Efek Ekstrak Bunga Brokoli terhadap Ekspresi Prokolagen Tipe I pada Tingkat Protein

4. Efek Ekstrak Bunga Brokoli terhadap Ekspresi Prokolagen Tipe I pada Tingkat Protein

Tabel 18. Hasil Ekspresi Protein Prokolagen Tipe I pada Kelompok Perlakuan Kelompok Dosis UVB mJcm 2 Konsentrasi Ekstrak gml protein prokolagen tipe 1 ngml n SD x  1 - - 3 336,344  0,001 2 50 - 3 163,878  0,001 3 50 25 3 179,434  0,002 4 50 50 3 195,972  0,001 5 50 100 3 336,342  0,001 6 100 - 3 132,329  0,002 7 100 25 3 135,624  0,002 8 100 50 3 137,177  0,001 9 100 100 3 168,969  0,001 Konsentrasi Ekstrak 100 80 60 40 20 m R N A P ro ko la ge n tip e 1 70.0 60.0 50.0 40.0 30.0 20.0 R Sq Linear = 0.925 gml  g m l y i = 24,680+0,392 Konsentrasi Ekstrak Gambar 15. Kurva Garis Pola Hubungan antara Konsentrasi Ekstrak Bunga Brokoli dengan Ekspresi mRNA Prokolagen Tipe I pada Penyinaran UVB 100mJcm 2 Universitas Sumatera Utara Tabel di atas menunjukkan bahwa rerata ekspresi protein prokolagen tipe I pada kelompok tanpa penyinaran dan tanpa ekstrak adalah sebesar 336,344ngml. Penyinaran UVB 50mJcm 2 dapat menurunkan ekspresi protein prokolagen tipe I menjadi 163,878ngml. Pemberian ekstrak bunga brokoli konsentrasi 25, 50 dan 100gml dapat meningkatkan ekspresi protein prokolagen tipe I menjadi 179,434, 195,972 dan 336,342ngml. Penyinaran UVB 100mJcm 2 dan tanpa ekstrak dapat menurunkan ekspresi protein prokolagen tipe I menjadi 132,329ngml dibandingkan dengan kelompok tanpa penyinaran dan tanpa ekstrak ataupun kelompok penyinaran 50mJcm 2 dan tanpa ekstrak. Pemberian ekstrak bunga brokoli konsentrasi 25, 50 dan 100gml pada kelompok penyinaran UVB 100mJcm 2 dapat meningkatkan ekspresi protein prokolagen tipe I menjadi 135,624, 137,177 dan 168,969ngml. Universitas Sumatera Utara Tanpa sinar Dosis sinar 50mJcm 2 340 - - 340 320- - 320 300 - - 300 280 - - 280 260 - - 260 240 - - 240 220 - - 220 200 - - 200 180 - - 180 160 - - 160 140 - - 140 120 - - 120 100- - 100 80 - - 80 60 - - 60 40 - - 40 20 - - 20 0 - - 0 Tanpa sinar Dosis sinar 100mJcm 2 340 - -340 320- -320 300 - - 300 280 - - 280 260 - - 260 240 - - 240 220 - - 220 200 - - 200 180 - - 180 160 - - 160 140 - - 140 120 - - 120 100- - 100 80 - - 80 60 - - 60 40 - - 40 20 - - 20 0 - - 0 163,878ngml tanpa ekstrak 195,972ngml konsentrasi ekstrak 50 μgml 179,434ngml konsentrasi ekstrak 25 μgml 336,342ngml konsentrasi 100 μgml 132,329ngml tanpa ekstrak 137,177ngml konsentrasi ekstrak 25 μgml 135,624ngml konsentrasi ekstrak 50 μgml 168,969ngml konsentrasi ekstrak 100 μgml 336.344ngml 336.344ngml Tanpa ekstrak Tanpa ekstrak Gambar 16. Grafik Perbandingan Rerata Ekspresi Protein Prokolagen Tipe I Tanpa Sinar dengan Dosis Sinar UVB 50mJcm 2 Gambar 17. Grafik Perbandingan Rerata Ekspresi Protein Prokolagen Tipe I Tanpa Sinar dengan Dosis Sinar UVB 100mJcm 2 Universitas Sumatera Utara Tabel 19. Gambaran Ekspresi Protein Prokolagen Tipe I Berdasarkan Dosis Penyinaran dan Konsentrasi Ekstrak dengan Uji Anova two ways Dependent Variable Protein Prokolagen tipe I Sumber Variasi Jumlah Kuadrat dk Rata- rata kuadrat F hitung p Dosis sinar Konsentrasi ekstrak Interaksi dosis konsentrasi Error Total Corrected Total 34094,525 41852,762 17483,594 4,20x10 -5 1220951,621 157603,336 1 3 3 18 27 26 34094,525 13950,921 5827,865 2,33x10 -6 1x10 10 6x10 9 2x10 9 0,0001 0,0001 0,0001 0,0001 0,0001 a. R. Squared = 1.000 Adjusted R Squared = 1.000 Dari tabel di atas terlihat bahwa berdasarkan Uji Anova two ways ada pengaruh variasi dosis penyinaran terhadap perubahan ekspresi protein prokolagen tipe I p 0,05. Juga, ada pengaruh variasi konsentrasi ekstrak terhadap perubahan ekspresi protein prokolagen tipe I p 0,05. Artinya, terdapat perbedaan bermakna rerata ekspresi protein prokolagen tipe I berdasarkan dosis penyinaran dan konsentrasi ekstrak Selain itu, terdapat juga interaksi antara dosis penyinaran dan konsentrasi ekstrak saling mempengaruhi terhadap perubahan ekspresi protein prokolagen tipe I p 0,05. Tabel 20. Uji Komparasi Ganda Ekspresi Protein Prokolagen Tipe I Berdasarkan Dosis Penyinaran Kelompok I Kelompok II p S - S 50 S 50 S 100 S 100 0,0001 0,0001 0,0001 Keterangan : S - : tanpa sinar S 50 : dosis sinar 50mJcm 2 S 100 : dosis sinar 100mJcm 2 Universitas Sumatera Utara Tabel di atas menunjukkan bahwa ada yang perbedaan bermakna di antara kelompok tanpa sinar dan kelompok penyinaran 50mJcm 2 p = 0,0001 ataupun 100mJcm 2 p = 0,0001 dan kelompok penyinaran 50 mJcm 2 dengan kelompok penyinaran 100mJcm 2 p = 0,0001 Tabel 21. Uji Komparasi Ganda Ekspresi Protein Prokolagen Tipe I Kelompok I Kelompok II p S -, E - S +, E - S +, E 25 S +, E 50 S +, E100 0,0001 0,0001 0,0001 0,0001 S +, E - S +, E 25 S +, E 50 S +, E100 0,0001 0,0001 0,0001 S +, E 25 S +, E 50 S +, E100 0,0001 0,0001 S +, E 50 S +, E100 0,0001 Keterangan : S - = tanpa sinar E - = tanpa ekstrak S + = dengan sinar E 25 = esktrak konsentrasi 25gml E 50 = ekstrak konsentrasi 50gml E 100 = ekstrak konsentrasi 100gml Tabel di atas menunjukkan bahwa ada perbedaan yang bermakna p 0,05 di antara semua kelompok yaitu antara kelompok tanpa penyinaran tanpa ekstrak dan kelompok penyinaran tanpa ekstrak ataupun dengan ekstrak konsentrasi 25, 50, atau 100gml; kelompok penyinaran tanpa ekstrak dan kelompok penyinaran dengan ekstrak konsentrasi 25, 50, ataupun 100gml; kelompok penyinaran dan ekstrak 25gml dengan kelompok penyinaran dan ekstrak konsentrasi 50 dan 100gml. Demikian juga, kelompok penyinaran dan ekstrak konsentrasi 50gml dengan kelompok penyinaran dan ekstrak konsentrasi 100gml. Universitas Sumatera Utara Tabel 22. Hubungan Konsentrasi Ekstrak Bunga Brokoli dengan Ekspresi Protein Prokolagen Tipe I n r p Konsentrasi ekstrak Protein prokolagen tipe I 50 12 0,975 0.0001 Protein prokolagen tipe I 100 12 0,973 0.0001 Uji Korelasi Spearman’s Correlation is significant at the 0,01 level 2-tailed Keterangan : 50 : dosis sinar UVB 50mJcm 2 100 : dosis sinar UVB 100mJcm 2 r : koefisien korelasi Tabel 22 menunjukkan bahwa terdapat korelasi postif yang signifikan antara konsentrasi ekstrak bunga brokoli dan ekspresi protein prokolagen tipe I pada dosis penyinaran UVB 50mJcm 2 r = 0,975, p 0,01 ataupun 100mJcm 2 r = 0,973, p 0,01. Artinya, semakin tinggi konsentrasi ekstrak bungan brokoli, semakin tinggi ekspresi protein prokolagen tipe I. Konsentrasi Ekstrak 100 80 60 40 20 P rot ei n Pr ok ol age n tipe 1 350.000 300.000 250.000 200.000 150.000 