23
BAB 3 METODE PENELITIAN
3.1. Desain Penelitian
Desain penelitian yang digunakan adalah desain deskriptif.
3.2. Waktu dan Tempat Penelitian 3.2.1.
Waktu Penelitian
Penelitian dilaksanakan pada bulan April-Agustus 2014.
3.2.2. Tempat Penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Animal House, Laboratorium Biokimia,
Laboratorium Biologi,
Laboratorium Farmakologi,
dan Laboratorium Histologi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Jl.
Kertamukti No. 05, Pisangan Ciputat 15419, Tangerang Selatan.
3.3. Populasi dan Sampel Penelitian
Hewan coba yang digunakan pada penelitian ini adalah tikus jantan strain Sprague-dawley umur 80 hari dengan berat badan 200 gram. Hewan
coba tersebut diperoleh dari Departemen Patologi Institut Pertanian Bogor IPB Lampiran 1.
22
Pada penelitian ini menggunakan organ hepar, pankreas, dan ginjal sebagai sampel.
3.4. Cara Kerja Penelitian 3.4.1.
Alat dan Bahan Penelitian a.
Tahap Nekropsi
Kapas, minor set surgeon, Zipline plastic bag, papan potong, dan eter untuk anastesi.
24
b. Tahap Perfusi dan Fiksasi
Alat perfusi menggunakan set infus dengan ukuran jarum 23G, PBS
Phosphate Buffer Saline dan Formalin. c.
Tahap Dehidrasi
Gelas ukur 1000 ml dan 500 ml, Beaker glass 1000 ml dan 250 ml, corong kaca, aquades, alkohol absolut CH
3
CH
2
OH Mallinckrodt Chemicals, dan alkohol 95.
d. Tahap Paraffinisasi
Incubator dan Paraplast Leica Microsystem.
e. Tahap Clearing dan Embedding
Hotplate stirer sRS 710 HA, vials stopper tools neck.
f. Tahap Blocking
Cetakan blocking dan Spiritus
g. Tahap Pemotongan
Bunsen, mikrotom geser, korek api gas, waterbath, kulkas, beaker glass 200 ml, putih telur, gliserin, dan es batu.
h. Tahap Pewarnaan
Object glass, cover glass, staining jar, mikroskop shimadzu T025A, spatula kaca, timer, Hematoksilin, eosin, xylol, canada balsam, aquadest, H
2
SO
4,
alkohol absolut CH
3
CH
2
OH, alkohol 95.
i. Tahap Foto Jaringan
Kotak preparat, kamera preparat, komputer lab, DVD foto, mikroskop Olympus BX41.
j. Tahap keseluruhan
Tissue, tissue berpori.
3.4.2. Adaptasi Hewan Coba
1,2
Setelah hewan coba tiba di laboratorium animal house, hewan coba diberikan makan dan minum ad libitum dan ditempatkan dalam kandang yang berisi 3 ekor.
Kemudian diamati perilakunya serta diadaptasi selama 14 hari.
18