BAB III
BAHAN DAN METODE
3.1. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Maret-Agustus 2011, di Laboratorium Mikrobiologi FMIPA, Laboratorium Biologi Tanah dan Rumah Kaca Fakultas
Pertanian Universitas Sumatera Utara. Penelitian ini dilakukan dengan tahapan : 1.
Isolasi Rhizobium dari tanaman kacang kedelai Glycine max L. Merrill pada tanah gambut dan tanah mineral.
2. Uji efektivitas isolat Rhizobium dari tanah gambut dan tanah mineral.
3.2. Bahan dan Alat
Bahan yang digunakan dalam penelitian adalah tanah gambut yang diambil dari Desa Paya Pinang Tebing Tinggi dan isolat kedelai yang diisolasi dari tanah
mineral. Aquades, alkohol 96, benih kedelai varietas Anjasmoro, Kongo red, Na-hipoklorit, larutan NaCl, yeast Ekstrak Manitol Broth YMB, Brom Thymol
Blue, Etanol 100 ml, Media Yeast Ekstrak Manitol Agar YEMA dengan komposisi K
2
HPO
4
0,5 g; MgSO
4
7H
2
O 0,2 g; NaCl 0,1 g; Mannitol 10 g; Yeast cair 100 ml, Agar, 1 L aquades. Alat yang digunakan : oven, autoklaf, botol vial,
mikroskop, tabung reaksi, pengaduk, jarum ose, cawan petri, kertas label, kamera, gelas ukur, Mikroskop, Erlenmeyer, polybag, cangkul, timbangan dan peralatan
Laboratorium lainnya.
Universitas Sumatera Utara
3.3 Pengambilan sampel Tanah Gambut
Sampel tanah gambut diambil di daerah Tebing Tinggi Kebun Paya Pinang. Tingkat kematangan gambut tersebut adalah hemik. Pengambilan sampel
dilakukan dengan metode komposit. Tanah gambut diambil secara acak pada beberapa titik sebanyak 5 kg pada kedalaman 0-20 cm, kemudian tanah
dimasukkan kedalam kantong plastik dan diikat serta diberi label. Untuk mengisolasi Rhizobium dari tanah gambut, tanah tersebut ditanami kedelai untuk
memperoleh bintil akar. Trapping dilakukan di lahan terbuka di Desa Marendal, Deli Tua sampai tanaman kedelai berumur 42 hari. Kemudian bintil akar kedelai
diisolasi, sedangkan untuk isolat pembanding diisolasi dari bintil akar kedelai asal tanah mineral yang diambil di daerah penanaman kedelai di Lubuk Pakam yang
mempunyai pH 6,8.
3.4 Isolasi Bintil Akar Kedelai dari Tanah Gambut dan Tanah Mineral