Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Biji Pepaya (Carica papaya L.) Terhadap Profil Lipid pada Tikus Putih (Rattus novergicus) Dislipidemia

Lampiran 2. Tumbuhan Pepaya

a. Pohon Pepaya

Lampiran 3. Karakteristik Biji Pepaya

a. Biji pepaya

Lampiran 4. Hasil Pemeriksaan Mikroskopik Serbuk Simplisia Biji Pepaya

Gambar mikroskopik serbuk simplisia biji pepaya perbesaran 10x10

Keterangan: 1 = kutikula 2 = epidermis 3 = parenkim 4 = butir minyak

5 = hablur kristal oksalat bentuk prisma 6 = hablur kristal oksalat bentuk druse 7 = rambut multiselular

8 = berkas pembuluh (xylem)

1 2

3 4 5 6 7

Lampiran 5. Bagan Pembuatan, Skrining Fitokimia, dan Karakterisasi Serbuk Simplisia

Karakterisasi Simplisia: -Mikroskopik

-Makroskopik -Penetapan kadar:

•air

•sari yang larut dalam etanol •sari yang larut dalam air •abu total

•abu yang tidak larut dalam asam Skrining Fitokimia:

-Alkaloid -Flavonoid -Saponin -Tanin -Glikosida

-Steroid/Triterpenoida

Serbuk simplisia daun biji pepaya Simplisia

Biji Pepaya

dicuci sampai bersih

dikeringkan di lemari pengering dengan suhu ± 40oC

Lampiran 6. Bagan Pembuatan, Skrining Fitokimia, dan Karakterisasi Ekstrak

Ekstrak etanol biji pepaya

Karakterisasi Ekstrak: -Penetapan kadar:

• air

•sari yang larut dalam etanol •sari yang larut dalam air •abu total

•abu yang tidak larut dalam asam Skrining Fitokimia:

-Alkaloid -Flavonoid -Saponin -Tanin -Glikosida

-Steroid/Triterpenoida

dipekatkan dengan

rotary evaporator

dikeringkan dengan

freeze dryer

diperkolasi dengan cairan penyari etanol 96% 350 gram serbuk simplisia biji

25,286 gram ekstrak kental Ekstrak cair

Lampiran 7. Bagan Kerja Pengujian Ekstrak Etanol Biji Pepaya

diaklimatisasi selama 1 minggu

20 Ekor Tikus

Tahap Perlakuan

Diberikan pakan biasa + air minum

Diberikan kuning telur

puyuh 1% berat badan

+ larutan PTU dosis 9

mg/kg bb

Diberikan kuning telur

puyuh 1% berat badan +

larutan PTU dosis 9 mg/kg

bb + simvastatin dosis 0,9 mg/kg bb Diberikan kuning telur puyuh 1% berat badan + larutan PTU dosis 9

mg/kg bb + EEBP dosis 200 mg/kg bb Diberikan kuning telur puyuh 1% berat badan + larutan PTU dosis 9 mg/kg bb + EEBP dosis 400 mg/kg

bb

Lampiran 8. Bagan Kerja Pengambilan Darah Tikus

dipuasakan selama 12-24 jam

dibersihkan ekor dengan alkohol

diambil darah tikus melalui ekor

ditampung darah dengan mikrotube sebanyak 1 ml

disentrifuge selama 15 menit dengan kecepatan 4000 rpm

terbentuk 2 lapisan

Pengukuran kadar profil lipid Tikus

Supernatan (serum) _Endapan

Kolesterol Total

Trigliserida High Density Lipoprotein (HDL)

Low Density Lipoprotein (LDL)

Lampiran 9. Bagan Kerja Pengukuran Kadar Kolesterol Total

dipipet sebanyak 10 µ l

dimasukkan kedalam tabung reaksi berisi larutan reagensia kolesterol 1000 µ l

dihomogenkan

diinkubasi pada suhu 37ºC dibiarkan selama 10 menit

diukur pada alat Microlab 300 dengan panjang gelombang 546 nm

dicatat hasilnya Serum tikus

Lampiran 10. Bagan Kerja Pengukuran Kadar Trigliserida

dipipet sebanyak 10 µ l

dimasukkan kedalam tabung reaksi berisi larutan reagensia trigliserida 1000 µl

dihomogenkan

diinkubasi pada suhu 37ºC dibiarkan selama 10 menit

diukur pada alat Microlab 300 dengan panjang gelombang 546 nm

dicatat hasilnya Serum tikus

Lampiran 11. Bagan Kerja Pengukuran Kadar High Density Lipoprotein (HDL)

dipipet sebanyak 200 µ l

dimasukkan kedalam tabung reaksi yang berisi larutan pengendap HDL 500 µ l

dikocok dan dibiarkan selama 10 menit pada suhu 25ºC

disentrifuge selama 20 menit dengan kecepatan 4000 rpm

terdapat 2 lapisan

diambil sebanyak 10 µ l

dimasukkan kedalam tabung reaksi yang berisi larutan reagensia kolesterol sebanyak 1000 µ l

dihomogenkan

diinkubasi pada suhu 37ºC dibiarkan selama 10 menit

diukur pada alat Microlab 300 dengan panjang gelombang 546 nm

dicatat hasilnya

Serum tikus

Supernatan _Endapan

Lampiran 12. Perhitungan Hasil Pemeriksaan Karakteristisasi Simplisia Biji Pepaya

1. Perhitungan kadar air simplisia biji pepaya

% Kadar air simplisia = volume air (ml )

berat sampel (g) x 100%

No. Berat sampel (g) Volume awal (ml) Volume akhir (ml)

1. 5,030 1,90 2,30

2. 5,070 2,30 2,70

3. 5,020 2,70 3,00

% Kadar air = volume akhir − volume awal

berat sampel

x 100%

a. Kadar air = x100% 7,95% 5,030

1,90 -2,30

=

b. Kadar air = x100% 7,88% 5,070

2,30 -70 2,

=

c. Kadar air = x100% 5,97% 5,020

2,70 -3,00

=

% Rata-rata kadar air = 7,95% + 7,88% + 5,97%

Lampiran 12. (Lanjutan)

2. Perhitungan kadar abu total simplisia biji pepaya

% Kadar abu total = berat abu (g)

berat sampel (g)

x 100%

No. Berat sampel (g) Berat abu (g)

1. 2,0127 0,1752

2. 2,0023 0,1726

3. 2,0156 0,1796

a. Kadar abu total = x100% 8,70% 2,0127

0,1752 ₌

b. Kadar abu total = x100% 8,62% 2,0023

0,1726

=

c. Kadar abu total = x100% 8,91% 2,0156

0,1796

=

% Rata-rata kadar abu total = 8,70%+ 8,62%+8,91%

Lampiran 12. (Lanjutan)

3. Perhitungan kadar abu tidak larut asam simplisia biji pepaya

% Kadar abu total = berat abu (g)

berat sampel (g) x 100% No. Berat sampel (g) Berat abu (g)

1. 2,0117 0,0212

2. 2,0235 0,0225

3. 2,0134 0,0215

a. Kadar abu total = x100% 1,05% 2,0117

0,0212 ₌

b. Kadar abu total = x100% 1,11% 2,0235

0.0225

=

c. Kadar abu total = x100% 1,06% 2,0134

0,0215

=

% Rata-rata kadar abu total = 1,05%+1,11%+1,06%

Lampiran 12. (Lanjutan)

4. Perhitungan kadar sari larut dalam air simplisia biji pepaya

% Kadar sari larut dalam air = berat sari (g) berat sampel (g)

x

100

20

x 100%

No. Berat sampel (g) Berat sari (g)

1. 5,0213 0,1742

2. 5,0137 0,1642

3. 5,0221 0,1688

a. Kadar sari larut dalam air = x100% 17,34% 20

100 x 5,0213

0,1742 ₌

b. Kadar sari larut dalam air = x100% 16,37% 20

100 x 5,0137 0,1642

=

c. Kadar sari larut dalam air = x100% 16,81% 20

100 x 5,0221

0,1688 ₌

% Rata-rata kadar sari larut dalam air = 16,84% 3

16,81% 16,37%

17,34%

= +

Lampiran 12. (Lanjutan)

5. Perhitungan kadar sari larut dalam etanol simplisia biji pepaya

% Kadar sari larut dalam etanol = berat sari (g) berat sampel (g)

x

100

20

x 100%

No. Berat sampel (g) Berat sari (g)

1. 5,0221 0,1133

2. 5,0234 0,1142

3. 5,0127 0,1042

a. Kadar sari larut dalam etanol = x100% 11,28% 20

100 x 5,0221

0,1133 ₌

b. Kadar sari larut dalam etanol = x100% 11,36% 20

100 x 5,0234 0,1142

=

c. Kadar sari larut dalam etanol = x100% 10,39% 20

100 x 5,0127 0,1042

=

% Rata-rata kadar sari larut dalam etanol = 11,01% 3

10,39% 11,36%

11,28%

= +

Lampiran 13. Perhitungan Hasil Pemeriksaan Karakteristisasi Ekstrak Etanol Biji Pepaya

1. Perhitungan kadar air ekstrak etanol biji pepaya

% Kadar air simplisia = volume air (ml )

berat sampel (g) x 100%

No. Berat sampel (g) Volume awal (ml) Volume akhir (ml)

1. 5,0026 1,90 2,40

2. 5,0231 2,40 2,85

3. 5,0246 2,85 3,40

% Kadar air = volume akhir − volume awal

berat sampel

x 100%

a. Kadar air = x100% 9,94% 5,0026

1,90 -2,40

=

b. Kadar air = x100% 8,95% 5,0231

2,40 -85 2,

=

c. Kadar air = x100% 10,96% 5,0246

2,85

-3,40 ₌

% Rata-rata kadar air = 9,95%

3

10,96% 8,95%

Lampiran 13. (Lanjutan)

2. Perhitungan kadar abu total ekstrak etanol biji pepaya

% Kadar abu total = berat abu (g)

berat sampel (g)

x 100%

No. Berat sampel (g) Berat abu (g)

1. 2,0054 0,0321

2. 2,0114 0,0345

3. 2,0023 0,0314

a. Kadar abu total = x100% 1,60% 2,0054

0,0321 ₌

b. Kadar abu total = x100% 1,71% 2,0114

0,0345

=

c. Kadar abu total = x100% 1,56% 2,0023

0,0314 ₌

% Rata-rata kadar abu total = 1,62% 3

1,56% 1,71%

1,60%

= +

Lampiran 13. (Lanjutan)

3. Perhitungan kadar abu tidak larut asam ekstrak etanol biji pepaya

% Kadar abu total = berat abu (g)

berat sampel (g) x 100% No. Berat sampel (g) Berat abu (g)

1. 2,0021 0,0052

2. 1,9931 0,0041

3. 2,0142 0,0063

a. Kadar abu total = x100% 0,25% 2,0021

0,0052

=

b. Kadar abu total = x100% 0,20% 1,9931

0,0041 ₌

c. Kadar abu total = x100% 0,31% 2,0142

0,0063

=

% Rata-rata kadar abu total = 0,25% 3

0,31% 0,20%

0,25%

= +

Lampiran 13. (Lanjutan)

