32 Komposisi medium yang digunakan dalam penelitian ini dapat dilihat pada Tabel
5 sebagai berikut.
Tabel 5. Komposisi Medium Biosolubilisasi Batubara Oleh Penicillium sp. Nama
Medium PDA
ml Agar
bakto g
MMS ml
Sukrosa g
Serbuk Batubara
g Keterangan
Potato Dextrose
+ Medium
Minimal Salt
PDAM 75
0,75 75
- -
Untuk Peremajaan
dan media pertumbuhan
Medium Minimal
Salt + Sukrosa
MMSS -
- 600
1 dari volume
total 6g
2 dari volume
total 12g
Untuk solubilisasi
batubara
3.3. Prosedur Kerja 3.3.1. Persiapan dan Sterilisasi Alat
Alat-alat gelas yang akan digunakan dibersihkan, lalu disterilkan dengan menggunakan autoklaf pada suhu 121ºC pada tekanan 1 atm selama 15 menit.
Peralatan yang tidak tahan panas disterilkan dengan menggunakan alkohol 70.
3.3.2. Persiapan Serbuk Batubara
Batubara digerus dengan mortar, lalu disaring menggunakan penyaringan dengan ukuran 70 mesh kurang dari 0,2 mm hingga menjadi serbuk batubara.
33 Sebanyak 5 g sampel batubara yang sudah halus ditimbang dan dimasukkan ke
dalam plastik polyetilen serta ditutup rapat menggunakan sealer.
3.3.3. Iradiasi Batubara Dengan Sinar Gamma
Serbuk batubara ditimbang dalam plastik polyetilen masing-masing 5 g dan ditutup dengan menggunakan sealer, kemudian batubara diiradiasi dengan iradiasi
gamma dengan dosis 0 kGy, 5 kGy, 10 kGy, dan 20 kGy di iradiator IRKA-Pusat Aplikasi Teknologi Isotop dan Radiasi PATIR BATAN.
3.3.4. Pembuatan Medium Potato Dextrose Agar PDA
Sebanyak 2,92 g medium PDA ditimbang, lalu ditambahkan sebanyak 0,75 g agar bakto dan dilarutkan ke dalam 75 ml akuades di atas penangas air hingga
larut. Setelah larut kemudian disterilisasi ke dalam autoklaf dengan suhu 121°C pada tekanan 1 atm selama 15 menit.
3.3.5. Pembuatan Medium Minimal Salt MMS
Medium Minimal Salt MMS dibuat dengan cara menimbang sebanyak 0,52g MgSO
4.
7H
2
O; 0,003 g ZnSO
4
.7H
2
O; 5 g K
2
HPO
4
; 0,005 g FeSO
4
, dan 1 g NH
4
SO
4
, pH 5,5. Kemudian ditambah 1 liter akuades, lalu dilarutkan sampai homogen Silva et al., 2007. Kemudian MMS disterilisasi dengan autoklaf pada
tekanan 1 atm selama 15 menit.
34
3.3.6. Pembuatan Medium Potato Dextrose Agar + Medium Minimal Salt
PDAM
Medium PDAM dibuat dengan mencampurkan medium PDA dan Medium Minimal Salt
MMS dengan perbandingan 1:1 dari volume medium yang telah dibuat. Kemudian medium PDAM dihomogenkan dengan cara pengadukan.
Medium PDAM disterilisasi dengan autoklaf dengan suhu 121 C pada tekanan 1
atm selama 15 menit.
3.3.7. Pembuatan Medium Minimal Salt + Sukrosa MMSS
