IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Reidentifikasi Vaksin AI H5N1
Vaksin AI H5N1 inaktif strain Legok diekstraksi RNAnya dan diidentifikasi subtipe virus AI-nya berdasarkan gen hemaglutinin HA dan neuraminidase NA.
Reidentifikasi ini penting dilakukan untuk mengetahui bahwa master seed yang digunakan memiliki hemaglutinin H5 dan neuraminidase N1. Vaksin AI yang beredar di
Indonesia harus terdaftar di Departemen Pertanian dan diuji mutunya di BBPMSOH Lampiran 1. Spesifikasi master seed yang digunakan dalam produksi vaksin harus
identik dengan keterangan dalam label vaksin Ditjennak 2007. Reidentifikasi vaksin AI H5N1 inaktif strain Legok dengan uji RT-PCR
menggunakan primer H5 Lee Suarez 2004 dan primer N1 menunjukkan hasil positif terhadap virus AI subtipe H5N1. Gambaran pita DNA H5 berada pada 55 pb sesuai
dengan primer subtipe H5 Gambar 8 dan pita DNA N1 berada pada 120 pb sesuai dengan primer subtipe N1 Gambar 9. Hasil ini menunjukkan bahwa vaksin tersebut
menggunakan master seed H5N1. Master seed ini adalah virus AI yang berasal dari isolat lapang saat wabah AI pertamakali terjadi di Indonesia. Isolat berasal dari ayam
yang terinfeksi oleh virus AI subtipe H5N1 dari daerah Legok, Banten. Penggunaan isolat tersebut sebagai master seed vaksin produksi lokal merupakan kebijakan
pemerintah RI saat keadaan darurat untuk mengatasi wabah AI saat itu walaupun master seed vaksin AI yang direkomendasikan oleh OIE harus berasal dari isolat virus yang Low
Pathogenic Avian Influenza LPAI OIE 2004.
Beberapa kejadian menunjukkan bahwa tidak semua primer H5 dapat digunakan untuk melacak subtipe H5N1. Konfirmasi yang paling tepat untuk menentukan primer
adalah dengan mengetahui urutan nukleotida gen HA dan NA Suwarno et al. 2006.
1 2 3 4 M Gambar 8 Uji Identitas Vaksin AI H5N1 inaktif Strain Legok dengan uji RT-PCR
menggunakan Primer subtipe H5 produk 55 pb: 1. Kontrol negatif; 2. Kontrol negatif H5; 3. Vaksin; 4. Kontrol positif H5; M. Marker 50 pb
Invitrogen
4 3 2 1 M Gambar 9 Uji Identitas Vaksin AI H5N1 inaktif Strain Legok dengan uji RT-PCR
menggunakan Primer subtipe N1 produk 120 pb: 1. Kontrol negatif; 2. Kontrol negatif N1; 3. Kontrol positif N1; 4. Vaksin; M. Marker 100 pb
Invitrogen
4.2 Produksi Antibodi Poliklonal Avian Influenza H5N1 Ab
1
Pada Marmut
Antibodi poliklonal AI H5N1 dalam serum marmut dapat dideteksi dengan uji Agar Gel Presipitasi AGP dan uji hambatan hemaglutinasi HI OIE 2005.
4.2.1 Reidentifikasi Serum Anti AI H5N1 Ab
1
120 bp
250 pb 200 pb
150 pb
400 pb 300 pb
200 pb 100 pb
100 pb
55 pb
50 pb
Kategori