4. Perhitungan kadar sari larut dalam air ekstrak etanol biji pepaya

% Kadar sari larut dalam air = berat sari (g) berat sampel (g)

x

100

20

x 100%

No. Berat sampel (g) Berat sari (g)

1. 5,0223 0,6854

2. 5,0127 0,5488

3. 5,0267 0,7021

a. Kadar sari larut dalam air = x100% 68,23% 20

100 x 5,0223

0,6854 ₌

b. Kadar sari larut dalam air = x100% 54,74% 20

100 x 5,0127 0,5488

=

c. Kadar sari larut dalam air = x100% 69,83% 20

100 x 5,0267

0,7021 ₌

% Rata-rata kadar sari larut dalam air = 64,26% 3

69,83% 54,74%

68,23%

= +

Lampiran 13. (Lanjutan)

5. Perhitungan kadar sari larut dalam etanol ekstrak etanol biji pepaya

% Kadar sari larut dalam etanol = berat sari (g) berat sampel (g)

x

100

20

x 100%

No. Berat sampel (g) Berat sari (g)

1. 5,0132 0,7287

2. 5,0211 0,7321

3. 5,0112 0,7101

a. Kadar sari larut dalam etanol = x100% 72,67% 20

100 x 5,0132

0,7287 ₌

b. Kadar sari larut dalam etanol = x100% 72,90% 20

100 x 5,0211 0,7321

=

c. Kadar sari larut dalam etanol = x100% 70,85% 20

100 x 5,0112 0,7101

=

% Rata-rata kadar sari larut dalam etanol = 72,14% 3

70,85% 72,90%

72,67%

= +

Lampiran 14. Contoh Perhitungan Dosis

Tabel. Konversi perhitungan dosis antar jenis hewan (Laurence dan Bacharach, 1964).

a. Contoh perhitungan dosis larutan propiltiourasil 0,1% yang akan diberikan pada tikus secara per oral

1. Dosis manusia (berat 70 kg) = 100 mg

Dosis tikus (berat 200 g) = 0,018 x 100 mg = 1,8 mg = 1000/200 x 1,8 mg = 9 mg/kg bb

2. Larutan propiltiourasil 0,1% dibuat dengan cara melarutkan 100 mg serbuk propiltiourasil kedalam 100 ml akuades.

3. Berapa volume larutan propiltiourasil yang akan diberikan pada tikus? (misal berat tikus 200 g)

Jumlah propiltiourasil dosis 9 mg/kg bb = 200

1000 x 9 mg = 1,8 mg

Volume larutan yang diberi = 1,8 ��

1 ��/�� = 1,8 ml

Mencit 20 g

Tikus 200 g

Marmut 400 g

Kelinci 1,5 kg

Kera 4 kg

Anjing 12 kg

Manusia 70 kg Mencit 20 g 1,0 7,0 12,25 27,8 64,1 124,3 387,9

Tikus 200 g 0,14 1,0 1,74 3,0 9,2 17,8 56,0

Marmut 400 g 0,008 0,57 1,0 2,25 5,2 10,2 31,5 Kelinci 1,5 kg 0,04 0,25 0,44 1,0 2,4 4,5 14,2

Kera 4 kg 0,016 0,11 0,19 0,42 1,0 1,9 6,1

Anjing 12 kg 0,008 0,06 0,10 0,22 0,52 1,0 3,1

Lampiran 14. (Lanjutan)

b. Contoh perhitungan dosis suspensi simvastatin 0,01% yang akan diberikan pada tikus secara per oral

1. Dosis manusia (berat 70 kg) = 10 mg

Dosis tikus (berat 200 g) = 0,018 x 10 mg = 0,18 mg = 1000/200 x 0,18 mg = 0,9 mg/kg bb 2. Cara pembuatan suspensi simvastatin 0,01%

Sebanyak 10 mg tablet simvastatin digerus di dalam lumpang, kemudian ditambahkan sedikit larutan CMC 0,5% dan digerus sampai homogen. Kemudian dituang ke dalam labu tentukur 100 ml, dicukupkan volumenya dengan larutan CMC 0,5% sampai garis tanda.

3. Berapa volume suspensi simvastatin 0,01% yang akan diberikan pada tikus? (misal berat tikus 200 g)

Jumlah simvastatin dosis 0,9 mg/kg bb = 200

1000 x 0,9 mg = 0,18 mg

Volume larutan yang diberi = 0,18 mg

0,1 mg /ml

=

1,8 ml

c. Contoh perhitungan dosis suspensi ekstrak etanol biji pepaya 4% yang akan diberikan pada tikus secara per oral

1. Dosis suspensi ekstrak etanol biji pepaya (EEBP) yang diberikan adalah 200 mg/kg bb dan 400 mg/kg bb

2. Cara pembuatan suspensi ekstrak etanol biji pepaya

Ditimbang 4 gram ekstrak etanol biji pepaya, digerus dalam lumpang. Kemudian ditambahkan sedikit larutan CMC 0,5% digerus sampai homogen. Dituang kedalam labu tentukur 100 ml, kemudian dicukupkan volumenya dengan larutan CMC 0,5% sampai garis tanda.

Lampiran 14. (Lanjutan)

3. Berapa volume suspensi ekstrak etanol biji pepaya 4% yang akan diberikan pada tikus? (misal berat tikus 200 g)

Jumlah EEBP dosis 200 mg/kg bb = 200

1000 x 200 mg = 40 mg

Volume larutan yang diberi = 40 mg

40 mg /ml

=

1 ml

Jumlah EEBP dosis 400 mg/kg bb = 200

1000 x 400 mg = 80 mg

Volume larutan yang diberi = 80 mg

Lampiran 16. Hasil Analisis ANOVA Kadar Profil Lipid pada Tikus

1. Pengukuran Kadar Kolesterol Total

Descriptive

N Mean

Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence

Interval for Mean Minimum Maximum

Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound pakan biasa +

air minum 4 69,25 5,737 2,869 60,12 78,38 64 77 PTU dosis 9

mg/kg bb + kuning telur

4 103,75 5,737 2,869 94,62 112,88 99 112

kel 2 + simvastatin dosis 0,9 mg/kg bb

4 72,50 6,807 3,403 61,67 83,33 63 79

kel 2 + EEBP dosis 200 mg/kg bb

4 60,25 2,062 1,031 56,97 63,53 58 62

kel 2 + EEBP dosis 400 mg/kg bb

4 54,25 5,852 2,926 44,94 63,56 47 61

Total 20 72,00 18,250 4,081 63,46 80,54 47 112

ANOVA

Kadar kolesterol total

Sum of

Squares Df Mean Square F Sig. Between Groups _{5876,000 4 1469,000 48,750 ,000} Within Groups 452,000 15 30,133

Lampiran 16. (Lanjutan)

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Dependent variable: kadar kolesterol total Tukey HSD

(I) kelompok perlakuan

(J) kelompok perlakuan

Mean Difference

(I-J) Std. Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound pakan biasa + air minum PTU dosis 9

mg/kgBB + kuning telur

-34,500(*) 3,882 ,000 -46,49 -22,51

kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb -3,250 3,882 ,915 -15,24 8,74 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb 9,000 3,882 ,193 -2,99 20,99 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb 15,000(*) 3,882 ,011 3,01 26,99 PTU dosis 9 mg/kg bb +

kuning telur

pakan biasa + air

minum 34,500(*) 3,882 ,000 22,51 46,49 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb 31,250(*) 3,882 ,000 19,26 43,24 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb 43,500(*) 3,882 ,000 31,51 55,49 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb 49,500(*) 3,882 ,000 37,51 61,49 kel 2 + simvastatin dosis

0,9 mg/kg bb

pakan biasa + air

minum 3,250 3,882 ,915 -8,74 15,24 PTU dosis 9 mg/kg

bb + kuning telur -31,250(*) 3,882 ,000 -43,24 -19,26 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb 12,250(*) 3,882 ,044 ,26 24,24 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb 18,250(*) 3,882 ,002 6,26 30,24 kel 2 + EEBP dosis 200

mg/kg bb

pakan biasa + air

minum -9,000 3,882 ,193 -20,99 2,99 PTU dosis 9 mg/kg

bb + kuning telur -43,500(*) 3,882 ,000 -55,49 -31,51 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb -12,250(*) 3,882 ,044 -24,24 -,26 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb 6,000 3,882 ,551 -5,99 17,99 kel 2 + EEBP dosis 400

mg/kg bb

pakan biasa + air

minum -15,000(*) 3,882 ,011 -26,99 -3,01 PTU dosis 9 mg/kg

bb + kuning telur -49,500(*) 3,882 ,000 -61,49 -37,51 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb -18,250(*) 3,882 ,002 -30,24 -6,26 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb -6,000 3,882 ,551 -17,99 5,99 * The mean difference is significant at the .05 level.

Lampiran 16. (Lanjutan)

Homogeneous subsets

Kadar Kolesterol Total

Tukey HSD

kelompok perlakuan

N Subset for alpha = .05

1 2 3 4 1

kel 2 + EEBP dosis 400

mg/kg bb 4 54,25

kel 2 + EEBP dosis 200

mg/kg bb 4 60,25 60,25

pakan biasa + air minum _{4 69,25 69,25} kel 2 + simvastatin dosis

0,9 mg/kg bb 4 72,50

PTU dosis 9 mg/kg bb +

kuning telur 4 103,75

Sig. _{,551 ,193 ,915 1,000}

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4,000.

2. Pengukuran Kadar Trigliserida

Descriptive

N Mean

Std.

Deviation Std. Error

95% Confidence

Interval for Mean Minimum Maximum

Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound pakan biasa +

air minum 4 83,75 8,617 4,308 70,04 97,46 71 90 PTU dosis 9

mg/kg bb + kuning telur

4 82,25 1,258 ,629 80,25 84,25 81 84

kel 2 +

simvastatin dosis 0,9 mg/kg bb

4 71,75 2,630 1,315 67,57 75,93 69 74

kel 2 + EEBP dosis 200 mg/kg bb

4 73,00 3,266 1,633 67,80 78,20 69 77

kel 2 + EEBP dosis 400 mg/kg bb

4 54,25 1,500 ,750 51,86 56,64 53 56

Total 20 73,00 11,480 2,567 67,63 78,37 53 90

Anova

Kadar trigliserida

Sum of

Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 2217,000 4 554,250 28,968 ,000 Within Groups 287,000 15 19,133

Lampiran 16. (Lanjutan)

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Dependent variable: kadar trigliserida Tukey HSD

(I) kelompok perlakuan (J) kelompok perlakuan

Mean Differenc

e (I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound pakan biasa + air minum PTU dosis 9 mg/kgBB

+ kuning telur 1,500 3,093 ,988 -8,05 11,05 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb 12,000(*) 3,093 ,011 2,45 21,55 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb 10,750(*) 3,093 ,024 1,20 20,30 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb 29,500(*) 3,093 ,000 19,95 39,05 PTU dosis 9 mg/kg bb +

kuning telur

pakan biasa + air

minum -1,500 3,093 ,988 -11,05 8,05 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kgBB 10,500(*) 3,093 ,028 ,95 20,05 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb 9,250 3,093 ,060 -,30 18,80 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb 28,000(*) 3,093 ,000 18,45 37,55 kel 2 + simvastatin dosis

0,9 mg/kg bb

pakan biasa + air

minum -12,000(*) 3,093 ,011 -21,55 -2,45 PTU dosis 9 mg/kg bb

+ kuning telur -10,500(*) 3,093 ,028 -20,05 -,95 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb -1,250 3,093 ,994 -10,80 8,30 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb 17,500(*) 3,093 ,000 7,95 27,05 kel 2 + EEBP dosis 200

mg/kg bb

pakan biasa + air

minum -10,750(*) 3,093 ,024 -20,30 -1,20 PTU dosis 9 mg/kg bb

+ kuning telur -9,250 3,093 ,060 -18,80 ,30 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb 1,250 3,093 ,994 -8,30 10,80 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb 18,750(*) 3,093 ,000 9,20 28,30 kel 2 + EEBP dosis 400

mg/kg bb

pakan biasa + air

minum -29,500(*) 3,093 ,000 -39,05 -19,95 PTU dosis 9 mg/kg bb

+ kuning telur -28,000(*) 3,093 ,000 -37,55 -18,45 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb -17,500(*) 3,093 ,000 -27,05 -7,95 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb -18,750(*) 3,093 ,000 -28,30 -9,20 * The mean difference is significant at the .05 level.

