4.3.6 Persiapan hewan coba aklimatisasi
Hewan coba yang digunakan adalah mencit putih jantan Mus musculus dengan berat badan 20-25 gram dan tikus putih betina Rat
nervicus dengan berat badan 200-250 gram, diaklimatisasi selama dua minggu agar dapat menyesuaikan dengan lingkungannya. Selama
perlakuan, pakan dan minum diberikan secara ad libitum Harmita, 2004.
Hewan uji dipilih sebanyak 25 ekor mencit putih jantan dan 25 ekor tikus putih betina secara acak untuk dibagi menjadi 10 kelompok,
masing-masing terdiri dari 5 ekor. Penentuan jumlah mencit tiap kelompok dihitung berdasarkan rumus Federer, yaitu:
Rumus Federer untuk uji analgetik dan antiinflamasi : n-1 t-1
15 n-1 5-1
15 n-1 4
15 4n – 4
15 n
4,75 ≈ 5
dimana t menunjukkan jumlah perlakuan dan n menunjukkan jumlah ulangan minimal dari tiap perlakuan. Jumlah minimal mencit yang
digunakan tiap kelompok adalah 4,75 ekor atau dibulatkan menjadi 5 ekor. Kelompok perlakuan dibagi secara acak menjadi 5 kelompok
seperti yang terdapat pada tabel berikut:
Tabel 1 . Kelompok perlakuan uji analgetik dan antiinflamasi
No Kelompok
Perlakuan
1 Kontrol negatif
Diberikan NaCMC atau NaCl fisiologis 2
Kontrol positif Diberikan obat analgetik atau obat antiinflamasi
3 Dosis 1
Diberikan ekstrak kering air gambir dosis I 4
Dosis 2 Diberikan ekstrak kering air gambir dosis II
5 Dosis 3
Diberikan ekstrak kering air gambir dosis III
4.3.7 Penetapan Dosis
Untuk uji analgetik
Tabel 2. Kelompok dosis untuk uji analgetik
Dosis I 35 mgKgBB
≈ 0,7 mg20 gBB Dosis II
70 mgKgBB ≈ 1,4 mg20 gBB
Dosis III 140 mgKgBB
≈ 2,8 mg20 gBB
Untuk uji antiinflamasi
Tabel 3. Kelompok dosis untuk uji antiinflamasi
Dosis I 17 mgKgBB
≈ 3,5 mg200 gBB Dosis II
35 mgKgBB ≈ 7 mg200 gBB
Dosis III 70 mgKgBB
≈ 14 mg200 gBB
4.3.8 Persiapan Bahan
A. Pembuatan suspensi asam mefenamat
Asam mefenamat ditimbang sebanyak 18,2 mg digerus perlahan di dalam lumpang, tambahkan 0,5 ml suspensi NaCMC 1 sambil
diaduk homogen, kemudian dilarutkan dengan NaCMC 1 sampai 10 ml dalam gelas ukur.
B. Pembuatan suspensi natrium diklofenak
Natrium diklofenak ditimbang sebanyak 5,15 mg digerus perlahan di dalam lumpang, tambahkan 0,5 ml suspensi NaCMC 1 sambil
diaduk homogen, , kemudian dilarutkan dengan NaCMC 1 sampai 10 ml dalam gelas ukur.
C. Pembuatan karagenan 2 bv
Karagenan ditimbang sebanyak 200 mg, kemudian kemudian dilarutkan dengan NaCl fisiologis sampai 10 ml dalam gelas ukur. Lalu
diaduk dan dipanaskan diatas waterbath sampai larut dengan sempurna.
4.3.9 Metode Pengujian