15
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
tabung kromatografi kaca atau kuarsa. Zat uji yang dilarutkan dalam sejumlah kecil pelarut, dituangkan ke dalam
kolom dan dibiarkan mengalir ke dalam zat penjerap. Zat berkhasiat diadsorpsi dari larutan secara kuantitatif oleh
bahan penjerap berupa pita sempit pada permukaan atas kolom. Dengan penambahan pelarut lebih lanjut melalui
kolom, oleh gaya gravitasi atau dengan memberikan tekanan, masing-masing zat bergerak turun dalam kolom dengan
kecepatan tertentu, sehingga terjadi pemisahan dan diperoleh kromatogram Departemen Kesehatan,1995.
2.6.2 Spektrofotometri
Spektrofotometri merupakan pengukuran suatu interaksi antara radiasi elektromagnetik dan molekul atau atom dari suatu
zat kimia. Teknik yang sering digunakan dalam analisis farmasi meliputi spektrofotometri serapan ultraviolet, cahaya tampak,
inframerah dan serapan atom Departemen Kesehatan,1995.
a. Spektrofotometri IR
Spektrofotometri Infra Merah merupakan alat untuk merekam spektrum di daerah inframerah yang terdiri dari
suatu sistem optik dengan kemampuan menghasilkan cahaya monokromatik di daerah 4000 cm
-1
hingga 625 cm
-1
lebih kurang 2,5 πm hingga 16 πm dan suatu metode untuk mengukur perbandingan intensitas
perbandingan cahaya yang ditransmisikan cahaya datang. Spektrum IR digunakan untuk mengidentifikasi gugus
fungsi Departemen Kesehatan, 1995. Hampir semua senyawa yang memiliki ikatan kovalen,
baik organik maupun anorganik, menyerap berbagai frekuensi radiasi elektromagnetik di wilayah inframerah dari spektrum
elektromagnetik. Wilayah ini terletak pada panjang gelombang yang berkisar dari sekitar 400 sampai 800 nm Pavia et al.
2008
16
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
b. Spektrofotometri UV-Vis
Spektrofotometri serap merupakan pengukuran interaksi antara radiasi elektromagnetik panjang gelombang tertentu
yang sempit dan mendekati monokromatik, dengan molekul atau atom dari suatu zat kimia. Hal ini didasarkan pada
kenyataan bahwa molekul selalu mengabsorbsi cahaya elektromagnetik jika frekuensi cahaya tersebut sama dengan
frekuensi getaran dari molekul tersebut. Elektron yang terikat dan elektron yang tidak terikat akan tereksitasi pada suatu
daerah frekuensi yang sesuai dengan cahaya ultraviolet dan cahaya tammpak UV-Vis Roth et al., 1994.
Spektrum absorbsi daerah ini adalah sekitar 220 nm sampai 880 nm dan dinyatakan sebagai spektrum elektron.
Suatu spektrum ultraviolet meliputi daerah bagian ultraviolet 190-380 nm, spektrum Vis Visible bagian sinar tampak
380-780 nm. Pengukuran dengan alat spektrofotometer UV-Vis
didasarkan pada
hubungan antara
berkas radiasi
elektromagnetik yang ditransmisikan diteruskan atau yang diabsorbsi dengan tebalnya cuplikan dengan konsentrasi dari
komponen penyerap. Hubungan tersebut dinyatakan dalam Hukum Lambert-Beer Sastroamidjojo, 1985 :
A = a . b . c Keterangan :
a Daya Serap ; b Tebal Kuvet ; c Konsentrasi larutan ; A Serapan
Instrumentasi dari spektrofotometer UV-Vis ini dapat diuraikan sebagai berikut :
1. Suatu sumber energi cahaya yang berkesinambungan yang meliputi daerah spektrum yang mana alat tersebut
dirancang untuk beroperasi.
17
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
2. Suatu monokromator, yakni sebuah piranti untuk memencilkan pita sempit panjang gelombang dari
spektrum lebar yang dipancarkan oleh sumber cahaya. 3. Suatu wadah untuk sampel dalam hal ini digunakan
kuvet. 4. Suatu detektor, yang berupa transduser yang merubah
energi cahaya menjadi suatu isyarat listrik. 5. Suatu amplifier pengganda dan rangkaian yang merubah
energi cahaya menjadi suatu isyarat listrk. 6. Suatu sistem baca dimana diperagakan besarnya isyarat
listrik yang ditangkap.
c. Spektrofotometri Resonansi Magnetik