Lampiran 16. (Lanjutan)

Homogeneous subsets

Kadar Trigliserida

Tukey HSD kelompok perlakuan

N Subset for alpha = .05

1 2 3 4 1

kel 2 + EEBP dosis 400

mg/kg bb 4 54,25

kel 2 + simvastatin dosis

0,9 mg/kg bb 4 71,75

kel 2 + EEBP dosis 200

mg/kg bb 4 73,00 73,00

PTU dosis 9 mg/kg bb +

kuning telur 4 82,25 82,25

pakan biasa + air minum _{4 83,75}

Sig. 1,000 ,994 ,060 ,988

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4,000.

3. Pengukuran Kadar HDL (High Density Lipoprotein) Descriptive

N Mean

Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence

Interval for Mean Minimum Maximum

Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound pakan biasa + air

minum 4 47,50 4,435 2,217 40,44 54,56 42 52 PTU dosis 9

mg/kg bb + kuning telur

4 36,50 2,380 1,190 32,71 40,29 34 39

kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb 4 53,50 5,745 2,872 44,36 62,64 46 58 kel 2 + EEBP

dosis 200 mg/kg bb

4 41,00 2,582 1,291 36,89 45,11 38 44

kel 2 + EEBP dosis 400 mg/kg bb

4 38,00 4,397 2,198 31,00 45,00 33 43

Total _{20 43,30 7,463 1,669 39,81 46,79 33 58}

ANOVA

Kadar HDL

Sum of

Squares df Mean Square F Sig. Between Groups _{805,200 4 201,300 11,935 ,000} Within Groups 253,000 15 16,867

Total 1058,200 19

Lampiran 16. (Lanjutan)

Multiple Comparisons

Dependent variable: kadar HDL Tukey HSD

(I) kelompok perlakuan

(J) kelompok perlakuan Mean Difference (I-J) Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound pakan biasa + air minum PTU dosis 9 mg/kg

bb + kuning telur 11,000(*) 2,904 ,013 2,03 19,97 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb -6,000 2,904 ,284 -14,97 2,97 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb 6,500 2,904 ,219 -2,47 15,47 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb 9,500(*) 2,904 ,035 ,53 18,47 PTU dosis 9 mg/kg bb +

kuning telur

pakan biasa + air

minum -11,000(*) 2,904 ,013 -19,97 -2,03 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb -17,000(*) 2,904 ,000 -25,97 -8,03 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb -4,500 2,904 ,549 -13,47 4,47 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb -1,500 2,904 ,984 -10,47 7,47 kel 2 + simvastatin dosis

0,9 mg/kg bb

pakan biasa + air

minum 6,000 2,904 ,284 -2,97 14,97 PTU dosis 9 mg/kg

bb + kuning telur 17,000(*) 2,904 ,000 8,03 25,97 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb 12,500(*) 2,904 ,005 3,53 21,47 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb 15,500(*) 2,904 ,001 6,53 24,47 kel 2 + EEBP dosis 200

mg/kg bb

pakan biasa + air

minum -6,500 2,904 ,219 -15,47 2,47 PTU dosis 9 mg/kg

bb + kuning telur 4,500 2,904 ,549 -4,47 13,47 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb -12,500(*) 2,904 ,005 -21,47 -3,53 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb 3,000 2,904 ,836 -5,97 11,97 kel 2 + EEBP dosis 400

mg/kg bb

pakan biasa + air

minum -9,500(*) 2,904 ,035 -18,47 -,53 PTU dosis 9 mg/kg

bb + kuning telur 1,500 2,904 ,984 -7,47 10,47 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb -15,500(*) 2,904 ,001 -24,47 -6,53 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb -3,000 2,904 ,836 -11,97 5,97 * The mean difference is significant at the .05 level.

Lampiran 16. (Lanjutan)

Homogeneous subsets

Kadar HDL

Tukey HSD kelompok perlakuan

N Subset for alpha = .05

1 2 3 1

PTU dosis 9 mg/kg bb +

kuning telur 4 36,50

kel 2 + EEBP dosis 400

mg/kg bb 4 38,00

kel 2 + EEBP dosis 200

mg/kg bb 4 41,00 41,00

pakan biasa + air minum _{4 47,50 47,50} kel 2 + simvastatin dosis

0,9 mg/kg bb 4 53,50

Sig. ,549 ,219 ,284

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4,000.

4. Kadar LDL (Low Density Lipoprotein)

Descriptive

N Mean

Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence

Interval for Mean Minimum Maximum

Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound pakan biasa + air

minum 4 5,25 2,062 1,031 1,97 8,53 3 7 PTU dosis 9

mg/kg bb + kuning telur

4 51,00 7,394 3,697 39,23 62,77 46 62

kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb 4 4,50 3,109 1,555 -,45 9,45 1 8 kel 2 + EEBP

dosis 200 mg/kg bb

4 4,50 2,082 1,041 1,19 7,81 2 7

kel 2 + EEBP dosis 400 mg/kg bb

4 5,25 1,708 ,854 2,53 7,97 3 7

Total _{20 14,10 19,246 4,304 5,09 23,11 1 62}

ANOVA

Kadar LDL

Sum of

Squares df Mean Square F Sig. Between Groups _{6810,300 4 1702,575 112,258 ,000} Within Groups 227,500 15 15,167

Lampiran 16. (Lanjutan)

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Dependent variable: kadar LDL Tukey HSD

(I) kelompok perlakuan

(J) kelompok perlakuan

Mean Differenc

e (I-J) Std. Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound Lower Bound Upper Bound Lower Bound pakan biasa + air minum PTU dosis 9 mg/kg

bb + kuning telur -45,750(*) 2,754 ,000 -54,25 -37,25 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb ,750 2,754 ,999 -7,75 9,25 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb ,750 2,754 ,999 -7,75 9,25 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb ,000 2,754 1,000 -8,50 8,50 PTU dosis 9 mg/kg bb +

kuning telur

pakan biasa + air

minum 45,750(*) 2,754 ,000 37,25 54,25 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb 46,500(*) 2,754 ,000 38,00 55,00 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb 46,500(*) 2,754 ,000 38,00 55,00 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb 45,750(*) 2,754 ,000 37,25 54,25 kel 2 + simvastatin dosis

0,9 mg/kg bb

pakan biasa + air

minum -,750 2,754 ,999 -9,25 7,75 PTU dosis 9 mg/kg

bb + kuning telur -46,500(*) 2,754 ,000 -55,00 -38,00 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb ,000 2,754 1,000 -8,50 8,50 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb -,750 2,754 ,999 -9,25 7,75 kel 2 + EEBP dosis 200

mg/kg bb

pakan biasa + air

minum -,750 2,754 ,999 -9,25 7,75 PTU dosis 9 mg/kg

bb + kuning telur -46,500(*) 2,754 ,000 -55,00 -38,00 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb ,000 2,754 1,000 -8,50 8,50 kel 2 + EEBP dosis

400 mg/kg bb -,750 2,754 ,999 -9,25 7,75 kel 2 + EEBP dosis 400

mg/kg bb

pakan biasa + air

minum ,000 2,754 1,000 -8,50 8,50 PTU dosis 9 mg/kg

bb + kuning telur -45,750(*) 2,754 ,000 -54,25 -37,25 kel 2 + simvastatin

dosis 0,9 mg/kg bb ,750 2,754 ,999 -7,75 9,25 kel 2 + EEBP dosis

200 mg/kg bb ,750 2,754 ,999 -7,75 9,25 * The mean difference is significant at the .05 level.

Lampiran 16. (Lanjutan)

Homogeneous subsets

Kadar LDL

Tukey HSD kelompok perlakuan

N Subset for alpha = .05

1 2 1

kel 2 + simvastatin dosis

0,9 mg/kg bb 4 4,50

kel 2 + EEBP dosis 200

mg/kg bb 4 4,50

pakan biasa + air minum 4 5,25 kel 2 + EEBP dosis 400

mg/kg bb 4 5,25

PTU dosis 9 mg/kg bb +

kuning telur 4 51,00

Sig. ,999 1,000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4,000.

Lampiran 17. Alat dan Bahan

a. Alat Microlab 300 (E-Merck)

Lampiran 17. (Lanjutan)

c. Oral sonde + spuit

e. Komposisi reagensia trigliserida

Lampiran 18. Hewan percobaan

a. Tikus jantan

b. Proses pengambilan darah pada tikus

DAFTAR PUSTAKA

Adam, J.M.F. (2009). Dislipidemia. Dalam Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Edisi Kelima. Jilid III. Editor Aru Sudoyo, Bambang Setiyohadi, Idrus Alwi, Marcellus Simadibrata, Siti Setiati. Jakarta: Interna Publishing. Halaman 1984-1992.

Adeneye, A.A., dan Olagunju, J.A. (2009). Preliminary Hypoglycemic and Hypolipidemic Activities of the Aqueous Seed Extract of Carica papaya Linn. in Wistar rats. Biology and Medicine. 1(1): 1-10.

Afoakwah, A.N., dan Owusu, W.B. (2011). The Relationship Between Dietary Intake, Body Composition and Blood Pressure in Male Adult Miners in Ghana. Asian Journal of Clinical Nutrition. 3: 1-13.

Anderson, P.O., James, E.K., dan William, G.T. (2002). Handbook of Clinical

Drug Data. Edisi 10. Amerika Serikat: McGraw-Hill Companies, Inc.

Halaman 375-376.

Anonim. (2012). Profil Lipid (Kadar lemak darah). Tanggal akses 1 september 2014. https://infolaboratoriumkesehatan.wordpress.com/tag/profil-lipid-kadar-lemak-darah.

Anwar, T.B. (2004). Dislipidemia sebagai Faktor Resiko Penyakit Jantung

Koroner. Medan: Universitas Sumatera Utara. Diakses tanggal 23 Maret

2014

Brunton, L.L., John, S.L., dan Keith, L.P. (2010). Goodman & Gilman Manual

Farmakologi dan Terapi. Penerjemah Elin Yulinah Sukandar. Jakarta:

EGC. Halaman 575.

