Saran Dr. Herla Rusmarillin, MS

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Dari hasil penelitian yang telah dilakukan maka diperoleh kesimpulan sebagai berikut. 1. ekstrak bintang laut A. forbesii memiliki komponen bioktif yang berupa alkaloida, triterpenoidasteroida, flavonoida dan saponin yang terdapat pada ekstrak metanol sedangkan pada ekstrak n-heksana dan etil asetat hanya mengandung komponen bioaktif saponin dan triterpenoidasteroida. 2. Setelah dilakukan pengujian sifat toksisitas senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada ekstrak bintang laut dengan menggunakan metode Brine Shrimp Lethality Test diperoleh hasil hanya ekstrak metanol yang bersifat toksik. 3. Dari keempat senyawa pada ekstrak metanol yang dihasilkan pada pengujian KLT secara preparatif dapat dinyatakan bahwa senyawa triterpenoida yang mampu menghambat aktifitas bakteri patogen dengan kemampuan yang lebih aktif pada bakteri Gram negatif Escherichia coli, Pseudomonas auroginosa dibandingkan dengan bakteri Gram positif Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis.

5.2 Saran

Demi pengembangan ilmu pegetahuan terutama tentang antibakteri dari ekstrak bintang laut A. forbesii maka disarankan agar dapat dilakukan isolasi senyawa murni yang terdapat pada ekstrak bintang laut secara lebih mendalam dan melihat mekanisme penghambatan senyawa tersebut dalam menghambat bakteri serta dilakukan pengujian sifat toksisitas golongan senyawa aktif ekstrak bintang laut setelah dilakukan pengujian KLT preparatif. Universitas Sumatera Utara DAFTAR PUSTAKA Ajizah, A. 2004. Sensitivitas Salmonella Typhimurium Terhadap Ekstrak Daun Psidium Guajava L. J. Bioscientie, 11:31-8. Albuntana, A.,Yasman dan Wardhana, W. 2011. Uji Toksisitas Ekstrak Empat Jenis Teripang Suku Holothuriidae dari pulau Penjaliran Timur, Kepulauan Seribu, Jakarta Menggunakan Metode Brine Shrimp Lethality Test BSLT. J. Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis 31:65-72 Alexander. 2012. Distribusi Bintang Laut Asteroidea sp Pada Perairan Pulau Poncan Gadang Sibolga Sumatera Utara. Skripsi. Universitas Riau Andersen, M., Markham, K.R. 2006. Separation dan quantification of flavonoids. Flavonoids : Chemistry, Biochemistry and Apllications. New York:CRC. Belk, C., Maier, V.B. 2010. Biology: Science for Life with Physiology. Ed ke-3. San Francisco: PearsonBenjamin Cummings. Berk , Z. 2009. Food Process Engineering dan Technology. New York: Elsevier. Chludil, H., Maier, M.S, dan Seldes, A.M. 2000. Bioactive steroidal glycosides from starfish Anasterias minuta. Molecules 5:352-353. Choi, D.H., Shin, S. dan I.K., Park. 1999. Characterization of antimicrobial agents extracted from Asterina pectifera. Int. J. Antimicrob. Agents., 11: 65–68. Cowan, M. 1999. Plant Product as Antimicrobial Agent, Clinical Microbiology Reviews, 12 4:564-582. Cushnie, T.P. dan Lamb, A.J. 2005. Antimicrobial activity of flavonoid. J. Nat. Prod. 26:343-356. Dewi, F.K., 2010. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Buah Mengkudu Morinda citrifolia, linnaeus terhadap Bakteri Pembusuk Daging Segar. [Skripsi]. Universitas Sebelas Maret, Surakarta De Marino, S., Iorizzi, M., Palagiano, E., Zollo, E., dan Roussakis, C. 1998. Isolation, structure elucidation, and biological activity of the steroid oligoglycosides from an Antarctic starfish of the family Asteriidae. J. Nat. Prod., 61:1319-1327. Di Carlo G., Mascolo N., Izzo, A.A. dan Capasso, F. 1999. Falvonoids: old and new aspects of a class of natural therapeutic drugs. Life Science; 654:337–53. Universitas Sumatera Utara Farouk, A.E., Faizal, A.H.G. dan Ridzwan, B.H. 2007. New Bacterial Species Isolated from Malaysian Sea Cucumbers with Optimized Secreted Antibacterial Activity. J. Am. J. Biochem Biotech. 