UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
5. Dekokta Dekok adalah infus pada waktu lebih lama ≥ 30 menit dan temperatur
sampai titik didih air Depkes RI, 2000.
2.5 Enzyme-Linked Immunosorbent Assay ELISA
ELISA merupakan metode immunoassay yang menggunakan enzim sebagai label. Metode ELISA dibagi 2 jenis teknik yaitu teknik
kompetitif dan non kompetitif. Teknik non kompetitif ini dibagi menjadi dua yaitu sandwich dan indirek. Pemeriksaan hormon menggunakan teknik
kompetitif dan sandwich Kricka, 1999; Asihara, 2001.
2.5.1 Competitive Assay Format
Competitive Assay Format adalah format pengujian dengan kombinasi dari analit yang jumlahnya tidak diketahui pada sampel dan
analit dari referensi Kit untuk bersaing mengikat daerah ikatan antibodi antibody binding site dalam jumlah yang terbatas.
Gambar 2.6 Competitive Assay Format Technical Guide for ELISA, 2013
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Gambar 2.7 keterangan gambar Technical Guide for ELISA, 2013
Gambar 2A menjelaskan, analit sampel yang ditambahkan berkompetisi dengan solid phase adsorbed analit referensi kit untuk mengikat antibodi
berlabel dalam jumlah yang terbatas. Pada gambar 2B menjelaskan, analit referensi yang berlabel dalam larutan dikombinasi dengan analit sampel
berkompetisi untuk mengikat solid phase adsorbed antibody dalam jumlah yang terbatas.
2.5.2 Non Competitive Assay Format
Non competitive assay adalah format pengujian dimana daerah ikatan antibodi yang ada lebih dari jumlah analit yang dideteksi. Sehingga
format non kompetitif ini yang paling sensitif.
Gambar 2.8 Non competitive Assay Technical Guide for ELISA, 2013 Antibodi dengan
berbagai spesifikasi
Antigen dengan berbagai epitop
Protein untuk
memblok nonspecific binding site
Streptavi- din
enzim
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
2.5.3 Sandwich Assay Format
Prinsip dasar dari sandwich assay adalah sampel yang mengandung antigen direaksikan dengan antibodi spesifik pertama yang terikat dengan
fase padat. Selanjutnya ditambahkan antibodi spesifik kedua yang berlabel
enzim dan ditambahkan substrat dari enzim tersebut Asihara, 2001.
Gambar 2.9 Sandwich Assay Format Technical Guide for ELISA, 2013
Keuntungan metode ELISA yaitu: 1. Cukup sensitif
2. Reagen relatif murah dan dapat disimpan dalam jangka waktu yang lama 3. Dapat memeriksa beberapa parameter sekaligus
4. Peralatan mudah didapat 5. Tidak menggunakan zat radiasi Asihara, 2001
Kerugian metode ELISA: 1. Pemeriksaan menggunakan enzim sebagai label cukup kompleks karena
akvitas enzim dipengaruhi oleh berbagai faktor Asihara, 2001
2.5.4 Kit ELISA