Canaris, G.J., Neil, R.M., Gilbert, M., dan Chester, E.R. (2000). The Colorado Thyroid Disease Prevalence Study. Arch Intern Med. 160: 526-534.

Changamma, C., dan Hasim, B.S. (2013). Effect of Carica papaya (L.) Seed Extract on Lipid Metabolites in Male Albino Rats. International Journal of

Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 4(5): 527-529.

Cipla. (2005). Essence Series Essential Information in Brief: dyslipidemia.

Halaman 2-3. Tanggal akses 5 April 2014.

Depkes RI. (2000). Inventaris Tanaman Obat Indonesia (I) Jilid I. Jakarta: Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan. Halaman 51-52.

Dipiro, T.J., Robert, L.T., Gary, C.Y., Gary, R.M., Barbara, G.W., dan Michael, P.L. (2007). Pharmacotherapy a Patophysiologic Approach. Edisi 7. Washington DC: McGraw-Hill Companies Inc. Halaman 386, 397.

Ditjen POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 28-29, 47.

Ditjen POM a. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi keempat. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 969-971, 1033.

Ditjen POM b. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 297-326, 333-340.

Ditjen POM. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Cetakan I. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 10-11, 17, 31-32.

Dwiloka, B. (2003). Efek Kolesterolemik Berbagai Telur. Media Gizi &

Keluarga. 27(2): 58-65.

Elekofehinti, O.O., Adanlawo, I.G., Saliu, J.A., dan Sodehinde, S.A. (2012). Saponins from Solanum anguivi Fruits Exhibit Hypolipidemic Potential in

Rattus novergicus. Der Pharmacia Lettre. 4(3): 811-814.

Farnsworth, N.R. (1966). Biological and Phytochemical Screening of Plants. J.

Pharm. Sci. 55(3): 264.

Guyton, A.C., dan Hall, J.E. (2006). Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 11. Jakarta: EGC. Halaman 983.

Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia. Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Edisi II. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 152.

Heidenreich, P.A., Trogdon, J.G., Khavjou, O.A., Butler, J., Dracup, K., Ezekowitz, M.D., et al. (2011). Forecasting the Future of Cardiovascular Disease in the United States: a Policy Statement from American Heart Association. Circulation. 123: 933-944.

Kalie, M.B. (1996). Bertanam Pepaya. Edisi Revisi. Jakarta: Penebar Swadaya. Halaman 1-11.

Kelompok Kerja Ilmiah Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto Medika. (1991).

Penapisan Farmakologi, Pengujian Fitokima dan Pengujian Klinik: Antihiperlipidemia. Halaman 41-44.

Kothari, S., Anand, K.J., Swaroop, C.M., dan Shrinivas, D.T. (2011). Hypolipidemic Effect Of Fresh Triticum aestivum (Wheat) Grass Juice in Hypercholesterolemic Rats. Acta Poloniae Pharmaceutica-Drug Research. 2(68): 291-294.

Liscum, L. (2002). Cholesterol Biosynthesis. Dalam buku Biochemistry of Lipids, Lipoproteins, and Membrans. Edisi ke-4. Editor: D.E Vance dan J.E Vance. Washington DC: Elsevier Science B.V. Halaman 411.

Matsui, Y., Keiko, K., Hideki, M., Hideo, K., Makoto, A., Hidetoshi, K., dan Hitomi, K. (2009). Quantitative Analysis of Saponins in a Tea-Leaf Extract and Their Antihypercholesterolemic Activity. Biosci. Biotechnol.

Biochem. 73(7): 1513-1519.

Milind, P., dan Gurditta. (2011). Basketful Benefits of Papaya. International

Research Journal of Pharmacy. 2(7): 6-12.

Moffat, A.C., David O.M., dan Brian, W. (2005). Clarke’s Analysis of Drug and

Poisons. Edisi 3. London: Pharmaceutical Press. Electronic Version.

Murray, R.K., Daryl, K. G., dan Victor, W.R. (2003). Biokimia Harper. Edisi ke 27. Jakarta: EGC. Halaman 239-249.

Nidjvelt, R.J., Els, Danny, E.C., Petra, G.B., Klaske, dan Paul, A.M. (2001). Flavonoids: a Review of Probable Mechanisms of Action and Potential Applications. Am J Clin Nutr. 74: 418–425.

Oliveira, T.T., Kelly, F.S.R., Marcia, R.A., Marcelo, R.C., dan Tanus, J.M. (2007). Hypolipidemic Effect of Flavonoids and Cholestyramine in Rats.

Lat. Am. J. Pharm. 26(3): 407-410.

Pamungkas, R.A., Singgih, S.S.R., dan Samsu, W. (2013). Pengaruh Level Etanol dan Lama Maserasi Kuning Telur Puyuh Terhadap Kolesterol Total, HDL, dan LDL. Jurnal Ilmiah Peternakan. 1(3): 1136-1142.

Randox Laboratories. (2007). Lipid Profile. United Kingdom: Randox Laboratories Ltd. Halaman 6.

Rizos, C.V., Elisaf, M.S., dan Liberopuolos, E.N. (2011). Effects of Thyroid Dysfunction on Lipid Profile. The Open Cardiovascular Medicine Journal. 5: 76-84.

Roger, V.L., Go, A.S., Llyod-Jones, D.M., Adams, R.J., Berry, J.D., Brown., T.M., et al. (2011). Heart Disease and Stroke Statistic 2011 Update: a Report from the American Heart Association. Circulation. 123: 18-20.

Sargowo, D. (2008). Rosuvastatin: a Highly Potent Statin for the Prevention and Management of Cardiovascular Disease. Ringkasan. Malang: Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. Halaman 7-8.

Satyanarayana, U. (2005). Biochemistry. Edisi kedua. New Delhi: Uppala Author-Publisher Interlinks. Halaman 319.

Soeharto, I. (2004). Penyakit Jantung Koroner dan Serangan Jantung. Edisi Kedua. Jakarta: Gramedia. Halaman 66.

Suharti, K., Suherman, dan Elysabeth. (2007). Hormon Tiroid dan Antitiroid. Dalam buku Farmakologi dan Terapi. Edisi Ke-5. Editor: Sulistia Gan Gunawan. Jakarta: Fakultas Kedokteran UI. Halaman 441-442.

Sukadana, I.M., Sri, R.S., dan Juliarti, N.K. (2008). Aktivitas Antibakteri Senyawa Golongan Triterpenoid dari Biji Pepaya (Carica papaya L.).

Jurnal Kimia. 2(1): 15-18.

Suyatna, F.D. (2007). Hipolipidemik. Dalam buku Farmakologi dan Terapi. Edisi Ke-5. Editor: Sulistia Gan Gunawan. Jakarta: Fakultas Kedokteran UI. Halaman 374.

Suyono, S. (1996). Hiperlipidemia. Dalam Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam. Jilid I. Edisi Ketiga. Editor: H.M. Sjaifoellah Noer. Jakarta: Fakultas Kedokteran UI. Halaman 718.

Tebib, K., Pierre, B., dan Jean, M.R. (1994). Dietary Grape Seed Tannins Affect Lipoproteins, Lipoprotein Lipases and Tissue Lipids in Rats Fed Hypercholesterolemic Diets. J. Nutr. 124: 2451-2457.

Voight, R. (1995). Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Edisi ke-5. Yogyakarta: Media Press. Halaman 564, 568, 570, 574-577.

Wahyuningrum, M.R. (2012). Pengaruh Pemberian Buah Pepaya (Carica papaya L.) Terhadap Kadar Trigliserida Pada Tikus Sprague Dawley Dengan Hiperkolesterolemia. Artikel Penelitian. Semarang: Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro.

Warisno. (2003). Budidaya Pepaya. Yogyakarta: Kanisius. Halaman 16.

World Health Organization. (1998). Quality Control Methods for Medicinal Plant

Material. Switzerland: WHO. Halaman 19-25.

Williams, H. (2005). Dislipidemia-Terapi Obat. Penerjemah Diana Lyrawati. (2008). Ringkasan. Halaman 1-6.

Zhao, H.L., Sim, J. S., Shim, S.H., Ha, Y.W., Kang, S.S., dan Kim, Y.S. (2005). Antiobese and Hypolipidemic Effects of Platycodin Saponins in Diet-Induced Obese Rats: Evidences for Lipase Inhibition and Calorie Intake Restriction. International Journal of Obesity. 29: 983–990.

BAB III

METODE PENELITIAN

Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah metode eksperimental dengan post-test only control group design. Prosedur yang dilakukan meliputi penyiapan bahan tumbuhan, karakterisasi simplisia dan ekstrak, skrining fitokimia simplisia dan ekstrak, pembuatan ekstrak etanol biji pepaya, tahap persiapan bahan pengujian, dan tahap pengujian terhadap profil lipid pada tikus diantaranya pengukuran kadar kolesterol total, pengukuran kadar trigliserida, pengukuran kadar HDL dan pengukuran kadar LDL dengan metode kolorimetri enzimatik. Data dianalisis dengan uji One way Anova dan dilanjutkan dengan uji post hoc

Tukey untuk melihat perbedaan nyata antar perlakuan. Analisis statistik ini

menggunakan program SPSS (Statistical Product and Service Solution) versi 15 dengan taraf kepercayaan 95%.

3.1 Alat dan Bahan Penelitian

3.1.1 Alat Penelitian

Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini adalah alat-alat gelas laboratorium, aluminium foil, batang pengaduk, blender, cawan penguap 250 ml,

centrifuge, kertas saring, label, lemari pengering, mikrotube, mortir, neraca

analitik, neraca hewan, neraca kasar, oral sonde, penjepit tabung, pipet tetes, rak tabung reaksi, rotary evaporator, spatula, spektrofotometer UV-Vis, spuit 1 ml, spuit 3 ml, stamfer, stopwatch, vial, vortex, dan waterbath.

3.1.2 Bahan Penelitian

Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah biji pepaya. Bahan-bahan kimia yang berkualitas pro analisis produksi E-Merck: toluen, kloroform, isopropanol, benzen, n-heksan, asam nitrat pekat, asam klorida pekat, asam sulfat pekat, raksa (II) klorida, bismuth (III) nitrat, besi (III) klorida, timbal (II) asetat, kalium iodida, iodium, α-naftol, asam asetat anhidrida, natrium hidroksida, amil alkohol, serbuk magnesium (Mg) dan kloralhidrat. Bahan kimia berkualitas teknis yang digunakan adalah etanol 96%.

Bahan lain yang digunakan adalah aquades, CMC Na, kuning telur puyuh, tablet propiltiourasil, tablet simvastatin, reagensia kolesterol, reagensia trigliserida, dan reagensia pengendap HDL-kolesterol.

3.1.3 Komposisi Reagensia Pengukuran Kadar Profil Lipid

Komposisi reagensia pengukuran kadar profil lipid serum pada tikus dapat dilihat pada Lampiran 17 halaman 104-105.

3.2 Hewan Penelitian

Hewan yang digunakan pada penelitian ini adalah tikus jantan galur wistar (Rattus novergicus) berumur 2-3 bulan dengan bobot badan 150-200 g yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara (USU). Hewan ini diaklimatisasi selama 1 (satu) minggu dengan tujuan untuk menyeragamkan makanan dan hidupnya dengan kondisi yang serba sama sehingga dianggap memenuhi syarat untuk penelitian.

3.3 Penyiapan Bahan Tumbuhan

Penyiapan bahan tumbuhan meliputi pengumpulan bahan tumbuhan, identifikasi tumbuhan, dan pembuatan simplisia biji pepaya.

3.3.1 Pengumpulan Bahan Tumbuhan

Pengumpulan bahan tumbuhan dilakukan secara purposif, yaitu tanpa membandingkan dengan daerah lain. Bagian tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah buah pepaya matang yang diambil dari Dusun 17 Tambak Bayan Desa Saentis, Kecamatan Percut Sei Tuan, Kabupaten Deli Serdang, Provinsi Sumatera Utara. Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah biji pepaya yang terdapat pada buah pepaya matang.

3.3.2 Identifikasi Tumbuhan

Identifikasi tumbuhan dilakukan pada Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Bogor, Indonesia.

3.3.3 Pembuatan Simplisia Biji Pepaya

Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah biji pepaya yang terdapat pada buah pepaya matang. Biji dipisahkan dari buahnya. Biji dicuci hingga bersih untuk menghilangkan sisa daging buah dan pengotoran lainnya, kemudian ditiriskan dan ditimbang. Diperoleh berat basah 1,5 kg. Selanjutnya biji tersebut dikeringkan di dalam lemari pengering pada suhu ± 40oC sampai biji kering (ditandai dengan apabila ditumbuk tidak menggumpal lagi). Simplisia yang telah kering diblender menjadi serbuk, kemudian serbuk kering ditimbang dan diperoleh berat serbuk 450 g. Serbuk dimasukkan ke dalam wadah bertutup, dan di simpan pada suhu kamar.

3.4 Pembuatan Pereaksi

3.4.1 Pereaksi Mayer

Sebanyak 1,4 g raksa (II) klorida dilarutkan dalam air suling hingga 60 ml, pada wadah lain ditimbang sebanyak 5 g kalium iodida lalu dilarutkan dalam 10 ml air suling, kedua larutan dicampurkan dan ditambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Ditjen POM a

3.4.2 Pereaksi Dragendorff

, 1995).

Sebanyak 0,8 g bismut (III) nitrat ditimbang, dilarutkan dalam 20 ml asam nitrat pekat, pada wadah lain ditimbang sebanyak 27,2 g kalium iodida, dilarutkan dalam 50 ml air suling, kemudian kedua larutan dicampurkan dan didiamkan sampai memisah sempurna. Larutan yang jernih diambil dan diencerkan dengan air suling hingga volume larutan 100 ml (Ditjen POM a

3.4.3 Pereaksi Bourchardat

, 1995).

Sebanyak 4 g kalium iodida ditimbang, dilarutkan dalam air suling secukupnya, lalu ditambahkan 2 g iodium kemudian ditambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Ditjen POM a

3.4.4 Pereaksi Molisch

, 1995).

Seban yak 3 g α-naftol ditimbang, dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N hingga diperoleh larutan 100 ml (Ditjen POM a

3.4.5 Pereaksi Asam Klorida 2 N

, 1995).

Sebanyak 17 ml larutan asam klorida pekat ditambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Ditjen POM a, 1995).

3.4.6 Pereaksi Asam Sulfat 2 N

Sebanyak 5,4 ml larutan asam sulfat pekat ditambahkan air suling sampai 100 ml (Ditjen POM a

3.4.7 Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N

, 1995).

Sebanyak 8 g kristal natrium hidroksida dilarutkan dengan air suling sebanyak 100 ml (Ditjen POM a

3.4.8 Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4 M

, 1995).

Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air suling bebas karbon dioksida sebanyak 100 ml (Ditjen POM a

3.4.9 Pereaksi besi (III) klorida 1%

, 1995).

Sebanyak 1 g besi (III) klorida ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air secukupnya hingga diperoleh larutan 100 ml (Ditjen POM a

3.4.10 Pereaksi Liebermann-Burchard

, 1995).

Sebanyak 5 bagian volume asam sulfat pekat dicampurkan dengan 50 bagian volume etanol 95%. Kemudian ditambahkan dengan hati-hati 5 bagian volume asam asetat anhidrida ke dalam campuran tersebut dan dinginkan (Ditjen POM a, 1995).

3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia dan Ekstrak

Pemeriksaan karakteristik simplisia dan ekstrak meliputi pemeriksaan makroskopik dan mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar abu total, penetapan kadar abu tidak larut asam, penetapan kadar sari larut air, penetapan kadar sari larut etanol.

3.5.1 Pemeriksaan Makroskopik

Pemeriksaan makroskopik dilakukan dengan cara mengamati warna,

bentuk, ukuran dan tekstur dari simplisia.

3.5.2 Pemeriksaan Mikroskopik

Pemeriksaan mikroskopik terhadap simplisia dilakukan dengan cara menaburkan serbuk simplisia di atas kaca objek yang telah diteteskan dengan larutan kloralhidrat dan ditutup dengan kaca penutup kemudian diamati di bawah mikroskop.

3.5.3 Penetapan Kadar Air

Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (destilasi toluena). Cara kerja: toluena sebanyak 200 ml dan air suling sebanyak 2 ml dimasukkan ke dalam labu alas bulat, didestilasi selama 2 jam. Toluena didinginkan selama 30 menit dan volume air dalam tabung penerima dibaca (WHO, 1998). Kemudian ke dalam labu tersebut dimasukkan 5 g serbuk simplisia yang telah ditimbang seksama, labu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah toluena mendidih, kecepatan tetesan diatur 2 tetes tiap detik sampai sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes tiap detik. Setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluena. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin pada suhu kamar. Setelah air dan toluena memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (Ditjen POM b, 1995).

3.5.4 Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dan ekstrak dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam air suling sampai 1 liter) dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, lalu disaring. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah ditara dan sisa dipanaskan pada suhu 105°C sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (WHO, 1998; Ditjen POM b

3.5.5 Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol

, 1995)

Sebanyak 5 g serbuk simplisia dan ekstrak dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 96% dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam. Kemudian disaring cepat untuk menghindari penguapan etanol. Sejumlah 20 ml filtrat diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105°C sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam etanol 96% dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (WHO, 1998; Ditjen POM b

3.5.6 Penetapan Kadar Abu Total

, 1995)

Sebanyak 2 g serbuk simplisia dan ekstrak dimasukkan dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, jika arang masih tidak dapat dihilangkan, ditambahkan air panas, saring melalui kertas saring bebas abu. Pijarkan sisa dan kertas saring dalam krus yang sama. Masukkan filtrat ke dalam krus, uapkan, pijarkan hingga

bobot tetap, timbang. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (WHO, 1998; Ditjen POM b

3.5.7 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam

, 1995).

Abu yang diperoleh dalam penetapan kadar abu didihkan dalam 25 ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan, disaring melalui kertas saring bebas abu, cuci dengan air panas, dipijarkan, kemudian didinginkan dan ditimbang sampai bobot tetap. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (WHO, 1998; Ditjen POM b, 1995).

3.6 Skrining Fitokimia Serbuk Simplisia dan Ekstrak

Skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak meliputi pemeriksaan senyawa golongan alkaloid, flavonoid, tanin, glikosida, saponin, dan steroid/triterpenoid.

3.6.1 Pemeriksaan Alkaloida

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia dan ekstrak ditimbang kemudian ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit, didinginkan lalu disaring. Filtrat dipakai untuk percobaan berikut:

a. filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereksi Mayer akan terbentuk endapan berwarna putih atau kuning.

b. filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereksi Bouchardat akan terbentuk endapan berwarna coklat-hitam.

c. filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereksi Dragendorff akan terbentuk endapan berwarna merah atau jingga.

Alkaloida dinyatakan positif jika terjadi endapan atau paling sedikit dua atau tiga dari percobaan di atas (Ditjen POM b

3.6.2 Pemeriksaan Flavonoida

, 1995).

Larutan Percobaan:

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia dan ekstrak disari dengan 10 ml metanol lalu direfluks selama 10 menit, disaring panas-panas melalui kertas saring berlipat, filtrat diencerkan dengan 10 ml air suling. Setelah dingin ditambah 5 ml eter minyak tanah, dikocok hati-hati, didiamkan. Lapisan metanol diambil, diuapkan pada temperatur 40o

Cara Percobaan:

C. Sisa dilarutkan dalam 5 ml etil asetat, disaring.

a. satu ml larutan percobaan diuapkan hingga kering, sisanya dilarutkan dalam 1-2 ml etanol 96%, ditambahkan 0,5 g serbuk seng dan 2 ml asam klorida 2 N, didiamkan selama satu menit. Ditambahkan 10 ml asama klorida pekat, jika dalam waktu 2-5 menit terjadi warna merah intensif menunjukkan adanya flavonoida (glikosida-3-flavonol).

b. satu ml larutan percobaan diuapkan hingga kering, sisanya dilarutkan dalam 1 ml etanol 96%, ditambahkan 0,1 g magnesium dan 10 ml asam klorida pekat, terjadi warna merah jingga sampai merah ungu menunjukkan adanya flavonoida (Ditjen POM b

3.6.3 Pemeriksaan Tanin

, 1995).

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia dan ekstrak disari dengan 10 ml air suling, disaring lalu filtratnya diencerkan dengan air suling sampai tidak berwarna. Diambil 2 ml larutan lalu ditambahkan 1 sampai 2 tetes pereaksi besi

(III) klorida. Terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Farnsworth, 1966).

3.6.4 Pemeriksaan Glikosida

Sebanyak 3 g serbuk simplisia dan ekstrak disari dengan 30 ml campuran 7 bagian volume etanol 96% dan 3 bagian volume air suling, selanjutnya ditambahkan 10 ml HCl 2 N, direfluks selama 10 menit, didinginkan dan disaring. Pada 30 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan selama 5 menit lalu disaring. Filtrat disari sebanyak 3 kali, tiap kali dengan 20 ml campuran 3 bagian volume kloroform dan 2 bagian volume isopropanol. Diambil lapisan air kemudian ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes pereaksi Molisch, ditambahkan hati-hati 2 ml asam sulfat pekat terbentuk cincin warna ungu pada batas kedua cairan menunjukkan adanya ikatan gula (Ditjen POM b

3.6.5 Pemeriksaan Saponin

, 1995).

Sebanyak 0,5 g simplisia dan ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 10 ml air suling panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik, timbul busa yang mantap tidak kurang dari 10 menit setinggi 1-10 cm. Ditambahkan 1 tetes larutan asam klorida 2 N, bila buih tidak hilang menunjukkan adanya saponin (Ditjen POM b

3.6.6 Pemeriksaan Steroida/Triterpenoida

, 1995).

Sebanyak 1 g simplisia dan ekstrak dimaserasi dengan 20 ml eter selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa dalam cawan penguap ditambahkan 2 tetes asam asetat anhidrida dan 1 tetes asam sulfat pekat.

