Pembuatan Media Plate Count Agar PCA

sebanyak 20 ml dituangkan ke dalam cawan petri yang sebelumnya telah ditambah dengan 1 ml larutan kloramfenikol dan digoyangkan sehingga campuran tersebut merata. Setelah agar membeku cawan petri dibalik dan diinkubasikan pada suhu 25 ℃ atau pada suhu kamar selama 5 hari. Pengamatan dilakukan setiap hari sampai hari ke-5. Koloni kapang dan khamir dihitung setelah 5 hari. Uji sterilitas media dilakukan dengan menuangkan media PDA dalam cawan petri dan dibiarkan memadat. Uji sterilitas pengencer dilakukan dengan cara menuangkan media PDA dan 1 ml pengencer PDF lalu dibiarkan memadat.

5. Uji Angka Lempeng Total

a. Pembuatan Media Plate Count Agar PCA

Sebanyak 29 g PCA ditimbang dan di campurkan dengan 1650 ml aquadest, dipanaskan hingga larutan jernih. Kemudian disterilkan dengan autoklaf selama 15 menit pada suhu 121 ℃. b. Larutan Pengencer Buffered Pepton Water BPW Sebanyak 20 g serbuk BPW dilarutkan dalam 1 L air suling dan diukur pH 7,0 ± 1. Kemudian disterilkan dengan menggunakan autoklaf selama 15 menit pada suhu 121 ℃ . c. Uji Angka Lempeng Total ALT Dari masing-masing pengenceran dipipet 1 ml kedalam cawan petri steril secara duplo. Dalam setiap cawan petri dituangkan sebanyak 15 ml media PCA yang telah dicairkan yang bersuhu 45±1 ℃ dalam waktu 15 menit dari pengenceran pertama. Cawan petri digoyangkan dengan hati-hati agar sampel tersebar merata kemudian dibuat duplo. Dilakukan pula uji kontrol untuk mengetahui sterilitas media dan pengencer. Uji sterilitas media dilakukan dilakukan dengan cara menuangkan media PCA dalam suatu cawan petri dan biarkan memadat. Seluruh cawan petri diinkubasi terbalik pada suhu 37 ℃ selama 24 jam hingga 48 jam. Jumlah koloni yang tumbuh diamati dan dihitung. Dihitung Angka Lempeng Total dalam 1 ml contoh dengan mengkalikan jumlah rata-rata koloni pada cawan dengan faktor pengenceran yang digunakan. SNI, 2008.

F. Analisis Hasil

Analisis data dilakukan secara deskriptif komparatif yaitu dengan menganalisis hasil uji AKK dengan metode MA PPOMN nomor 96mik00, analisis ALT dengan metode SNI 2897:2008. Dengan uraian sebagai berikut :

1. Cara menghitung dan menyatakan hasil AKK :

Cara menghitung dan menyatakan hasil AKK sesuai dengan MA PPOMN nomor 96mik00. Cawan petri dipilih dari suatu pengenceran yang menunjukkan jumlah koloni 10-150 koloni. Jumlah koloni dari kedua cawan dihitung lalu dikalikan dengan faktor pengencerannya. Bila pada cawan petri dari 2 tingkat pengenceran yang berurutan menunjukkan jumlah antara 10-150, maka dihitung jumlah koloni dan dikalikan faktor pengenceran, kemudian diambil angka rata- rata. Hasil dinyatakan sebagai angka kapangkhamir dalam tiap ml atau gram contoh. Untuk beberapa kemungkinan lain yang berbeda dari pernyataan diatas, maka diikuti petunjuk sebagai berikut : 1 Bila hanya salah satu diantara kedua cawan petri dari pengenceran yang sama menunjukkan jumlah koloni antara 10-150 koloni, dihitung jumlah koloni dari kedua cawan dan dikalikan dengan faktor pengenceran. 2 Bila pada tingkat pengenceran yang lebih tinggi didapat jumlah koloni pada pengenceran dibawahnya, maka dipilih tingkat pengenceran terendah misal pada pengenceran 10 −2 diperoleh 60 koloni dan pengenceran 10 −3 diperoleh 20 koloni, maka dipilih jumlah koloni pada tingkat pengenceran 10 −2 yaitu 20 koloni, maka