bahan uji terhadap tingkat mortalitas berdasarkan dari hasil analisis regresi probit menunjukkan hubungan yang linear dengan persamaan y = -7,66 + 6,54x. Hal ini menunjukkan bahwa setiap penambahan dua satuan konsentrasi

akan meningkatkan tingkat mortalitas sebesar 5,42 %. R2= 90,3%, artinya 90,3%

kematian ikan kerapu macan disebabkan oleh perlakuan.

Untuk tingkat homogenitas ( uji χ2) pengaruh perlakuan adalah χ2 = 1,380.

Nilai ini lebih besar dari 0,05 sehingga menunjukkan bahwa minyak sereh berpengaruh signifikan terhadap tingkat kematian ikan uji dengan tingkat kepercayaan 95 %.

4.1.4 Analisis Darah

Pengamatan gambaran darah yang dilakukan berupa jumlah sel darah merah, sel darah putih, kadar hematokrit, kadar hemoglobin, N:L rasio, dan glukosa darah. Data hasil pengamatan gambaran darah ikan setelah transportasi, ditampilkan pada Lampiran 1, data gambaran darah setelah 7 hari pemeliharaan ditampilkan pada Lampiran 2.

a. Sel Darah Merah Ikan Kerapu Macan

Jumlah sel darah merah ikan kerapu macan pasca pengangkutan dan setelah 7 hari pemeliharaan disajikan pada Gambar 2.

Gambar 2 Sel darah merah ikan kerapu macan pasca pengangkutan dan setelah 7 hari pemaliharaan.

Gambar 2 menunjukkan bahwa hasil pengukuran sel darah merah ikan kerapu macan pasca pengangkutan mengalami peningkatan pada semua perlakuan dibandingkan dengan jumlah sel darah merah ikan normal kecuali pada perlakuan A. Peningkatan jumlah sel darah merah yang tertinggi diperoleh pada perlakuan

C dengan nilai (3,30x106 sel/mm3), diikuti perlakuan K dengan nilai (3,11x106

sel/mm3), perlakuan B (2,4x106 sel/mm3) dan perlakuan A (1,28x106 sel/mm3

b. Sel Darah Putih Ikan Kerapu Macan

). Hasil uji statisitik menunjukkan bahwa perlakuan A tidak berbeda nyata dengan perlakuan N, sedangkan perlakuan K tidak berbeda nyata dengan perlakuan C. Pada pengukuran jumlah sel darah merah setelah 7 hari pemeliharaan diperoleh bahwa pada perlakuan A tidak berbeda nyata dengan perlakuan B, sedangkan pada perlakuan lain seperti perlakuan N dengan C berbeda nyata.

Jumlah sel darah putih ikan kerapu macan pasca pengangkutan dan setelah 7 hari pemeliharaan disajikan pada Gambar 3. Pada gambar tersebut ditunjukkan bahwa nilai hasil pengukuran sel darah putih ikan kerapu macan pasca

pengangkutan yang diperoleh pada perlakuan K sebesar 3,56x104 sel/mm3,

perlakuan C 2,92x104 sel/mm3, perlakuan B 2,77x104 sel/mm3

1.24 3.11 1.28 2.4 3.3 1.24 1.82 1.92 2.42 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5

N K A B C

Perlakuan Ju m la h S e l D a ra h M e ra h ( x 1 0 6 )

Pasca Pengangkutan Setelah 7 hari Pemeliharaan

dan perlakuan A

2,6x104 sel/mm3. Dari hasil uji statistik diperoleh bahwa setiap perlakuan tidak memberikan perbedaan yang nyata dengan perlakuan lainnya. Jumlah SDP

setelah 7 hari pemeliharaan diperoleh pada perlakuan C sebesar 4,27x104

sel/mm3, diikuti oleh perlakuan B 3,52x104 sel/mm3, dan perlakuan A 2,9x104

sel/mm3

Gambar 3 Sel darah putih ikan kerapu macan pasca pengangkutan dan setelah 7 hari pemeliharaan.

c. Konsentrasi Hb Ikan Kerapu Macan (%)

Hasil pengukuran hemoglobin ikan kerapu macan pasca pengangkutan dan setelah 7 hari pemeliharaan dapat dilihat pada Gambar 4. Gambar tersebut menunjukkan hasil pengukuran hemoglobin ikan kerapu macan pasca pengangkutan yang tertinggi diperoleh pada perlakuan K sebesar (5,65%), diikut i oleh perlakuan B sebesar (4,7%), perlakuan C (4,6%) dan perlakuan A (3,8%). Dari hasil uji statistik diperoleh bahwa perlakuan B berbeda dengan perlakuan N dan A, tetapi perlakuan N tidak berbeda dengan perlakuan A, B, dan C. Jumlah hemoglobin setelah 7 hari pemeliharaan nilai tertinggi diperoleh pada perlakuan C sebesar (5,7%), diikuti oleh perlakuan B (4%) dan perlakuan A (3,4%). Hasil uji statisitik menunjukkan bahwa perlakuan N tidak berbeda dengan perlakuan A dan B, tetapi perlakuan N berbeda dengan perlakuan C.