Timbul warna ungu atau merah kemudian berubah menjadi hijau biru menunjukkan adanya steroida triterpenoida (Harborne, 1987).

3.7 Tahap Persiapan Penelitian

3.7.1 Pembuatan Ekstrak Etanol Biji Pepaya

Sebanyak 350 gram serbuk simplisia dimasukkan ke dalam bejana tertutup dan dibasahi dengan etanol 96%, kemudian dimaserasi selama 3 jam. Massa dipindahkan sedikit demi sedikit ke dalam perkolator sambil tiap kali ditekan hati-hati, kemudian cairan penyari dituangkan secukupnya sampai cairan mulai menetes dan di atas simplisia masih terdapat selapis cairan penyari, perkolator ditutup dan dibiarkan 24 jam. Cairan dibiarkan menetes dengan kecepatan 1 ml tiap menit, cairan penyari ditambahkan berulang-ulang secukupnya dengan memasang botol cairan penyari di atas perkolator dan diatur kecepatan penetesan cairan penyari sama dengan kecepatan menetes perkolat, sehingga selalu terdapat selapis cairan penyari di atas simplisia. Perkolasi dihentikan jika perkolat yang keluar telah jernih. Perkolat yang diperoleh dipekatkan dengan alat rotary

evaporator. Kemudian dikeringkan dengan freeze dryer selama lebih kurang 24

jam dan diperoleh ekstrak kental 25,286 gram (Ditjen POM, 1979).

3.7.2 Pembuatan Diet Kuning Telur Puyuh

Pembuatan diet kuning telur puyuh dilakukan dengan cara memisahkan kuning telur puyuh dari putihnya, membuat emulsi kuning telur dengan cara mengocok perlahan, kemudian menimbang emulsi kuning telur. Diet kuning telur ditentukan sebesar 1% berat badan tikus, diberikan melalui oral sonde setiap hari selama 21 hari.

3.7.3 Pembuatan Larutan Propiltiourasil 0,1%

Sebanyak 0,1 g serbuk propiltiourasil dimasukkan kedalam erlenmeyer dan dilarutkan dengan sedikit aquades. Kemudian dimasukkan kedalam labu takar 100 ml. Volumenya dicukupkan dengan aquades hingga 100 ml.

3.7.4 Pembuatan Suspensi Simvastatin 0,01%

Sebanyak 0,5 g CMC ditaburkan dalam lumpang yang berisi 10 ml aquades panas. Didiamkan 15 menit hingga diperoleh massa yang transparan dan digerus hingga terbentuk gel. Sebanyak 10 mg simvastatin digerus dan ditambahkan larutan CMC sedikit demi sedikit sambil digerus dan diencerkan dengan sedikit air. Kemudian dimasukkan ke dalam labu takar 100 ml. Volumenya dicukupkan dengan aquades hingga 100 ml.

3.7.5 Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol Biji Pepaya 4% b/v

Sebanyak 0,5 g CMC ditaburkan dalam lumpang yang berisi 10 ml aquades panas. Didiamkan 15 menit hingga diperoleh massa yang transparan dan digerus hingga terbentuk gel. Kemudian ekstrak etanol biji pepaya sebanyak 4 g digerus dan ditambahkan larutan CMC sedikit demi sedikit sambil terus digerus hingga terbentuk suspensi. Kemudian dimasukkan ke dalam labu takar 100 ml. Volumenya dicukupkan dengan aquades hingga 100 ml.

3.8 Tahap Pengujian

3.8.1 Pemilihan dan Penyiapan Hewan Uji

Hewan uji yang digunakan adalah tikus jantan galur wistar (Rattus

novergicus) berumur 2-3 bulan dengan bobot badan 150-200 g, diaklimatisasi

dilingkungan laboratorium selama 1 minggu. Hewan uji yang digunakan sebanyak 20 ekor dan dibagi menjadi 5 kelompok.

Kelompok 1 : diberikan pakan biasa dan air minum (kontrol normal)

Kelompok 2 : diberikan kuning telur puyuh dosis 1% berat badan dan propiltiourasil dosis 9 mg/kg bb secara per oral (kontrol pembanding)

Kelompok 3 : diberikan kuning telur puyuh dosis 1% berat badan, propiltiourasil dosis 9 mg/kg bb, dan simvastatin dosis 0,9 mg/kg bb secara per oral (kontrol positif)

Kelompok 4 : diberikan kuning telur puyuh dosis 1% berat badan, propiltiourasil dosis 9 mg/kg bb, dan EEBP dosis 200 mg/kg bb secara per oral

Kelompok 5 : diberikan kuning telur puyuh dosis 1% berat badan, propiltiourasil dosis 9 mg/kg bb, dan EEBP dosis 400 mg/kg bb secara per oral.

3.8.2 Perlakuan Terhadap Hewan Uji

Sebelum perlakuan, tikus diaklimatisasi dilingkungan laboratorium selama seminggu. Penelitian menggunakan 20 tikus galur wistar yang dibagi menjadi 5 kelompok. Kelompok 1 sebagai kontrol normal, diberikan pakan biasa dan air minum. Kelompok 2 sebagai kontrol pembanding, diberikan kuning telur puyuh dosis 1% berat badan dan larutan propiltiourasil dosis 9 mg/kg bb dengan selang pemberian 1 jam. Kelompok 3 sebagai kontrol positif, diberikan kuning telur puyuh dosis 1% berat badan, larutan PTU dosis 9 mg/kg bb dengan selang pemberian 1 jam. 2 jam setelah pemberian larutan PTU, diberikan suspensi simvastatin dosis 0,9 mg/kg bb secara per oral. Kelompok 4 diberikan kuning telur puyuh dosis 1% berat badan, larutan PTU dosis 9 mg/kg bb dengan selang

pemberian 1 jam. 2 jam setelah pemberian larutan PTU, diberikan EEBP dosis 200 mg/kg bb secara per oral. Kelompok 5 diberikan kuning telur puyuh dosis 1% berat badan, larutan PTU dosis 9 mg/kg bb dengan selang pemberian 1 jam. 2 jam setelah pemberian larutan PTU, diberikan EEBP dosis 400 mg/kg bb secara per oral. Perlakuan dilakukan selama 21 hari. Pada hari ke- 22 dilakukan pengambilan darah tikus melalui ekor dengan tikus dipuasakan selama 12-24 jam sebelumnya tetapi tetap diberikan air minum (Pokja Obat bahan Alam, 1991). Darah kemudian ditampung dengan mikrotube sebanyak 1 ml, disentrifuge selama 15 menit dengan kecepatan 4000 rpm, kemudian terbentuk 2 lapisan yaitu lapisan supernatan (serum) dan endapan. Pada lapisan supernatan dilakukan pengujian pengukuran kadar profil lipid.

3.8.3 Metode Pengukuran Profil Lipid (Kolesterol Total, Trigliserida, HDL dan LDL)

3.8.3.1 Pengukuran Kadar Kolesterol Total

Kadar kolesterol ditetapkan dengan metode kolorimetri enzimatik (metode CHOD-PAP) dengan kolesterol esterase, kolesterol oksidase, dan peroksidase sebagai katalis indikator reaksi. Jumlah sampel, standar, dan reagensia kolesterol yang dibutuhkan dapat dilihat pada Tabel 3.1.

Prinsip:

Kolesterol ester + H2

Kolesterol + O

O kolesterol esterase kolesterol + asam lemak

2 kolesterol oksidase kolesten- 3- on + H2O

2 H

2

Tabel 3.1 Jumlah sampel, standar, dan reagensia kolesterol yang dibutuhkan

dalam pengukuran kadar kolesterol total

Blanko (μl) Standar (μl) Sampel (μl)

Aquabidest 10 - -

Standar - 10 -

Sampel - - 10

Reagensia kolesterol 1000 1000 1000

Serum darah dipipet dengan pipet mikro sebanyak 10 μl, dimasukkan kedalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan larutan reagensia kolesterol sebanyak 1000 μl, lalu dihomogenkan dengan menggunakan vortex, dan diinkubasi pada suhu 37ºC selama 10 menit. Diukur serapan pada panjang gelombang 546 nm terhadap blanko dalam waktu 60 menit. Sebagai blanko digunakan larutan reagensia kolesterol 1000 μl dan aquabidest 10 μl. Pengukuran serapan standar sama dengan pengukuran serapan kolesterol total, tetapi serum darah diganti dengan standar kolesterol. Kadar kolesterol total diperoleh dengan menggunakan rumus:

Dimana: C = Kadar Kolesterol total (mg/dl) A = Serapan

Cst = Kadar kolesterol standar (200 mg/dl)

3.8.3.2Pengukuran Kadar Trigliserida

Kadar trigliserida ditetapkan dengan metode kolorimetri enzimatik (metode GPO-PAP) menggunakan gliserol-3-fosfat oksidase (GPO). Jumlah sampel, standar, dan reagensia trigliserida yang dibutuhkan dapat dilihat pada Tabel 3.2.

C kolesterol total =

�������

Prinsip:

Trigliserida lipase gliserol + asam lemak Gliserol + ATP

Gliserol -3- fosfat + O

gliserol kinase gliserol -3- fosfat + ADP

2 GPO dihidroksiaseton + fosfat + H2O

2 H

2

2O2 + 4- aminoantipirin + 4- klorofenol peroksidase kuinonimin + HCl + 4

H2

Tabel 3.2 Jumlah sampel, standar dan reagensia trigliserida yang dibutuhkan

dalam pengukuran kadar trigliserida O

Blanko (μl) Standar (μl) Sampel (μl)

Standar - 10 -

Sampel - - 10

Reagensia trigliserida 1000 1000 1000

Serum darah dipipet dengan pipet mikro sebanyak 10 μl, dimasukkan kedalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan larutan reagensia trigliserida sebanyak 1000 μl, lalu dihomogenkan dengan menggunakan vortex, dan diinkubasi pada suhu 37ºC selama 10 menit. Diukur serapan pada panjang gelombang 546 nm terhadap blanko dalam waktu 60 menit. Pengukuran serapan standar dilakukan dengan cara yang sama dengan pengukuran serapan sampel. Kadar trigliserida diperoleh dengan menggunakan rumus:

Dimana: C = Kadar trigliserida (mg/dl) A = Serapan

Cst = Kadar trigliserida standar (200 mg/dl) C trigliserida =

�������

3.8.3.3Pengukuran Kadar Kolesterol HDL (High Density Lipoprotein)

Dalam pengukuran kadar kolesterol HDL, dilakukan presipitasi HDL

dengan reagen pengendapan kolesterol HDL terlebih dahulu. Jumlah sampel, standar, dan reagensia pengendapan kolesterol HDL dapat dilihat pada Tabel 3.3.

Tabel 3.3 Prosedur presipitasi HDL

Prosedur Presipitasi

Sampel/ standar 200 μl

Reagensia pengendapan 500 μl

Serum darah dipipet dengan pipet mikro sebanyak 200 μl lalu ditambahkan 500 μl larutan reagensia pengendap kolesterol-HDL, dikocok, dan dibiarkan selama 10 menit pada suhu 25ºC. Kemudian disentrifuge selama 20 menit dengan kecepatan 4000 rpm.

