Penentuan panjang gelombang maksimum larutan BSA Penentuan kurva standar larutan BSA pada λ 775 nm Penentuan kadar protein enzim lipase dari Pseudomonas aeruginosa Penentuan kadar protein enzim lipase dengan penambahan Ca

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Hasil Penelitian

Dari hasil penelitian tentang produksi enzim lipase oleh Pseudomonas aeruginosa dalam menghasilkan ekstrak kasar enzim lipase dilakukan beberapa penentuan

4.1.1. Penentuan panjang gelombang maksimum larutan BSA

Terhadap 1 mL larutan BSA 5000 µgmL dengan metode lowry diukur absorbansinya pada panjang gelombang 720 – 780 nm. Hasilnya menunjukkan bahwa absorbansi maksimum diperoleh pada λ 775 nm. Hasil lengkapnya adalah sebagai berikut : Grafik 4.1.1. Penentuan panjang gelombang maksimum larutan BSA 5000 µgmL Universitas Sumatera Utara 775 nm Universitas Sumatera Utara

4.1.2. Penentuan kurva standar larutan BSA pada λ 775 nm

Larutan BSA dengan konsentrasi bertingkat diukur absorbansinya pada panjang gelombang 775 nm. Hasilnya sebagai berikut : Tabel 4.1.2. Absorbansi larutan BSA p ada λ 775 nm Konsentrasi BSA μggmL x Absorbansi y 50 0,067 100 0,070 150 0,075 200 0,073 250 0,074 300 0,074 350 0,087 Dengan menggunakan rumus persamaan garis regresi y = ax + b diperoleh nilai y = 0,00004x + 0,065 Lampiran 1, dimana x adalah kadar ekstrak kasar enzim lipase dengan tetapan a slope grafik dan b intercept yang diperoleh dari: 2 2 ∑ ∑ ∑ ∑ ∑ − − = x x n y x xy n a 2 2 2 ∑ ∑ ∑ ∑ ∑ ∑ − − = x x n xy x y x b

4.1.3 Penentuan kadar protein enzim lipase dari Pseudomonas aeruginosa

Terhadap supernatant dari biakan Pseudomonas aeruginosa yang ditumbuhkan pada media dengan konsentrasi minyak wijen yang berbeda maka didapat masing – masing absorbansi dari tiap konsentrasi lampiran 2 yang berbeda juga, sehingga diperoleh Universitas Sumatera Utara hasil kadar enzim dengan menggunakan persamaan garis regresi y = 0.00004 x + 0.065 yaitu sebagai berikut : Tabel 4.1.3 Kadar protein enzim μgmL pada setiap perlakuan untuk konsentrasi substrat 2, 4, 6, 8, 10 . Perlakuan Kadar protein Enzim μgmL Konsentrasi 2 4 6 8 10 Perulangan I 10550 27700 47825 67025 60375 Perulangan II 3550 4950 5800 7752 6250 Perulangan III 4000 4225 5875 16250 11550 Rata-rata 6033,33 12291,67 19833,33 30342,33 26058,33

4.1.4 Penentuan kadar protein enzim lipase dengan penambahan Ca

2+ Pada media biakan yang ditumbuhi Pseudomonas aeruginosa ditambahkan ion Ca 2+ sebagai Kofaktor enzim dengan konsentrasi 1.5 pada setiap setiap konsentrasi substrat yang berbeda, yang pengukuran absorbansinya pada setiap konsentrasi dapat dilihat pada lampiran III sehingga diperoleh hasil kadar enzim dengan menggunakan persamaan garis regresi sebagai berikut : Tabel 4.1.4 Kadar protein enzim μgmL pada setiap perlakuan untuk konsentrasi substrat 2, 4, 6, 8, 10 dengan penambahan kofaktor enzim Ca 2+ . Perlakuan Kadar protein Enzim μgmL Universitas Sumatera Utara Konsentrasi substrat 2 4 6 8 10 Perulangan I 5400 5825 29800 35550 55775 Perulangan II 3900 3850 5800 6075 11875 Perulangan III 4775 4850 5025 5225 5525 Rata-rata 4691,67 4841,67 13541,67 15616,67 24391,67

4.1.5. Uji aktivitas