19
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
diukur dalam EC
50
. Radikal superoksida dapat juga dideteksi dengan oksidasi hidroksilamin, menghasilkan nitrit yang kemudian diukur dengan reaksi
kolorimetri Amelia, 2011.
g. Aktivitas penghambatan radikal hidroksil Kapasitas penghambatan radikal hidroksil dari ekstrak dihubungkan secara
langsung terhadap aktivitas antioksidannya. Metode ini melibatkan pembangkitan in vitro dari radikal hidroksil menggunakan sistem Fe
3+
askorbatEDTAH
2
O
2
berdasarkan reaksi Fenton. Penghambatan dari radikal hidroksil dengan adanya antioksidan diukur Amelia, 2011.
2.7.3. Mekanisme Kerja Antioksidan dengan Metode DPPH
2,2-difenil-1-pikrilhidrazil DPPH merupakan radikal bebas yang stabil pada suhu kamar, berbentuk kristal berwarna ungu dan sering digunakan untuk
mengevaluasi aktivitas antioksidan beberapa senyawa atau ekstrak bahan alam Simanjuntak, Parwati, Lenny, Tamat, Murwani, 2004; Desmiaty, R.,R., 2008,
pp. 72. Radikal bebas DPPH akan ditangkap oleh senyawa antioksidan melalui reaksi penangkapan atom hidrogen dari senyawa antioksidan oleh radikal bebas
untuk mendapatkan pasangan elektron dan mengubahnya menjadi difenil pikril hidrazin DPPH-H. Radikal ini mempunyai kereaktifan rendah, sehingga dapat
mengurangi radikal bebas yang bersifat toksik Simanjuntak, Parwati, Lenny, Tamat, Murwani, 2004; Cholisoh Utami, 2009.
DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen akan membentuk molekul diamagnetik yang stabil. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer
elektron atau radikal hidrogen pada DPPH, akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH Simanjuntak, Parwati, Lenny, Tamat, Murwani, 2004;
Cholisoh Utami, 2009. Struktur molekul senyawa radikal bebas DPPH sebelum dan sesudah berikatan dengan elektron dari senyawa lain dapat dilihat
pada gambar di bawah ini :
20
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
DPPH radikal DPPH non radikal
[Sumber : Molyneux, 2004 ]
Gambar 2.2. Struktur kimia senyawa DPPH radikal dan non radikal
Adapun reaksi peredaman DPPH dengan senyawa antiradikal bebas dapat dilihat pada contoh sebagai berikut :
Difenil Pikrilhidrazil Ungu Difenil Pikrilhidrazin Kuning
[Sumber : Prakash et al. 2001 dalam Amelia, 2011]
Gambar 2.3. Reduksi DPPH dari senyawa peredam radikal bebas