Kadar kolesterol HDL ditetapkan dengan metode kolorimetri enzimatik dengan menggunakan reagensia kolesterol. Jumlah sampel, standar, dan reagensia kolesterol yang dibutuhkan dapat dilihat pada Tabel 3.4.

Tabel 3.4 Jumlah sampel, standar, dan reagensia kolesterol yang dibutuhkan

dalam pengukuran kadar HDL

Blanko (μl) Standar (μl) Sampel (μl)

Aquabidest 100 - -

Standar - 100

Sampel - 100 -

Reagensia kolesterol 1000 1000 1000

Diambil 10 μl supernatan, dimasukkan kedalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan larutan reagensia kolesterol sebanyak 1000 μl, dan dihomogenkan dengan vortex. Setelah itu diinkubasi pada suhu 37ºC selama 10 menit. Diukur serapan pada panjang gelombang 546 nm terhadap blanko dalam waktu 60 menit.

Kadar kolesterol-HDL diperoleh dengan menggunakan rumus:

Dimana: C = Kadar Kolesterol-HDL (mg/dl) A = Serapan

Cst = Kadar kolesterol standar (200 mg/dl)

3.8.3.4Pengukuran Kadar Kolesterol LDL (Low Density Lipoprotein)

Kadar LDL dapat ditetapkan secara tidak langsung dengan menggunakan rumus Friedewald:

3.9 Analisis Data

Data hasil penelitian dianalisis dengan metode analisis variansi (ANOVA) dengan tingkat kepercayaan 95% dan dilanjutkan dengan uji post hoc Tukey untuk melihat perbedaan nyata antar perlakuan. Analisis statistik ini menggunakan program SPSS (Statistical Product and Service Solution) versi 15.

C kolesterol-HDL =

�������

��������x C st

LDL (mg/dl) = kolesterol total – trigliserida – kolesterol HDL

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan

Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakukan oleh Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Bogor, Indonesia, menunjukkan bahwa tumbuhan yang digunakan adalah Pepaya (Carica papaya L.), suku Caricaceae. Hasil identifikasi dapat dilihat pada Lampiran 1 halaman 69.

4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak

Pemeriksaan karakteristik biji pepaya secara makroskopik dilakukan untuk memperoleh identitas simplisia. Hasil pemeriksaan makroskopik simplisia biji pepaya adalah biji berwarna cokelat kehitaman dengan permukaan kasar, bergerigi, tebal, keras, berbentuk bulat lonjong, berukuran ± 5 – 8 mm. Gambar hasil pemeriksaan makroskopik biji pepaya dapat dilihat pada Lampiran 3 halaman 71.

Pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia secara mikroskopik dilakukan untuk memperoleh identitas simplisia. Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia secara mikroskopik terlihat adanya kutikula, jaringan epidermis, jaringan parenkim, hablur kristal oksalat bentuk prisma dan druse, berkas pembuluh (xylem), sel rambut multiselular, dan kelenjar minyak yang berisi butir-butir minyak. Gambar hasil pemeriksaan mikroskopik biji pepaya dapat dilihat pada Lampiran 4 halaman 72.

Menurut Ditjen POM b (2000), standarisasi suatu simplisia dan ekstrak adalah pemenuhan terhadap persyaratan sebagai bahan obat dan menjadi

penetapan nilai untuk berbagai parameter produk. Hasil pemeriksaan karakterisasi simplisia dan ekstrak biji pepaya terlihat pada Tabel 4.1 berikut.

Tabel 4.1 Hasil Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak Biji Pepaya

No Karakteristik Hasil Pemeriksaan (%)

Simplisia Ekstrak

1 Kadar air 7,26 9,95

2 Kadar abu total 8,74 1,62

3 Kadar abu tidak larut asam 1,07 0,25

4 Kadar sari larut dalam air 16,84 64,26

5 Kadar sari larut dalam etanol 11,01 70,85

Monografi dari simplisia biji pepaya tidak ditemukan di buku Materia Medika Indonesia (MMI), sehingga tidak ada acuan untuk menentukan parameter simplisia tersebut. Hasil penetapan kadar air simplisia dan ekstrak etanol biji pepaya diperoleh 7,26% dan 9,95%, hal ini sesuai dengan standarisasi kadar air simplisia secara umum dengan syarat yaitu tidak lebih dari 10% (Ditjen POM b

Karakterisasi simplisia lain seperti penetapan kadar abu total, penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam, penetapan kadar sari yang larut dalam etanol, dan penetapan kadar sari yang larut dalam air khusus untuk simplisia biji pepaya belum ada literatur yang mencantumkannya sehingga tidak mempunyai standarisasi.

, 1995). Penetapan kadar air dilakukan untuk memberikan batasan minimal atau rentang tentang besarnya kandungan air dalam ekstrak karena tingginya kandungan air menyebabkan ketidakstabilan sediaan obat, bakteri dan jamur cepat tumbuh dan bahan aktif yang terkandung didalamnya dapat terurai.

Penetapan kadar sari yang larut dalam air dan etanol dilakukan untuk mengetahui jumlah senyawa yang dapat tersari dalam air dan dalam etanol dari

suatu simplisia. Senyawa yang bersifat polar dan larut dalam air akan tersari oleh air. Sedangkan senyawa-senyawa yang tidak larut dalam air dan larut dalam etanol akan tersari oleh etanol.

Penetapan kadar abu dimaksudkan untuk mengetahui kandungan mineral internal yang terdapat didalam simplisia yang diteliti serta senyawa organik yang tersisa selama pembakaran.

Penetapan kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam ditetapkan untuk melihat kandungan mineral ekstrak. Zat-zat ini dapat berasal dari senyawa oksida-oksida anorganik. Kadar abu total yang tinggi menunjukkan adanya zat anorganik logam-logam (Ca, Mg, Fe, Cd dan Pb) yang sebahagian mungkin berasal dari pengotoran. Kadar logam berat yang tinggi dapat membahayakan kesehatan, oleh sebab itu perlu dilakukan penetapan kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam untuk memberikan jaminan bahwa ekstrak tidak mengandung logam berat tertentu melebihi nilai yang ditetapkan karena berbahaya (toksik) bagi kesehatan.

4.3 Hasil Skrining Fitokimia Serbuk Simplisia dan Ekstrak

Skrining fitokimia terhadap serbuk simplisia dan ekstrak etanol biji pepaya dilakukan untuk mendapatkan informasi golongan senyawa metabolit sekunder yang terdapat di dalamnya. Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol biji pepaya dapat dilihat pada Tabel 4.2.

Tabel 4.2 Hasil Skrining Fitokimia Serbuk Simplisia dan Ekstrak Biji Pepaya

No Golongan Senyawa Hasil Pemeriksaan

Simplisia Ekstrak

1 Alkaloid + +

2 Flavonoid + +

3 Tanin + +

4 Saponin + +

5 Steroid/triterpenoid + +

6 Glikosida + +

Keterangan: (+) positif : mengandung golongan senyawa (-) negatif : tidak mengandung golongan senyawa

Hasil skrining menunjukkan bahwa simplisia dan ekstrak etanol biji pepaya mengandung senyawa golongan alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, glikosida, dan steroid/triterpenoid.

4.4 Hasil Pengujian Ekstrak Etanol Biji Pepaya Terhadap Kadar Kolesterol Total pada Tikus

Pada penelitian ini, digunakan propiltiourasil sebagai penginduksi endogen dan kuning telur sebagai penginduksi eksogen dalam mempengaruhi nilai profil lipid pada tikus.

Hasil pengujian EEBP terhadap kadar kolesterol total pada tikus disajikan pada Tabel 4.3 dan grafik pada Gambar 4.1.

Tabel 4.3 Hasil rata-rata kadar kolesterol total (mg/dl) pada tikus setelah

perlakuan 21 hari

Tikus Kelompok Perlakuan

Kelompok 1 Kelompok 2 Kelompok 3 Kelompok 4 Kelompok 5

1 77 101 73 59 53

2 70 99 75 62 56

3 64 103 79 58 61

4 66 112 63 62 47

N 4 4 4 4 4

∑ 277 415 290 241 217

X 69,25 103,75 72,5 60,25 54,25

Dari Tabel 4.3 terlihat bahwa rata-rata kadar kolesterol total paling tinggi yaitu pada kelompok 2 sebesar 103,75 ± 5,7373 mg/dl, dan paling rendah pada kelompok 5 sebesar 54,25 ± 5,8523 mg/dl.

Gambar 4.1 Diagram rata-rata kadar kolesterol total (mg/dl) serum tikus setelah

perlakuan 21 hari

*Ket: Kelompok 1 : Pakan biasa + air minum

Kelompok 2 : PTU 9 mg/kg bb + kuning telur

Kelompok 3 : PTU 9 mg/kg bb + kuning telur + Simvastatin 0,9 mg/kg bb Kelompok 4 : PTU 9 mg/kg bb + kuning telur + EEBP 200 mg/kg bb Kelompok 5 : PTU 9 mg/kg bb + kuning telur + EEBP 400 mg/kg bb

Berdasarkan uji ANOVA, kadar kolesterol total pada kelompok 2 berbeda secara signifikan dibandingkan dengan kelompok 1, kelompok 3, kelompok 4, dan kelompok 5 (p < 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa pemberian propiltiourasil dan kuning telur puyuh dapat meningkatkan kadar kolesterol total pada tikus.

Dibandingkan antara kelompok 2 dengan kelompok 3 yaitu terdapat perbedaan secara signifikan dengan p = 0,000 (p < 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa pemberian simvastatin dapat menurunkan kadar kolesterol total. Menurut

69,25 103,75 72,5 60,25 _54,25 0 20 40 60 80 100 120

1 2 3 4 5

K a d ar k o le ste r o l to tal (m g/ d l) Kelompok perlakuan

Williams (2005), simvastatin dapat menurunkan kadar kolesterol total sebesar 15-40%.

Dibandingkan antara kelompok 2 dengan kelompok 4 dan kelompok 5 yaitu terdapat perbedaan secara signifikan dengan p = 0,00 (p < 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa EEBP dapat menurunkan kadar kolesterol total pada tikus.

Dibandingkan antara kelompok 3 dengan kelompok 4 dan kelompok 5 yaitu terdapat perbedaan secara signifikan dengan p = 0,044 dan p = 0,002 (p < 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa terdapat perbedaan efek yang ditimbulkan antara simvastatin dengan EEBP dalam menurunkan kadar kolesterol total pada tikus. Besarnya perbedaan efek sebanding dengan peningkatan dosis pada EEBP.

Dibandingkan antara kelompok 4 dengan kelompok 5 yaitu tidak terdapat perbedaan secara signifikan dengan p = 0,551 (p > 0,05). EEBP dosis 400 mg/kg bb tetap memberikan efek penurunan terhadap kadar kolesterol total pada tikus dengan rata-rata kadar kolesterol totalnya sebesar 54,25 ± 5,8523 mg/dl.

