E. Tata Cara Penelitian 1. Determinasi dan pembuatan simplisia
Sebelum melakukan ekstraksi batang dari jarak cina, terlebih dahulu dilakukan determinasi tanaman jarak cina Jatropha multifida L. di Bagian
Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Bahan baku yang digunakan dalam penelitian ini yang berupa batang,
dipilih dan dicuci sampai bersih dan diiris tipis-tipis. Batang yang telah diiris tipis-tipis dijemur dibawah sinar matahari dan ditutup dengan kain warna hitam
sampai batang jarak cina kering. Bahan hasil pengeringan dihaluskan dengan blender sampai halus dan
diayak. Pengayak yang digunakan memiliki ukuran mesh 40. Jika masih terdapat, serbuk simplisia yang belum lolos ayakan mesh 40, maka dilakukan penghalusan
kembali menggunakan blender. Tujuan proses penghalusan adalah untuk menghasilkan serbuk yang lebih halus sehingga dapat digunakan pada proses
ekstraksi Sari dan Sari, 2011.
2. Ekstraksi dengan maserasi
Proses ekstraksi dilakukan dengan etanol 70 sebanyak 250 mL untuk 30 gram, selama 2 hari.
Hasil maserasi dipisahkan, dan dilanjutkan dengan proses remaserasi dengan menggunakan 250 mL etanol 70. Filtrat yang
dihasilkan diuji kandungan taninnya.
3. Uji kualitatif tanin
Sebanyak 3 tetes ekstrak batang jarak cina diambil menggunakan pipet tetes dan dimasukkan ke dalam cawan porselen. Dilakukan penambahan dengan
3 tetes reagen FeCl
3.
Jika terdapat tanin, maka akan memberikan warna biru kehitaman sampai hijau kehitaman Maula, 2014.
4. Uji kualitatif antibakteri
a. Pembuatan stok bakteri Staphylococcus aureus Sebanyak 7,6 gram media Muller Hinton Agar MHA disuspensikan
ke dalam 200 mL aquadest. Sebanyak 5 mL media MHA dimasukan kedalam tabung reaksi, kemudian disterilkan dengan menggunakan autoklaf suhu
121
o
C selama 15 menit. Setelah steril, tabung reaksi disimpan pada kemiringan 30-45
o
dan media dibiarkan memadat. Biakan murni Staphylococcus aureus diambil 1 ose, lalu diinokulasikan pada media agar
miring secara zig-zag dan diinkubasi selama 48 jam pada suhu suhu 37
o
C. b. Pembuatan suspensi bakteri Staphylococcus aureus
Sebanyak 1 ose koloni bakteri Staphylococcus aureus dari stok bakteri dimasukan kedalam tabung reaksi yang berisi NaCl 0,9. Kekeruhan suspensi
bakteri disesuaikan dengan kekeruhan standar McFarland I 3x10
8
CFUmL. c. Pengujian potensi antibakteri ekstrak batang jarak cina
Media MHA steril dituang ke dalam cawan petri lalu tunggu hingga memadat. Suspensi bakteri Staphylococcus aureus dimasukan pada media
MHA yang telah memadat dengan menggunakan cotton bud steril. Suspensi
bakteri tersebut dioleskan sampai merata. Media MHA yang telah dioleskan suspensi bakteri, dibuat lubang sumuran dengan menggunakan pelubang
sumuran. Diambil 5 ekstrak batang jarak cina dengan menggunakan spuit dan diletakan kedalam lubang sumuran tersebut. Lakukan tiap tahapan secara
aseptis. Cawan petri tersebut diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 C di
dalam inkubator.
F. Formula Krim
Kategori