Delves 2001, ketika sel terinfeksi virus atau berubah bentuk menjadi sel yang termutasi, molekul permukaannya berubah. Perubahan ini dikenali oleh sel NK,
lalu sel NK membunuh sel tersebut. Sel NK secara fenotip berbeda dengan sel limfosit T maupun sel limfosit B, yaitu tidak memiliki CD3TCR maupun sIg
surface immunoglobulin. Sel ini memiliki petanda CD56 dan CD16. Sel yang terinfeksi virus menghasilkan interferon yang dapat memberi isyarat ke sel pada
jaringan yang berdekatan. Sel NK diduga dapat mengenali sel tumor atau sel yang terinfeksi virus karena sel sasaran tersebut mengekspresikan molekul
glikoprotein pada permukaan sel yang membedakannya dari sel normal. Glikoprotein tersebut kemudian bertindak sebagai lektin yang dapat mengikat sel
NK melalui reseptor yang terdapat pada permukaan sel NK sehingga terjadi ransangan Kresno 1996. Sitolisis terhadap sel tumor dapat terjadi karena
dilepaskannya faktor sitotoksik perforin yang berasal dari granula dalam sel NK. Disamping itu di dalam granula juga terdapat zat yang tahan terhadap faktor
sitotoksik, yaitu kondroitin sulfat A, yang melindungi sel NK terhadap autolisis oleh substansinya sendiri Kresno 1996.
2. Pengujian Proliferasi Limfosit
Proliferasi merupakan fungsi biologis mendasar pada sel limfosit, yaitu meliputi proses diferensiasi dan pembelahan sel. Aktivitas proliferasi limfosit
merupakan salah satu parameter yang dapat digunakan untuk mengukur status imunitas karena proses proliferasi menunjukkan kemampuan dasar dari sistem
imun Roit dan Delves 2001. Limfosit merupakan sel tunggal yang bertahan baik saat dikultur dalam media sintetik lengkap. Respon proliferatif kultur limfosit
dalam media sintetik dapat digunakan untuk menggambarkan fungsi limfosit dan status imun individu Tejasari 2000. Zakaria et al. 1992 menyatakan bahwa
kemampuan limfosit untuk berproliferasi atau membentuk klon menunjukkan secara tidak langsung kemampuan respon imunologik atau tingkat kekebalan.
Pengujian terhadap kemampuan fungsional limfosit dapat dilihat dari kemampuan memberikan respon terhadap mitogen proliferasi sel, kemampuan
membentuk imunoglobulin atau limfokin, dan kemampuan sitotoksisitas sel NK Tejasari 2000. Uji proliferasi limfosit dapat dilakukan melalui pengukuran
kemampuan sel limfosit yang ditumbuhkan dalam kultur sel jangka pendek yang mengalami proliferasi klonal ketika dirangsang secara in vitro oleh antigen atau
mitogen Valentine dan Lederman 2000. Bila sel dikultur dengan senyawa
mitogen, maka limfosit akan berproliferasi secara tidak spesifik. Begitupula, bila limfosit dikultur dengan antigen spesifik maka limfosit akan berproliferasi secara
spesifik. Metode yang lebih sederhana untuk penghitungan jumlah sel yang
berproliferasi adalah metode pewarnaan MTT 3-4,5-Dimethyl-2-thiazolyl-2,5- diphenyl-2H-tetrazolium bromide. Prinsip metode MTT adalah konversi MTT
menjadi senyawa formazan yang berwarna ungu oleh aktivitas enzim suksinat dehidrogenase dari mitokondria sel hidup Kubota et al. 2003. Reaksi yang
terjadi digambarkan dalam Gambar 3. Jumlah senyawa formazan yang terbentuk adalah proporsional dengan jumlah sel limfosit yang hidup. Selain dengan
metode MTT, perhitungan sel dapat dilakukan dengan metode pewarna trifan biru, yang hanya dapat mewarnai jika membran sel telah rusak, sehingga dapat
digunakan untuk membedakan sel hidup dan mati atau rusak. Sel yang hidup tidak akan berwarna dan berbentuk bulat, sedangkan sel mati akan berwarna
biru dan mengkerut Bird dan Forrester 1981.
Gambar 3 Mekanisme reaksi MTT menjadi MTT formazan Kubota et al. 2003
Beberapa senyawa yang telah diketahui mampu meningkatkan proliferasi sel limfosit adalah : vitamin C dan E Budiharto, 1997, ekstrak bawang putih
Lastari, 1998, ekstrak jahe Zakaria et al., 1999, ekstrak tanaman cincau hijau Pandoyo, 2000 ekstrak air kayu secang Caesalpinia sappan Linn
Puspaningrum 2003, teh daun dan serbuk gel cincau Cyclea Setiawati 2003, b
unga kumis kucing Orthosimphon stamineus benth dan bunga knop Gomphrena globosa L. Aquarini 2005, dan kitooligomer kitin Hertriyani 2005.
Senyawa-senyawa tersebut bekerja melalui mekanisme menginduksi proliferasi sel limfosit.
3. Mitogen sebagai Senyawa Pemacu Proliferasi Se l Limfosit