32:60-65. Fox, R. 2004. Statistic Acute Toxicity Bioassay Laboratory Exercise. Laboratory Ecologi, P.306. Ganiswarna, S. 1995. Farmakologi dan Terapi. Edisi 4. Penerbit UI : Jakarta. Gavin, N.M., Durako, M.J. 2012. Localization and antioxidant capacity of flavonoid to experimental light and salinity variation. J. Experimental Marine Biology and Ecology 416-417:32-40 Gold, L.S., Slone, T.H. 1999. Ranking possible toxic hazards of dietary supplements compared to other natural and synthetic substances. food and drug administration FDA on dietary supplements. http:potency.berkeley.edupdfsFDATestimonyHerbalMedicine.pdf [12 Februari 2013]. Gosner, K.L. 1971. Guide to identification of Marine and Estuarine invertebrates. Wiley-interscience, a devision of john wiley and sons, inc. New York. London. Sydney. Toronto. Gunawan. 2008. Antibakteri pada herba Meniran Phylanthus niruri Linn, J. Kimia , Vol II 22 :31-39 Guo, C., Tang, X. dan Yang, Y. 2009. Studies on the expectorant, antitussive and antiasthmatic properties of asterosaponin extracted from Liquida quinaria. African Journal of Biotechnology 823:6694-6696. Harborne, J.B. 1996. Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Cetakan kedua. Penerjemah: Padmawinata, K. dan Soediro, I. Bandung: ITB. Harefa, F. 1997. Pembudidayaan Artemia salina untuk Pakan Udang dan Ikan. Swadaya, Jakarta. Heras, D.B.L., Hortelano, S. 2009. Molecular basic of the anti-inflammatory effect of terpenoids. Inflammation and Allerg-Drug Targets 8:28-39. Iorizzi, M., De Marino, S. dan Zollo, E. 2001. Steroidal oligoglycosides from the Asteroidea. Current Organic Chemistry. 5:951-973. Iswani, S. 2007. Proses preparasi ekstrak kasar crude extract etanol dari makroalga untuk uji farmakologi. Buletin Tek. Lit. Akuakultur 61:57-60. Universitas Sumatera Utara Ivanchina, N.V., Kicha, A.A., Kalinovsky, A.I., Dmitrenok, P.S., Stonik, V.A., Riguera, R. Jimenez, C. 2000. Hemolytic polar steroidal constituents of the starfish Aphelasterias japonica. J. Nat. Prod., 63:1178-1181. Jia, R., Guo, YW, Mollo, E., Gavagnin, M., Cinimo, G. 2006. Two New Polyhydroxylated Steroid from the Soft Coral Sinularia sp. Helvetica Chimica Acta; 89:1-5. Juliantina. F.R., Citra, D.A., Nirwani, B., Nurmasitoh, T. dan Bowo, E.T. 2008. Manfaat Sirih Merah Piper crocatum Sebagai Agen Anti Bakteri Terhadap Gram Positif dan Gram Negatif. Jurnal Kedokteran dan Kesehatan Indonesia. Kannan, A., Hettiarachchy, N. dan Narayan, S. 2009. Colon and breast anti-cancer effects of peptide hydrolysates derived from rice brdan. The Open Bioactive Compounds Journal 2:17-20. Kumar, D., Rawat, D.S. 2011. Marine natural alkaloid as anticancer. Opportunity, Challenge and Scope of Natural Products in Medical Chemistrtry 2:213- 268. Kumaran, N.S., Bragadeeswaran, S., Thangaraj. 2011. Antimicrobial activities in star fishes Protoreaster lincki Blainville, 1830 and Pentaceraster regulus Muller Troschel, 1842 against isolated human, fish pathogenic and biofilm microorganisms. J. Appl. Sci. Res., 7 6:818-825. Khunaifi, M. 2010. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Binahong Anredera cordifolia Ten Steenis terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa. Skripsi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri UIN Maulana Malik Ibrahim, Malang. Lamothe, R.G. 2009. Plant Antimicrobial Agents and Their Effects on Plant and Human Pathogens. Int. J. Mol. Sci 10:3400-3419. Madigan, T.D., Martinko, J.M., Parker, J. 2009. Brock Biology of Microorganism. Edisi ke-12. San Francisco: PearsonBenjamin Cummings. Maier, M.S., Centurion, R., Muniain, C., Haddad, R. dan Eberlin, M.N. 2007. Identifikation of sulfated steroidal glycoside from starfish Heliaster helianthus by electrospray ionization mass spectrometry. Arkivoc 7:301- 309. Meyer, B.N.R., Ferrigni, J.E., Putnam, L.B., Jacosen, D.E., Nicholas. dan McLaughin, J.L. 