3.2.3 Pembuatan Media 3.2.3.1 Pembuatan Media Tripton Soya Agar
Ditimbang 4 g tipton Soya Agar setelah itu dimasukkan ke dalam gelas Erlenmeyer dan dilarutkan dengan 100 mL air laut, kemudian dipanaskan di
atas hot plate hingga larut dan warna larutan berubah menjadi bening, ditutup dengan kapas dan alumunium foil.
3.2.3.2 Pembuatan Media cair
Ditimbang 1,5 g NH
4
NO
3 s
, 4,1698 g KH
2
PO
4 s
dan 3,3652 g K
2
HPO
4 s
, dimasukkan ke dalam Botol duran 500 mL
, dan dipipet
0,1 mL larutan MgSO
4
0,02, dilarutkan dengan akuades sampai garis batas, ditutup rapat, kemudian distirer hingga larutan menjadi homogen.
3.2.3.3 Pembuatan Media cair dengan penambahan Kofaktor enzim Ca
2+
Ditimbang 7,5 g CaCl
2
.2H
2
O
s,
1,5 g NH
4
NO
3 s
, 4,1698 g KH
2
PO
4 s
dan 3,3652 g K
2
HPO
4 s
, dimasukkan ke dalam Botol duran 500 mL, dan dipipet 0,1 mL larutan MgSO
4
0,02, dilarutkan dengan akuades sampai garis batas, ditutup rapat, kemudian di stirer hingga larutan menjadi homogen.
3.2.4 Sterilisasi Media dan Bahan
Dimasukkan +- 1 L akudes ke dalam autoklaf, kemudian disusun media dan bahan yang akan diterilkan pada keranjang alat dan dimasukkan ke dalam
autoklaf. Disterilkan pada suhu 121
o
C pada tekanan 15 Psi selama 15 menit
3.2.5 Pembuatan starter Pseudomonas Aeruginosa
Dimasukkan media tripton yang telah steril ke dalam cawan petri sebanyak ¼ volume cawan lalu diinokulasi biakan murni bakteri Pseudomonas Aeruginosa
ke dalam media tripton, yang dilakukan pada kondisi septik, selanjutnya ditutup dengan alumunium foil dan klem-bab kemudian dibalut kertas setelah
itu diinkubasi dalam inkobator pada suhu 35
o
C selama 3-5 hari hingga terbentuk koloni baru di atasnya.
Universitas Sumatera Utara
3.2.6 Pembuatan Standard Mac Varlan
Diukur 0,05 mL BaCl
2
0,048 M dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan 9,95 mL H
2
SO
4
0,35 N kemudian ditutup dengan alumunium foil dan divortex. Larlan,V, 1980
3.2.7 Pembuatan Mac Varlan Bakteri Pseudomonas Aeruginosa
