3.4. Bagan Penelitian
3.4.1. Pembuatan Kurva Kalibrasi Tyrosin
Ditambahkan HCl 1 N sedikit demi sedikit hingga larut
Dimasukkan kedalam labu takar 1000 mL Diencerkan dengan akuades hingga garis tanda
Dipipet 100 mL Dimasukkan kedalam labu takar 1000 mL
Diencerkan dengan akuades hingga garis tanda
Dipipet 2,5 mL Dipipet masing – masing
Dimasukkan dalam labu 2,5;5;7,5;10;12,5;15;17,5;20;
takar 25 mL 22,5 mL
Diencerkan dengan akuades Dimasukkan dalam labu takar hingga garis tanda
25 mL Diukur absorbansinya
Diencerkan dengan akuades hingga garis tanda
Diukur absorbansinya pada λ
maks
274 nm 1 g Tyrosin
Kurva kalibrasi Tyrosin 1000 mgL
Tyrosin 100 mgL
λ
maks
= 274 nm
Universitas Sumatera Utara
3.4.2. Pembuatan Kurva Kalibrasi Bovin Serum Albumin BSA Metode
Biuret
Dipipet sebanyak 0;0,1;0,2;0,4;0,6;0,8;1 mL dan dimasukkan kedalam tabung reaksi
Ditambahkan akuades hingga volume total masing-masing tabung reaksi menjadi 4 mL
Ditambahkan masing-masing 6 mL pereaksi biuret
Diukur absorbansi Diukur absorbansinya
salah satu konsentrasi BSA pada
λ
maks
549 nm
3.4.3. Preparasi Sampel Getah Buah Pepaya Carica papaya L
Digores dengan pisau Ditampung getah buah pepaya dalam gelas
beaker Larutan BSA 5 mgml
Kurva kalibrasi Larutan ungu
λ
maks
= 549 nm
Hasil Buah pepaya Bangkok muda
Universitas Sumatera Utara
3.4.4. Isolasi Crude Enzim Papain dari Getah Buah Pepaya Carica papaya L
Dimasukkan kedalam gelas beaker 100 mL Ditambahkan alkohol 92 sebanyak lima kali
dari volume getah pepaya Disimpan pada suhu 10
o
Disaring C selama 1 malam
Dikeringkan dalam oven vakum pada Suhu 40
o
C sampai berat konstan
3.4.5. Penentuan Kadar Protein Crude Enzim Papain Metode Biuret
Dimasukkan kedalam gelas beaker 100 mL Ditambahkan akuades hingga volume total
adalah 4 mL Ditambahkan 6 mL pereaksi Biuret
Dibiarkan selama 16 menit pada suhu kamar Diukur absorbansinya pada
λ
maks
549 nm 7 ml getah buah pepaya 26,9685 g
Residu Filtrat
Crude Enzim Papain 4,3171 g
Hasil 1 mL larutan crude enzim papain 1
Universitas Sumatera Utara
3.4.6. Imobilisasi Crude Enzim Papain 3.4.6.1. Imobilisasi Crude Enzim Papain Dengan Kappa karagenan
Kategori