b. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol dan Etil Asetat Daun Benalu Kopi
1 ml larutan DPPH 0,3 mM Dimasukkan kedalam tabung reaksi
Ditambahkan 2,5 ml ekstrak metanol daun benalu kopi sesuai dengan variasi konsentrasi
Dihomogenkan Dibiarkan selama 30 menit pada ruang gelap
Diukur absorbansi pada panjang gelombang maksimum 515 nm
Hasil
Dilakukan perlakuan yang sama untuk ekstrak Etil Asetat Daun Benalu Kopi.
3.3.5 Uji Sifat Antibakteri Ekstrak Metanol dan Etil Asetat Daun Benalu Kopi
3.3.5.1 Pembuatan Media Mueller Hinton Agar MHA
7 gram media MHA Mueller Hinton Agar
Dilarutkan dengan 250 ml aquadest dalam gelas erlenmeyer
Dipanaskan sambil diaduk hingga larut dan mendidih
Disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121
o
C selama 15 menit
Media MHA Mueller Hinton Agar steril
Universitas Sumatera Utara
3.3.5.2 Pembuatan Media Nutrient NA, Media Agar Miring dan Stok Kultur Bakteri
7 gram media NA Nutrient Agar
Dilarutkan dengan 250 ml aquadest kedalam gelas erlenmeyer
Dipanaskan sambil diaduk hingga larut dan mendidih
Disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121
o
C selama 15 menit
Media NA Nutrient Agar steril
Dituangkan kedalam tabung reaksi sebanyak 3 ml
Dibiarkan pada temperatur kamar sampai memadat pada
posisi miring membentuk sudut 30-45
o
C Diambil biakan bakteri Staphylococcus
aureus dari strain utama dengan jarum ose laludigoreskan pada media NA
yang telah memadat
Diinkubasi pada suhu 35
o
C selama 18-24 jam
Stok Kultur Bakteri
Dilakukan hal yang sama bakteri Escherichia coli.
Universitas Sumatera Utara
3.3.5.3 Penyiapan Inokulum Bakteri
6,5 gram Media NB Nutrient Broth Dilarutkan dengan 500 ml aquadest
kedalam gelas erlenmeyer Dipanaskan sambil diaduk hingga
larut dan mendidih Disterilkan dalam autoklaf pada
suhu 121
o
C selama 15 menit
Media NB Nutrient Broth steril
Dituangkan kedalam tabung reaksi sebanyak 5 ml
Diambil koloni bakteri dari stok kultur bakteri Staphylococcus aureus
dengan jarum ose
Disuspensikan kedalam Nutrient Broth NB Diinkubasi pada suhu 350
o
C selama 2-3 jam Diukur kekeruhan larutan pada
panjang gelombang 580-600 nm sampai diperoleh transmitan 25
disamakan kekeruhanna dengan standart Mcfarland
Hasil
Dilakukan perlakuan yang sama untuk bakteri Escherchia coli.
Universitas Sumatera Utara
3.3.5.4 Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol dan Etil Asetat Daun Benalu Kopi
0,1 ml Inokulum Bakteri
Dimasukkan kedalam cawan petri steril
Ditambah dengan 15 ml media Mueller Hinton Agar MHA
dengan suhu 45-50
o
C Dihomogenkan sampai media dan
bakteri tercampur rata Dibiarkan sampai media memadat
Dimasukkan kertas cakram yang telah direndam dengan ekstrak
metanol daun benalu kopi dengan berbagai konsentrasi dengan
cawan petri yang telah berisi bakteri
Diinkubasi selama 18-24 jam pada suhu
35
o
C Diukur diameter zona bening
di sekitar cakram dengan jangka sorong
Hasil
Universitas Sumatera Utara
BAB 4
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian