UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
170mg100 mL. Puncak kadar glukosa dalam ½ atau 1 jam dan kembali normal
setelah 2-3 jam.
Prinsip metodenya adalah kepada hewan uji yang telah dipuasakan lebih kurang 20 sampai 24 jam, diambil darah melalui intravena lalu diberikan bahan
uji obat antidiabetes dan diberi larutan glukosa per-oral. Kemudian cuplikan darah
diambil lagi setelah interval waktu tertentu Depkes RI, 1993. 2.8
Metode Pemeriksaan Kadar Glukosa Darah Widijanti, 2009
Pemeriksaan kadar glukosa darah dapat ditentukan dengan 4 macam metode , yaitu metode oksidasi reduksi, metode kondensasi, metode enzimatik,
metode dengan glukometer. a.
Metode Oksidasi Reduksi
Pengukuran glukosa berdasarkan pada sifatnya sebagai zat pereduksi dalam larutan alkali panas. Metode ini tidak spesifik karena adanya zat- zat non
glukosa lain juga bersifat mereduksi.
b. Metode Enzimatik
Metode ini menggunakan enzim-enzim yang bekerja secara spesifik pada glukosa, sehingga memberikan hasil yang relatif lebih tepat dibandingkan metode
lainnya. Beberapa metode enzimatik yang digunakan antara lain metode glukosa oksidase dan metode heksokinase
c. Glucose Test glukometer
Pengukuran kadar glukosa darah tikus putih dilakukan dengan glucose test glukometer. Alat ini merupakan alat yang digunakan untuk memonitor tingkat
glukosa didalam darah. Tes ini merupakan spesifik untuk glukosa. Tes tersebut menggunakan oksidasi glukosa dan berdasarkan pada kemajuan teknologi biologi
sensor.
17 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
BAB 3 METODE PENELITIAN
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Farmakognosi dan Penapisan Fitokimia dan Laboratorium Hewan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan
Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Berlangsung mulai dari bulan Maret 2013 sampai dengan Juli 2013.
3.2 Alat dan Bahan
3.2.1 Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut : Timbangan hewan, kandang tikus beserta tempat makan dan minum, sonde oral,
jarum suntik, blender, glukometer easy touch, vacuum rotary evaporator, oven, timbangan analitik, kertas saring, kapas, sarung tangan, masker, alumunium foil,
lumpang, label dan alat-alat gelas.
3.2.2 Bahan
1. Hewan Uji
Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus putih jantan galur Wistar yang berumur 2
– 3 bulan dengan berat badan 150 – 250 g yang diperoleh dari Institut Pertanian Bogor.
2. Bahan Uji
Bahan uji yang digunakan adalah ekstrak n-heksan dari lumut hati Mastigophora diclados Mastigoporaceae, glibenklamid BPOM sebagai obat
pembanding dan aloksan monohidrat sebagai penginduksi. 3.
Bahan Kimia Bahan-bahan yang diperlukan dalam penelitian ini adalah n-heksan
Brataco, NaCMC, Kloroform, H
2
SO
4
pekat , amonia encer, etil asetat, FeCl
3
, pereaksi Mayer, pereaksi Dragendroff, asam klorida, NaOH, aquadest.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
3.3 Cara Kerja
3.3.1 Pembuatan Simplisia
Pembuatan simplisia yang memenuhi standar terdiri dari tahap-tahap sebagai berikut : pengumpulan simplisia yang diambil dari Gunung Slamet
Purwokerto pada bulan September 2012, kemudian disortasi bertujuan agar memudahkan pencucian dan agar dapat memisahkan simplisia dengan
pengotornya, pencucian dilakukan dengan menggunakan air yang mengalir, setelah itu dilakukan pengeringan dengan cara diangin-anginkan setelah benar-
benar kering dilakukan kembali sortasi untuk memastikan simplisia bebas dari pengotor, kemudian simplisia ditimbang dan digiling hingga menjadi serbuk lalu
dilakukan pengayakan.
3.3.2 Ekstraksi
Ditimbang serbuk simplisia 2100 gram, kemudian dimasukkan ke dalam wadah, lalu diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut non polar,
semi polar, dan polar yaitu pelarut n-heksan, etil asetat dan metanol sampai seluruh serbuk terendam oleh pelarut, disimpan ditempat yang gelap dan sesekali
diaduk hingga tidak ada lagi senyawa yang terekstrak dengan ditandai warna pelarut yang jernih. Filtrat yag diperoleh diuapkan dengan rotary evaporator
hingga didapat ekstrak yang kental. Jika masih ada air yang tersisa dikentalkan
menggunakan freeze dryer. 3.3.3
Penapisan Fitokimia
Penapisan fitokimia dilakukan dengan menguji adanya golongan senyawa alkaloid, flavonoid, terpenoid, saponin, tanin dan fenolik. Prosedur pengujiannya
adalah sebagai berikut. a.
Identifikasi Alkaloid
Untuk mengidentifikasi alkaloid, ekstrak dilarutkan dengan etanol 96 kemudian ditambahkan asam klorida encer 2N. Filtrat yang diperoleh disaring
kemudian diidentifikasi menggunakan pereaksi Mayer LP, Bouchardat LP, Dragendorff LP. Pada penambahan Mayer LP, hasil positif ditandai dengan
terbentuknya endapan berwarna putih atau kuning. Hasil positif Dragendorff LP ditunjukkan dengan terbentuknya endapan berwarna merah bata. Penambahan
