IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. EKSTRAKSI SAMPEL
Ekstraksi adalah sebuah metode pemisahan komponen-komponen yang terlarut dari suatu campuran dengan komponen-komponen yang tidak larut dengan
menggunakan pelarut yang sesuai Leniger dan Beverloo, 1975. Metode ekstraksi padatan yang digunakan adalah mencampur seluruh bagian bahan yang akan diuji
dengan pelarut, lalu bagian yang dapat terlarut dipisahkan dengan padatan tidak terlarut.
Pada penelitian ini, sebelum dilakukan pengekstrakan sampel dilakukan pengamatan subjektif terhadap bau, tekstur, dan tampilan umum pada pepes iradiasi.
Tampilan umum pepes iradiasi dengan pepes kontrol tidak berbeda, bau pepes iradiasi bahkan lebih harum dibandingkan dengan pepes kontrol, namun tekstur dari
pepes iradiasi lebih lunak dibandingkan dengan pepes kontrol. Bagian daging dari pepes iradiasi juga memiliki warna yang lebih kuning dibandingkan pepes kontrol,
hal ini mungkin disebabkan bumbu yang lebih meresap pada bahan. Pengekstrakan sampel dilakukan pada bagian daging ikan edible portion
karena pada umumnya bagian tersebut yang dikonsumsi oleh masyarakat. Pelarut yang digunakan untuk ekstraksi adalah aquades sebagai pendekatan terhadap cara
masyarakat dalam mengkonsumsi makanan sehari-hari, termasuk pepes, secara umum yaitu hanya minum air biasa. Perbandingan ekstraksi bahan dengan pelarut adalah
1:1. Bagian daging dari ikan pepes iradiasi maupun pepes kontrol yang akan
diekstrak mengalami proses penghalusan dengan menggunakan mortar dengan tujuan memperluas daya pelarutan sampel. Hancuran sampel lalu ditambahkan dengan
pelarut aquades 1:1 dan disaring menggunakan kain saring. Filtrat yang diperoleh kemudian disentrifuse pada 3500 rpm selama 30 menit. Setelah disentrifuse, bagian
supernatan sampel dipisahkan lalu dilewatkan pada kertas saring. Pada tahap akhir,
supernatan yang lolos kertas saring kemudian dilewatkan pada membran steril dengan ukuran pori 0.20
μm. Pada pengujian proliferasi limfosit digunakan sampel steril yang dilewatkan
pada membran steril, sedangkan pada pengukuran kadar malonaldehida sampel cukup digunakan ekstrak yang lolos pada kertas saring. Hal ini dilakukan karena pada teknik
kultur sel dibutuhkan kondisi steril agar mencegah kontaminasi mikroorganisme yang dapat menyebabkan kesalahan pada pengujian.
Ekstrak yang akan digunakan dalam pengujian terdiri dari tiga jenis pengenceran, yaitu pengenceran satu kali, dua kali, dan empat kali. Pengenceran satu
kali 1x adalah ekstrak sampel awal yang langsung digunakan, pengenceran dua kali 2x adalah ekstrak yang diencerkan dengan perbandingan 1:1 dari ekstrak sampel
awal, dan pengenceran empat kali 4x adalah ekstrak yang diencerkan dengan perbandingan 1:3 dari ekstrak sampel awal. Pengenceran ini dilakukan untuk
mengetahui efek peningkatan ketersediaan air bebas terhadap pengujian, dimana dikhawatirkan radikal bebas yang terdapat pada sampel dapat menyerang molekul air
dan membentuk radikal hidroksi yang tentunya akan mempengaruhi pengujian.
B. PROLIFERASI LIMFOSIT 1. Model Pengujian Toksisitas Kultur Limfosit
Kategori