R Sq Linear = 0.893 Ekstrak si Konsentra 757 , 1 027 , 142   i y gml n g m l Gambar 18. Kurva Garis Pola Hubungan Antara Konsentrasi Ekstrak Bunga Brokoli dengan Ekspresi Protein Prokolagen Tipe I pada Penyinaran UVB 50mJcm 2 Universitas Sumatera Utara 5. Hubungan Hasil Ekspresi MMP-1 dan Prokolagen Tipe 1 pada Tingkat mRNA dengan Tingkat Protein Tabel 23. Hubungan Ekspresi MMP-1 dan Prokolagen Tipe 1 pada Tingkat mRNA dengan Tingkat Protein mRNA Protein n r p MMP-1 50 MMP-1 50 12 0,911 0,0001 MMP-1 100 MMP-1 100 12 0,972 0,0001 Prokolagen tipe 1 50 Prokolagen tipe 1 50 12 0,975 0,0001 Prokolagen tipe 1 100 Prokolagen tipe 1 100 12 0,956 0,0001 Uji korelasi Spearman’s Keterangan : 50 : dosis sinar UVB 50mJcm 2 100 : dosis sinar UVB 100mJcm 2 r : koefisien korelasi Dari tabel di atas tampak bahwa terdapat hubungan yang signifikan antara hasil ekspresi mRNA MMP-1 dan protein MMP-1 pada dosis Konsentrasi Ekstrak 100 80 60 40 20 Pr ot ei n Pr ok ol ag en ti pe 1 170.000 160.000 150.000 140.000 130.000 R Sq Linear = 0.86 gml n g m l y i = 127,289 + 0,371 Konsentrasi Ekstrak Gambar 19. Kurva Garis Pola Hubungan antara Konsentrasi Ekstrak Bunga Brokoli dengan Ekspresi protein Prokolagen Tipe I pada Penyinaran UVB 100mJcm 2 Universitas Sumatera Utara penyinaran UVB 50mJcm 2 r = 0,911 ; p 0,01. Dijumpai pula hubungan yang signifikan antara ekspresi mRNA MMP-1 pada tingkat mRNA dan protein MMP-1 pada penyinaran UVB 100mJcm 2 r = 0,972 ; p 0,01. Artinya, semakin tinggi ekspresi mRNA MMP-1, semakin tinggi ekspresi protein MMP-1. Demikian pula ada hubungan yang signifikan antara ekspresi prokolagen tipe 1 pada tingkat mRNA dan tingkat protein pada penyinaran UVB 50mJcm 2 r = 0,975 ; p 0,01, ataupun pada penyinaran UVB 100mJcm 2 r = 0,956 ; p 0,01. Artinya, semakin tinggi ekspresi mRNA prokolagen tipe 1, semakin tinggi ekspresi protein prokolagen tipe 1. Dengan demikian, pada penelitian ini terdapat hubungan yang searah antara ekspresi MMP-1 dan prokolagen tipe 1 pada tingkat mRNA dengan tingkat protein. Universitas Sumatera Utara F. Hasil Uji Sitotoksisitas pada Sel Fibroblas Jaringan Kulit Manusia Tabel 24. Hasil Uji Sitotoksisitas Ekstrak Bunga Brokoli terhadap Sel Fibroblas Kulit Manusia Kelompok Konsentrasi ekstrak gml Nilai OD SE x  Viabilitas sel terhadap kontrol I 1000 1,045  0,004 113,46 II 500 1,002  0,020 108,79 III 250 1,076  0,028 116,83 IV 125 1,096  0,241 119,00 V 62.5 1,065  0,024 115,60 VI 31.25 1,146  0,069 124,43 VII 15.625 1,010  0,016 109,60 VIII 7.8125 0,930  0,025 101,08 IX 3.90625 0,967  0,020 104,99 X 1.953125 0,959  0,007 104,13 XI Kontrol sel + media 0,921  0,012 100,00 Pada uji sitotoksisitas dilakukan paparan ekstrak bunga brokoli dengankonsentrasi 1,953125gml hingga 1000gml terhadap sel fibroblas kulit manusia. Pengamatan dengan mikroskop, pada semua konsentrasi tampak gambaran sel fibroblas yang tampak jernih dan terang, menunjukkan sel fibroblas hidup. Pada uji MTT, viabilitas sel fibroblas terhadap paparan ekstrak bunga brokoli Brassica oleracea L. var. italica Plenck pada semua konsentrasi menunjukkan sel fibroblas yang hidup di atas 100. Nilai rerata viabilitas sel adalah 111,79. Universitas Sumatera Utara 102

BAB V PEMBAHASAN