. Dari hasil uji statistik diperoleh bahwa tidak ada perbedaan antar perlakuan (p>0,05).

2.72

3.56

2.6 2.77 2.92

2.72 2.9 3.52 4.27 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5

N K A B C

Perlakuan Ju m la h S e l D a ra h P u ti h ( x 1 0 4)

Pasca Pengangkutan Setelah 7 hari Pemeliharaan

a a

a _a

a

a a

a a

Lampiran 5 Suhu

Jam ke-

rata-rata media air pengepakan

Suhu

K A B C

0 27 27 27 27

24 22±0 22±0 22±0 22±0

48 22±0 22±0 22±0 22±0

56 22±0 22±0 22±0 22±0

Lampiran 6 Konsentrasi Salinitas

Jam ke-

rata-rata media air pengepakan

Salinitas (mg/L)

K A B C

0 31,0 31,0 31,0 31,0

24 31,8±0,4 31,0±0,0 31,0±0,0 31,0±0,0 48 31,5±0,7 31,5±0,7 31,5±0,7 32,0±0,0 56 31,5±0,7 31,5±0,7 31,5±0,7 32,0±0,0

Lampiran 7 pH

Jam ke-

rata-rata media air pengepakan

pH

K A B C

0 7,20 7,20 7,20 7,20

24 6,76±0,17 6,71±0,23 6,50±0,04 6,50±0,01 48 6,75±0,11 6,42±0,28 6,29±0,18 6,31±0,18 56 6,75±0,03 6,56±0,03 6,39±0,07 6,43±0,04

Lampiran 8 DO

Jam ke-

rata-rata media air pengepakan

DO (mg/L)

K A B C

0 4,31 4,31 4,31 4,31

24 4,61±0,156 3,99±0,962 4,42±0,537 4,5±0,226 48 3,49±0,255 3,63±0,742 3,79±0,474 3,06±0,707 56 2,81±0,764 3,31±0,905 2,5±0,424 2,57±0,134

Lampiran 9 Karbondoiksida

Jam ke-

rata-rata media air pengepakan

CO2 (mg/L)

K A B C

0 13,983 13,983 13,983 13,983

24 37,455±3,531 14,982±0 17,479±3,531 32,461±3,531 48 27,966±11,300 25,969±8,475 25,969±8,475 25,969±8,475 56 41,950±8,475 32,561±6,498 28,965±7,062 27,966±11,300

Lampiran 10 TAN rata-rata media air pengepakan

Jam ke- TAN (mg/L)

K A B C

0 0,544 0,544 0,544 0,544

24 0,852±0,031 0,656±0,084 0,761±0,217 0,933±0,005 48 6,076±0,481 4,792±0,481 5,208±0,481 5,785±0,481 56 7,775±0,006 6,459±0,318 7,193±0,331 7,344±1,291

Lampiran 11 NH

3 Jam ke-

rata-rata media air pengepakan

NH3 (mg/L)

K A B C

0 0,0056 0,0056 0,0056 0,0056

24 0,002±0,001 0,002±0,001 0,006±0,006 0,001±0,000 48 0,017±0,007 0,001±0,001 0,014±0,009 0,0046±0,003 56 0,021±0,000 0,011±0,002 0,019±0,002 0,008±0,001

Lampiran 12 Kesadahan rata-rata media air pengepakan

Jam ke- Kesadahan (mg/L)

K A B C

0 5045,04 5045,04 5045,04 5045,04 24 5085,08±169,88 4944,94±84,94 4664,66±28,31 4804,80±0,00 48 4744,74±311,44 8328,32±622,88 12692,68±566,25 15895,88±792,75 56 4524,52±566,25 8048,04±226,50 12012,00±56,63 16176,16±16176,16

Lampiran 13 Alkalinitas rata-rata media air pengepakan

Jam ke- Alkalinitas (mg/L)

K A B C

0 85,20512 85,20512 85,20512 85,20512 24 80,721±38,0521 143,503±6,342 192,833±25,368 264,584±25,368 48 132,292±9,513 82,963±34,881 121,081±12,684 206,286±44,394 56 147,988±12,684 67,267±12,684 116,596±6,342 186,106±15,855

Lampiran 14 Nitrit rata-rata media air pengepakan

Jam ke- Nitrit (mg/L)

K A B C

0 0,269±0 0,269±0 0,269±0 0,269±0 24 0,978±0,162 1,022±0,050 1,118±0,022 1,296±0,085 56 1,887±0,220 2,376±0,000 2,351±0,135 2,024±0,057