1982. Brine Shrimp: A Convenient General Bioassay for Active Plant Constituens. Planta Med, 45:31-34. Universitas Sumatera Utara Meyer, B.N., Ferigni, N.R., Putnam, J.E., Jacobson, L.B. dan Nichols, D.E. 2003. Brine Shrimp : A Convenient General Bioassay for Active Plant Constituent. Plant Med. 45 : 31-34. Mirzoeva, O.K., Grishanin, R.N. and Calder, P.C. 1997. Microbiol Res : Antimicrobial action of propolis dan some of its components: the effects on growth, membrane potential, dan motility of bacteria. J. Microbiol Res. 152:239-246. Munifah, I., Wikanta, T. dan Nursid, M. 2008. Sponge; Biota Laut Penghasil Senyawa Bioaktif yang Potensial. Http;www.scribd.comdoc255926706 warta-sponge, 02 Juli 2013. Nazri, N.A.A.M., Ahmat, N., Adnan, A., Mohamad, S.A.S. dan Ruzaina, S.A.S. 2011. In vitro antibacterial dan radical scavenging activities of Malaysian table salad. African Journal of Biotechnology. 1030:5728-5735. Nimah, S., Farid, W.M. dan Trianto, A. 2012. Uji Bioaktivitas Ekstrak Teripang Pasir Holothuria scabra Terhadap Bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Bacillus cereus. J. Perikanan, 12:1-9 Nurhayati, A.P.D., Abdulgani, N. dan Febrianto, R. 2006. Uji Toksisitas Ekstrak Eucheuma alvarezii Terhadap Artemia salina sebagai studi pendahuluan anti kanker. Akta Kimindo 21:41-46 Nur, M.A, Adijuwana, H. 1987. Teknik Separasi dalam Analisis Pangan. Bogor: Pusat Antar Universitas IPB. Nurullita, H.P. 2012. Kdanungan Komponen Bioaktif dan Aktivitas Antimikroba Ekstrak Bintang Laut Culcita schmideliana. Skripsi. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Institut Pertanian Bogor. Pelczar, M.J, Chan, E.C.S. 2008. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta: UI-Press. Terjemahan dari: Elements of Micribiology. Prashant, D.S., Gour, P.P., Dubey, A., Jain, D.K., dana, N., Joshi, B.K. dan Kumar, D. 2009. Complete nucleotide sequencing, SNP identification and characterization of SRY gene in Indian Sangamneri goat. African Journal Biotechnology. 8:2939-2942. Rahayu, W.P. 1999. Kajian aktivitas antimikroba ekstrak dan fraksi rimpang lengkuas Alpinia galangal L Swartz terhadap mikroba patogen dan perusak pangan disertasi. Program Studi Ilmu Pangan, Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Ray, B., Bhunia, A. 2008. Fundamental Food Microbiology. Fourth edition. New York: CRC Press. Universitas Sumatera Utara Rifai, A. dan Trianto, A. 2003. Penggunaan Thin Layer Chromatography untuk Mengidentifikasi Kdanungan Bahan Bioaktif Antibakteri Vibrio Harvey pada Karang Lunak Sarcophyton sp. Laporan Penelitian. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Universitas Diponegoro. Semarang. Rita, W.S., Suirta, I.W. dan Sabikin, A. 2008. Isolasi dan Identifikasi Senyawa yang Berpotensi sebagai Antitumor Pada Daging Buah Pare Momordica charantia L.. J. Kimia, 2:1907-9850. Sabir, A. 2005. Aktivitas antibakteri flavonoid propolis Trigona sp terhadap bakteri Streptococcus mutans in vitro. J. Dent. 338:135–141. Samuel, P., Prince, L. dan Prabakaran, P. 2011. Ocean: the inviolated source of pharmaceutical leads and drug metabolites. World Jurnal of Science and Technology 110:74-91. Santalova, E.A., Makarieva, T.N., Gorshkova, I.A., Dmitrenok, A.S., Krasokhin, V.B., Stonik, V.A. 2004. Sterol from six marine sponges. Biochemical Sistematics and Ecology 32:153-167. Sawant, S., Youssef, D., Mayer, A., Sylvester, P., Wall, V., Arant, M. dan El- Sayed, K. 2006. Anticancer and anti-inflamantory sulphur-containing semisynthetic derivatives of sarcophine. Chem. Pharm. Bull. 548:1119- 1123. Schlegel, H.G, Schmidt, K. 1994. Mikrobiologi umum. Baskara T, Penerjemah. Yogyakarta: Gajah Mada University Press. Sirait, M. 2007. Penuntun Fitokimia dalam Farmasi. Bandung: Penerbit ITB. Suwignyo, S., Widigdo, B., Wardiatno, Y. dan Krisanti, M. 2005. Avertebrata air. Jilid 1 2. Jakarta: Penebar Swadaya. Tholl, D. 2006. Terpene synthases dan the regulation, diversity and biological roles of terpene metabolism. Curr Opin Plant Biol 93:297-304. Todar, K. 2011. Textbook of bacteriology. http:www.textbookofbacteriology.net [5 Februari 2013]. Wang, W., Li, R., Alam, N., Liu, Y., Lee, C.