22
f. Daya Cerna Pati secara in vitro Anderson et al. 2002
Enzim α-amilase dilarutkan di dalam buffer Na-Fosfat 0.05M pH 7. Pereaksi dinitrosalisilat dibuat dengan cara melarutkan 1 gram 3.5-dinitrosalisilat, 30 gram Na-K
tartarat dan 1.6 gram NaOH dalam 100 ml air destilata. Kurva standar dibuat dengan menggunakan larutan maltosa standar 1000 ppm sebagai larutan induk. Larutan kerja yang
digunakan sebagai standar, yaitu 100 ppm, 200 ppm, 300 ppm, 400 ppm, 500 ppm, 600 ppm, 800 ppm, dan 1000 ppm.
Sebanyak 0.5 gram pati pada sampel disuspensikan dalam 50 ml air destilata sehingga diperoleh konsentrasi 1 wv, kemudian dipanaskan dalam penangas air suhu 90
C selama 30 menit dan didinginkan pada suhu ruang. Sebanyak 2 ml sampel dipindahkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan 3 ml air destilata, dan 5 ml buffer Na-fosfat 0.1M, pH
7. Lalu diinkubasi pada suhu 37 C selama 15 menit. Selanjutnta ditambahkan larutan α-
amilase dan diinkubasi lagi pada suhu 37 C selama 30 menit.
Sebanyak 1 ml sampel dari tabung reaksi dipipet dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi lain, ditambahkan 2 ml pereaksi DNS. Lalu dipanaskan pada suhu 100
C selama 10 menit. Warna merah orange yang terbentuk diukur absorbansinya pada panjang gelombang
520 nm. Kadar maltosa campuran reaksi dihitung dengan menggunakan kurva standar maltosa murni yang diperoleh dengan merekasikan larutan maltosa standar dengan pereaksi
DNS. Blanko dibuat untuk menghitung kadar maltosa awal bukan hasil hidrolisis enzim. Prosedur pembuatan blanko sama seperti prosedur untuk sampel hanya saja tanpa sampel
dan tidak ditambahkan larutan enzim α-amilase, sebagai gantinya digunakan buffer Na- fosfat 0.1 M pH7.
DC pati Kadar maltosa sampel Kadar maltosa blanko sampel
Kadar maltosa pati murni Kadar maltosa blanko pati murni x 100
g. Kadar Proksimat
Analisis proksimat yang dilakukan meliputi kadar air AOAC 1984, kadar abu AOAC 1984, kadar protein AOAC 1984, dan kadar lemak AOAC 1984. Secara rinci
dapat dilihat pada Lampiran 1.
h. Analisis Statistik
Kategori