Lampiran 15 Jumlah ikan hidup selama pengangkutan

Jam

ke-

Data ikan hidup (ekor)

K1 K2 A1 A2 B1 B2 C1 C2

0 20 20 20 20 20 20 20 20

12 20 20 20 20 20 20 20 20

24 18 19 20 20 20 20 20 20

36 13 12 20 20 20 20 20 20

42 11 10 20 20 20 20 20 20

48 7 6 20 20 20 20 19 18

Lampiran 16 Tingkat kelangsungan hidup ikan selama pengangkutan

Jam SR Perlakuan (%)

K A B C

0 100 100 100 100

12 100 100 100 100

24 92,5 100 100 100

36 62,5 100 100 100

42 52,5 100 100 100

48 32,5 100 100 92,5

56 22,5 97,5 92,5 52,5

Lampiran 17 Jumlah ikan yang mati selama pengangkutan

Jam Data kematian ikan (ekor)

K1 K2 A1 A2 B1 B2 C1 C2

0 0 0 0 0 0 0 0 0

12 0 0 0 0 0 0 0 0

24 2 1 0 0 0 0 0 0

36 7 8 0 0 0 0 0 0

42 9 10 0 0 0 0 0 0

48 7 6 0 0 0 1 2 1

56 5 4 1 2 2 1 7 7

Lampiran 18 Kelangsungan hidup selama pemeliharaan

Perlakuan Ulangan Waktu Pengamatan

0 I II III IV

A

I 10 10 9 9 9

II 10 10 8 8 8

Total 20 20 17 17 17

Rerata 10 10 8.5 8.5 8.5

Stdev 0 0 0.71 0.71 0.71

B

I 10 10 8 7 7

II 10 10 8 6 5

Total 20 20 16 13 12

Rerata 10 10 8 6.5 6

Stdev 0 0 0 0.71 1.41

C

I 10 10 8 6 5

II 10 10 7 6 4

Total 20 20 15 12 9

Rerata 10 10 7.5 6 4.5

Lampiran 19

Persentase ikan hidup selama pemeliharaan

Perlakuan Ulangan Waktu Pengamatan

0 I II III IV

A

I 100 100 90 90 90

II 100 100 80 80 80

Total 200 200 170 170 170

Rerata 100 100 85 85 85

Stdev 0 0 7.07 7.07 7.07

B

I 100 100 80 70 70

II 100 100 80 60 50

Total 200 200 160 130 120

Rerata 100 100 80 65 60

Stdev 0 0 0 7.07 14.14

C

I 100 100 80 60 50

II 100 100 70 60 40

Total 200 200 150 120 90

Rerata 100 100 75 60 45

Stdev 0 0 7.07 0.00 7.07

Lampiran 20 Pengukuran bobot tubuh ikan Kerapu macan selama

pemeliharaan

Perlakuan Ulangan Waktu Pengamatan (minggu)

0 1 2 3 4

A (10 mg/l) 1 5.58 5.91 6.36 6.98 7.16 2 5.22 5.45 5.8 6.81 7.69 Rata-rata 5.40 5.68 6.08 6.90 7.43 Stdev 0.25 0.33 0.40 0.12 0.37

B (20mg/l

1 4.81 5.12 5.53 5.78 6.19 2 5.07 5.51 6.03 6.22 6.13 Rata-rata 4.94 5.32 5.78 6.00 6.16 Stdev 0.18 0.28 0.35 0.31 0.04

C (30 mg/l)

1 4.86 5.02 5.56 5.98 6.36 2 5.39 5.4 5.5 6.55 6.58 Rata-rata 5.125 5.21 5.53 6.27 6.47 Stdev 0.37 0.27 0.04 0.40 0.16

Lampiran 21 Laju pertumbuhan Spesifik ikan kerapu macan selam

pemeliharaan

Perlakuan Ulangan Laju Pertumbuhan Spesifik ln W0 ln Wt SGR

A 1 1.56 1.97 1.46

2 1.65 2.04 1.39

Rata-rata 1.61 2.01 1.43

Stdev 0.06 0.05 0.05

B 1 1.57 1.82 0.89

2 1.62 1.81 0.68

Rata-rata 1.67 1.98 0.79

Stdev 0.14 0.09 0.15

C 1 1.67 1.85 0.64

2 1.68 1.88 0.71

Rata-rata 1.675 1.875 0.68

Stdev 0.00 0.00 0.05

ANOVA SGR

Sumber keragama JK db KT F P-value F tabel Perlakuan 0.648911 2 0.324455 34.30181 0.008576 9.552094 Galat 0.028377 3 0.009459

Total 0.677287 5

Tukey SGR

Perlakuan N

Subset for alpha = .05

1 2

C 2 .6750

B 2 .7850

A 2 1.4250

Sig. .548 1.000