-O., Hong, J., Lee, C.K., Im, K.S. dan Jung, J.H. 2002. New saponins from the starfish Certonardoa semiregularis. J. Nat. Prod., 65:1649-1656. Wang, W., Famei, L., Jongki, H., Lee, C-O., Cho, H.Y., Im, K.S. dan Jung, J.H. 2003. Four new saponins from the starfish Certonardoa semiregularis. Chemical Pharmacology Bulletin 514:435-439. Universitas Sumatera Utara Wang, W., Hong, J., Lee, C.-O., Im, K.S. dan Jung, J. H. 2004. Cytotoxic sterols and saponins from the starfish Certonardoa semiregularis. J. Nat. Prod. 67:584-591. Yuan, Y., Liu, Y., Luo, Y., Huang, L., Chen, S., Yang, Z., dan Qin, S. 2011. High temperature effects on flavones accumulation and antioxidant system in Scutellaria baicalensis Georgi cells. African Journal of Biotechnology 1026:5182- 5192. Universitas Sumatera Utara Lampiran1.Bagan Alir Penelitian Pengambilan sampel bintang laut A. forbesii dari perairan Sibolga Pengeringan sampel menggunakan freze drying Penghalusan sampel menggunakan blender Pengujian ; - Fitokimia - BSLT Brine Shrimp Lethality Test - Uji antimikroba S. aureus, B. subtilis, P. aeruginosa , E. coli, - Uji senyawa aktif ekstrak methanol bintang laut terhadap bateri patogen S. aureus, B. subtilis, P. aeruginosa , E. coli, Ekstraksi secara bertingkat n- heksana, etil asetat dan metanol Universitas Sumatera Utara Lampiran 2. Bagan Alir Ekstraksi Bintang Laut A. forbesii Penimbangan Maserasi selama 24 jam dengan n-Heksan Penyaringan Filtrat I Filtrat Filtrat Residu Residu Residu Evaporasi Evapora i Evaporasi Ekstrak n- Heksan Ekstrak etil Ekstrak metanol Penyaringan Maserasi selama 24 jam dengan etil asetat Maserasi selama 24 jam dengan metanol Penyaringan Sampel bintang laut Universitas Sumatera Utara Lampiran 3. Bagan alir Uji Toksisitas dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test BSLT Sampel 20 mg Larutan induk konsentrasi 10000 ppm 0,5 ml 3 vial 0,5 ml Larutan dengan konsentrasi 1000 ppm 0,5 ml Larutan dengan konsentrasi 100 ppm 0,5 mL 3 vial 0,5 ml 3 vial - Dibiarkan pelarutnya menguap - Ditambahkan 50 µL dimetilsulfoksida - Ditambahkan air laut hingga hampir mencapai batas kalibrasi - 10 ekor larva udang dimasukkan ke dalam masing-masing vial uji - Kemudian tambahkan air laut hingga batas kalibrasi - Biarkan selama 24 jam dan hitung larva yang mati Hitung nilai LC 50 Dilarutkan dalam 2 ml metanol Ditambahkan metanol hingga 5 ml Ditambahkan metanol hingga 5 ml Ketika ditambahkan air laut konsentrasi menjadi 1000 ppm Ketika ditambahkan air laut konsentrasi menjadi 100 ppm Ketika ditambahkan air laut konsentrasi menjadi 10 ppm Universitas Sumatera Utara 5gr Sampel Lapisan air Lapisan kloroform Uji flavonoida Uji fenolik Uji saponin Uji terpenoida Uji steroida Uji alkaloida Lampiran 4. Bagan Alir Uji Senyawa Metabolit Skunder Ekstrak Bintang Laut A. forbesii - Ditambahkan 5 ml aquades dan kloroform lalu dikocok dan biarkan beberapa saat sampai terbentuk dua lapisan Lapisan air untuk uji flavonoida, fenolik dan saponin sedangkan lapisan kloroform untuk uji terpenoida dan steroida Universitas Sumatera Utara Lapisan air Terbentuk warna jingga, merah muda sampai merah

1. Bagan Alir Uji Flavonoida

- Ditambahkan 1-2 butir loga magnesium dan bebarapa tetes sam klorida pekat

2. Bagan Alir Uji Fenolik

- Ditambahkan 1-2 larutan FeCl3 1

3. Bagan Alir Uji Saponin

- Dimasukkan kedalam dalam tabung reaksi lalu dikocok Lapisan air Terbentuk warna biruungu Lapisan air Terbentuk busa yang bertahan 5 menit Universitas Sumatera Utara