1 2 3 4 M Gambar 8 Uji Identitas Vaksin AI H5N1 inaktif Strain Legok dengan uji RT-PCR
menggunakan Primer subtipe H5 produk 55 pb: 1. Kontrol negatif; 2. Kontrol negatif H5; 3. Vaksin; 4. Kontrol positif H5; M. Marker 50 pb
Invitrogen
4 3 2 1 M Gambar 9 Uji Identitas Vaksin AI H5N1 inaktif Strain Legok dengan uji RT-PCR
menggunakan Primer subtipe N1 produk 120 pb: 1. Kontrol negatif; 2. Kontrol negatif N1; 3. Kontrol positif N1; 4. Vaksin; M. Marker 100 pb
Invitrogen
4.2 Produksi Antibodi Poliklonal Avian Influenza H5N1 Ab
1
Pada Marmut
Antibodi poliklonal AI H5N1 dalam serum marmut dapat dideteksi dengan uji Agar Gel Presipitasi AGP dan uji hambatan hemaglutinasi HI OIE 2005.
4.2.1 Reidentifikasi Serum Anti AI H5N1 Ab
1
120 bp
250 pb 200 pb
150 pb
400 pb 300 pb
200 pb 100 pb
100 pb
55 pb
50 pb
Reidentifikasi serum anti AI H5N1 Ab
1
dengan uji AGP menunjukkan reaksi positif terhadap antigen AI H5N1 dengan terbentuknya garis presipitasi Gambar 10.
Hasil ini menunjukkan bahwa telah terbentuk antibodi yang homolog terhadap virus AI H5N1 yang diimunisasikan.
Gambar 10 Reaksi Presipitasi Serum Marmut Spesifik Terhadap Antigen Virus Avian Influenza
H5N1 Pada Uji Agar Gel Presipitasi: Ag. Antigen AI H5N1; 1. Serum marmut 1; 2. Serum marmut 2; 3. Serum marmut 3; 4. Serum
marmut 4; 5. Serum marmut 5; 6. Serum marmut 6; Garis presipitasi
Keberadaan antibodi poliklonal Avian Influenza H5N1 dideteksi dengan uji HI. Hasil titer antibodi dapat dilihat pada Tabel 4 dan Gambar 11. Titer antibodi yang
terbentuk satu minggu setelah imunisasi ke tiga sebesar 1351.12 2
10.4
. Claassen et al. 2007, mengukur titer antibodi yang dihasilkan oleh ayam layer white leghorn SPF
terhadap beberapa vaksin AI subtipe H5N1 produksi lokal yang berisi master seed virus AI H5N1 strain Legok. Titer antibodi yang dihasilkan setelah vaksinasi dan diuji dengan
HI adalah tinggi yaitu 2
8-11
. Li et al. 2005 dalam penelitiannya mengatakan bahwa hasil titer antibodi terhadap virus AI sebanyak 2
10
1024 adalah tinggi dan dapat dilakukan
panen serum untuk penelitian selanjutnya.
Tabel 4 Titer Antibodi Poliklonal AI H5N1 dengan Uji HI Titer Antibodi
Marmut Pre imunisasi
I II
III
Ag 1
4 5
2
6 3