BAHAN DAN ALAT METODOLOGI PENELITIAN

III. METODOLOGI PENELITIAN

A. BAHAN DAN ALAT

Bahan baku utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah pepes ikan mas iradiasi yang memiliki tanggal penyinaran berbeda-beda, yaitu pepes iradiasi 11 November 2006 Pepes A, 14 Juni 2007 Pepes B, 5 April 2008 Pepes C, dan pepes No Label 2008 Pepes D serta sampel pepes kontrol yaitu pepes ikan mas yang mengalami perlakuan pengawetan dengan sterilisasi konvensional tanpa iradiasi. Sampel pepes kontrol, 14 Juni 2007, 5 April 2008, dan No Label 2008 diproduksi oleh pihak PATIR BATAN. Sementara pepes iradiasi 11 November 2006 diiradiasi oleh pihak Rel-ion. Pada pengukuran kadar malonaldehida dilakukan pengujian pada sampel A, B, C, dan D, sementara pada pengujian proliferasi limfosit hanya digunakan sampel B, C, dan D karena keterbatasan jumlah sampel A. Bahan yang digunakan untuk ekstraksi sampel adalah aquades, kertas saring,. Bahan untuk analisis proliferasi limfosit, yaitu darah manusia dari donor yang sehat, histopaque Sigma, USA, RPMI-1640 Sigma, USA, NaHCO 3 anhidrous, gentamycin, 3-4,5-dimethlthiazol-2-yl-2,5-diphenyl tetrazolium bromide MTT Sigma, USA, HCl-isopropanol 0.04N, larutan mitogen Con A dan Pokeweed. Bahan yang digunakan dalam pengukuran kadar malonaldehida, yaitu larutan standar 1,1,3,3 tetraetoksipropana TEP Sigma, USA, larutan PBS phosphate buffer saline, larutan TBA 0.38 - TCA 15 - BHT 0.5 dalam HCl 0.25 N dingin. Alat yang digunakan dalam persiapan sampel adalah pisau, mortar, corong, kain saring, gelas ukur, gelas piala, syringe, membran steril 0.20 μm, dan sentrifuse. Alat yang digunakan dalam analisis proliferasi limfosit adalah vacutainer darah dan serum, tabung sentrifuse Cognic, mikropipet eppendorf 10-100 μl dan 100-1000 μl, sentrifuse, laminar flow, microplate reader, lempeng mikrokultur Cognic, waterbath, dan inkubator 37 C dengan atmosfer 5 CO 2, O 2 95 dan RH 96. Sedangkan alat yang digunakan dalam pengukuran kadar malonaldehida adalah tabung reaksi, mikropipet, labu takar, waterbath, sentrifuse, tabung sentrifuse, dan spektrofotometer.

B. METODE PENELITIAN 1. Ekstraksi Sampel