BAB 4
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1. Hasil Penelitian
Dari hasil penelitian tentang produksi enzim lipase oleh Pseudomonas aeruginosa dalam menghasilkan ekstrak kasar enzim lipase dilakukan beberapa penentuan
4.1.1. Penentuan panjang gelombang maksimum larutan BSA
Terhadap 1 mL larutan BSA 5000 µgmL dengan metode lowry diukur absorbansinya pada panjang gelombang 720 – 780 nm. Hasilnya menunjukkan bahwa absorbansi
maksimum diperoleh pada λ 775 nm. Hasil lengkapnya adalah sebagai berikut :
Grafik 4.1.1. Penentuan panjang gelombang maksimum larutan BSA 5000 µgmL
Universitas Sumatera Utara
775 nm
Universitas Sumatera Utara
4.1.2. Penentuan kurva standar larutan BSA pada λ 775 nm
Larutan BSA dengan konsentrasi bertingkat diukur absorbansinya pada panjang gelombang 775 nm. Hasilnya sebagai berikut :
Tabel 4.1.2. Absorbansi larutan BSA p ada λ 775 nm
Konsentrasi BSA μggmL x
Absorbansi y
50 0,067
100 0,070
150 0,075
200 0,073
250 0,074
300 0,074
350 0,087
Dengan menggunakan rumus persamaan garis regresi y = ax + b diperoleh nilai
y = 0,00004x + 0,065 Lampiran 1, dimana x adalah kadar ekstrak kasar enzim lipase dengan tetapan a slope grafik dan b intercept yang diperoleh dari:
2 2
∑ ∑
∑ ∑
∑
− −
= x
x n
y x
xy n
a
2 2
2
∑ ∑
∑ ∑
∑ ∑
− −
= x
x n
xy x
y x
b
4.1.3 Penentuan kadar protein enzim lipase dari Pseudomonas aeruginosa
Terhadap supernatant dari biakan Pseudomonas aeruginosa yang ditumbuhkan pada media dengan konsentrasi minyak wijen yang berbeda maka didapat masing – masing
absorbansi dari tiap konsentrasi lampiran 2 yang berbeda juga, sehingga diperoleh
Universitas Sumatera Utara
hasil kadar enzim dengan menggunakan persamaan garis regresi y = 0.00004 x + 0.065 yaitu sebagai berikut :
Tabel 4.1.3 Kadar protein enzim μgmL pada setiap perlakuan untuk
konsentrasi substrat 2, 4, 6, 8, 10 .
Perlakuan Kadar protein
Enzim μgmL Konsentrasi
2 4
6 8
10
Perulangan I 10550
27700 47825
67025 60375
Perulangan II 3550
4950 5800
7752 6250
Perulangan III 4000
4225 5875
16250 11550
Rata-rata 6033,33
12291,67 19833,33
30342,33 26058,33
4.1.4 Penentuan kadar protein enzim lipase dengan penambahan Ca
2+
Pada media biakan yang ditumbuhi Pseudomonas aeruginosa ditambahkan ion Ca
2+
sebagai Kofaktor enzim dengan konsentrasi 1.5 pada setiap setiap konsentrasi substrat yang berbeda, yang pengukuran absorbansinya pada setiap konsentrasi dapat
dilihat pada lampiran III sehingga diperoleh hasil kadar enzim dengan menggunakan persamaan garis regresi sebagai berikut :
Tabel 4.1.4 Kadar protein enzim μgmL pada setiap perlakuan untuk
konsentrasi substrat 2, 4, 6, 8, 10 dengan penambahan kofaktor enzim Ca
2+
.
Perlakuan Kadar protein
Enzim μgmL
Universitas Sumatera Utara
Konsentrasi substrat 2
4 6
8 10
Perulangan I 5400
5825 29800
35550 55775
Perulangan II 3900
3850 5800
6075 11875
Perulangan III 4775
4850 5025
5225 5525
Rata-rata 4691,67
4841,67 13541,67
15616,67 24391,67
4.1.5. Uji aktivitas