Propiltiourasil bekerja sebagai antitiroid yang menghambat sel-sel tiroid pada tikus sehingga produksi hormon tiroid terhambat dan mengakibatkan hipotiroidisme (Febrina, dkk., 2009). Propiltiourasil menyebabkan penurunan kadar kolesterol di hati melalui inhibisi aktivitas HMG Co-A reduktase (Rizos, et al., 2011). Inhibisi aktivitas HMG Co-A reduktase menyebabkan berkurangnya sintesis kolesterol dihati. Meskipun demikian, pada hipotiroidisme terjadi peningkatan kadar kolesterol di darah. Peningkatan ini tidak diimbangi oleh tingginya aktivitas reseptor LDL karena adanya down-regulasi (penurunan jumlah) reseptor LDL akibat inhibisi SREBP-2 (Sterol Regulatoy Element

kolesterol yang terakumulasi didarah terutama dalam bentuk LDL tidak dapat dimetabolisme di hati. Selain itu, kuning telur puyuh memiliki kandungan kolesterol yang paling tinggi dibandingkan dengan kuning telur unggas lain yaitu sebesar 2139,17 mg/100 g sehingga mampu meningkatkan kadar kolesterol (Dwiloka, 2003).

Penurunan kadar kolesterol total disebabkan kandungan senyawa berupa flavonoid, tanin, dan saponin yang ada pada EEBP. Flavonoid diketahui dapat menurunkan kadar kolesterol total karena merupakan kofaktor dari enzim kolesterol esterase. Selain itu, flavonoid dapat meningkatkan sekresi getah empedu melalui pengaktifan enzim sitokrom P-450. Enzim sitokrom P-450 mengikat beberapa komponen dalam getah empedu sehingga mengurangi kadar kolesterol didalam tubuh (Oliveira, et al., 2007). Saponin dalam EEBP membentuk kompleks tidak larut dengan kolesterol sehingga mencegah absorbsi kolesterol di usus halus. Selain itu saponin mengurangi absorbsi getah empedu dengan membentuk kompleks misel yang tidak dapat diabsorbsi karena berat molekulnya terlalu besar (Matsui, et al., 2009). Sedangkan tanin dalam EEBP dapat mengurangi absorbsi kolesterol di usus halus dan meningkatkan sekresi asam empedu dengan mekanisme yang sama seperti saponin serta dapat meningkatkan reverse cholesterol transport (Tebib, et al., 1994).

4.5 Hasil Pengujian Ekstrak Etanol Biji Pepaya Terhadap Kadar

Trigliserida pada Tikus

Hasil pengujian EEBP terhadap kadar trigliserida pada tikus disajikan pada Tabel 4.4 dan grafik pada Gambar 4.2.

Tabel 4.4 Hasil rata-rata kadar trigliserida (mg/dl) serum tikus setelah perlakuan

21 hari

Tikus Kelompok Perlakuan

Kelompok 1 Kelompok 2 Kelompok 3 Kelompok 4 Kelompok 5

1 90 84 69 77 53

2 87 81 74 73 55

3 71 82 74 73 56

4 87 82 70 69 53

N 4 4 4 4 4

∑ 335 329 287 292 217

X 83,75 82,25 71,75 73 54,25

SD 8,6168 1,2583 2,6299 3,2659 1,5

Dari Tabel 4.4 terlihat bahwa rata-rata kadar trigliserida paling tinggi yaitu pada kelompok 1, sebesar 83,75 ± 8,6168 mg/dl, dan paling rendah pada kelompok 5, sebesar 54,25 ± 1,5 mg/dl.

Gambar 4.2 Diagram rata-rata kadar trigliserida (mg/dl) serum tikus setelah

perlakuan 21 hari

*Ket: Kelompok 1 : Pakan biasa + air minum

Kelompok 2 : PTU 9 mg/kg bb + kuning telur

Kelompok 3 : PTU 9 mg/kg bb + kuning telur + Simvastatin 0,9 mg/kg bb Kelompok 4 : PTU 9 mg/kg bb + kuning telur + EEBP 200 mg/kg bb Kelompok 5 : PTU 9 mg/kg bb + kuning telur + EEBP 400 mg/kg bb

83,75 82,25 71,75 73 54,25 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

1 2 3 4 5

K ad ar tr igl is e r id a (m g/ d l) Kelompok perlakuan

Berdasarkan uji ANOVA, kadar trigliserida kelompok 2 tidak berbeda secara signifikan dengan kelompok 1, hal ini menunjukkan bahwa propiltiourasil dan kuning telur tidak dapat meningkatkan kadar trigliserida.

Dibandingkan antara kelompok 2 dengan kelompok 3 yaitu terdapat perbedaan secara signifikan dengan p = 0,028 (p < 0,05). Pemberian simvastatin dapat menurunkan kadar trigliserida dalam darah sebesar 10 - 30% (Anderson, et al., 2002).

Dibandingkan antara kelompok 2 dengan kelompok 4 yaitu tidak terdapat perbedaan secara signifikan terhadap kadar trigliserida pada tikus dengan p = 0,060 (p > 0,05). Dibandingkan antara kelompok 2 dengan kelompok 5 yaitu terdapat perbedaan secara signifikan dengan p = 0,000 (p < 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa EEBP dosis 400 mg/kg bb dapat menurunkan kadar trigliserida secara bermakna.

Dibandingkan antara kelompok 3 dengan kelompok 4 yaitu tidak terdapat perbedaan secara signifikan dengan p = 0,994 (p < 0,05). Dibandingkan antara kelompok 3 dengan kelompok 5 yaitu terdapat perbedaan secara signifikan dengan p = 0,000 (p < 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa EEBP dosis 400 mg/kg bb memberikan efek yang lebih besar dibandingkan dengan simvastatin dalam menurunkan kadar trigliserida pada tikus.

Menurut Canaris, et al., (2000), pemberian propiltiourasil tidak memberikan efek yang bermakna dalam meningkatkan kadar trigliserida. Selain itu, pemberian kuning telur puyuh juga tidak dapat meningkatkan kadar trigliserida (Dwiloka, 2003), karena kandungan kolesterol yang terdapat dalam telur puyuh hanya berpengaruh pada kadar kolesterol tikus, sementara kadar

trigliseridanya dipengaruhi oleh asupan lemak dan karbohidrat pada makanan (Murray, dkk., 2006).

Penurunan kadar trigliserida disebabkan oleh kandungan senyawa flavonoid, tanin, dan saponin pada EEBP. Flavonoid dan tanin dapat meningkatkan aktivitas lipoprotein lipase (LPL) sehingga meningkatkan hidrolisis trigliserida menjadi asam lemak dan gliserol, sehingga kadar trigliserida dalam darah menurun (Wahyuningrum, 2012; Millind dan Gurditta; Kothari, et al., 2011). Saponin dapat menurunkan sintesis trigliserida dan absorbsi asam lemak serta meningkatkan oksidasi asam lemak (Elekofehinti, et al., 2012; Zhao, et al., 2005).

4.6 Hasil Pengujian Ekstrak Etanol Biji Pepaya Terhadap Kadar HDL pada Tikus

Hasil pengujian EEBP terhadap kadar HDL pada tikus disajikan pada Tabel 4.5 dan grafik pada Gambar 4.3.

Tabel 4.5 Hasil rata-rata kadar HDL (mg/dl) serum tikus setelah perlakuan 21

hari

Tikus Kelompok Perlakuan

Kelompok 1 Kelompok 2 Kelompok 3 Kelompok 4 Kelompok 5

1 52 38 58 42 36

2 50 35 52 40 40

3 46 39 58 38 43

4 42 34 46 44 33

N 4 4 4 4 4

∑ 190 146 214 164 152

X 47,5 36,5 53,5 41 38

3.1.2 Bahan Penelitian ... 30

3.1.3 Komposisi Reagensia pada Pengukuran Kadar Profil Lipid pada serum ... 30

3.2 Hewan Penelitian ... 30

3.3 Penyiapan Bahan Tumbuhan ... 31

3.3.1 Pengumpulan Bahan Tumbuhan ... 31

3.3.2 Identifikasi Tumbuhan ... 31

3.3.3 Pembuatan Simplisia Biji Pepaya ... 31

3.4 Pembuatan Pereaksi ... 32

3.4.1 Pereaksi Mayer ... 32

3.4.2 Pereaksi Dragendorff ... 32

3.4.3 Pereaksi Bouchardat ... 32

3.4.4 Pereaksi Molisch ... 32

3.4.5 Pereaksi Asam Klorida 2 N ... 32

3.4.6 Pereaksi Asam Sulfat 2 N ... ... 33

3.4.7 Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N ... 33

3.4.8 Pereaksi Timbal (II) Asetat 0,4 M ... 33

3.4.9 Pereaksi Besi (III) Klorida 1% ... 33

3.4.10 Pereaksi Liebermann-Burchard ... 33

3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia dan Ekstrak ... 33

3.5.1 Pemeriksaan Makroskopik ... 34

3.5.2 Pemeriksaan Mikroskopik ... 34

3.5.3 Penetapan Kadar Air ... 34

3.5.4 Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air ... 35

3.5.6 Penetapan Kadar Abu Total ... 35

3.5.7 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam ... 36

3.6 Skrining Fitokimia Serbuk Simplisia dan Ekstrak ... 36

3.6.1 Pemeriksaan Alkaloida ... 36

3.6.2 Pemeriksaan Flavonoida ... ... 37

3.6.3 Pemeriksaan Tanin ... 37

3.6.4 Pemeriksaan Glikosida ... 38

3.6.5 Pemeriksaan Saponin ... 38

3.6.6 Pemeriksaan Steroida/Triterpenoida ... 38

3.7 Tahap Persiapan Penelitian ... 39

3.7.1 Pembuatan Ekstrak Etanol Biji Pepaya ... 39

3.7.2 Pembuatan Diet Kuning Telur ... 39

3.7.3 Pembuatan Larutan Propiltiourasil 0,1% ... 40

3.7.4 Pembuatan Suspensi Simvastatin 0,01% ... 40

3.7.5 Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol Biji Pepaya 4% b/v 40 3.8 Tahap Pengujian ... 40

3.8.1 Pemilihan dan Penyiapan Hewan Uji ... 40

3.8.2 Perlakuan Terhadap Hewan Uji ... 41

3.8.3 Metode Pengukuran profil lipid serum ( Kolesterol Total, trigliserida, HDL, dan LDL) ... 42

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 47

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 47

4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak ... 47

4.3 Hasil Skrining Serbuk Simplisia dan Ekstrak ... 49

4.4 Hasil Pengujian Ekstrak Etanol Biji Pepaya Terhadap Kadar Kolesterol Total pada Tikus ... 50

4.5 Hasil Pengujian Ekstrak Etanol Biji Pepaya Terhadap Kadar Trigliserida pada Tikus ... 53

4.6 Hasil Pengujian Ekstrak Etanol Biji pepaya Terhadap Kadar HDL pada Tikus ... 56

4.7 Hasil Pengujian Ekstrak Etanol Biji Pepaya Terhadap Kadar LDL pada Tikus ... 58

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 61

5.1 Kesimpulan ... 61

5.2 Saran ... 63

DAFTAR PUSTAKA ... 64

DAFTAR TABEL

Halaman Tabel 2.1 Kandungan Protein dan Lemak pada Beberapa Ternak Unggas 16 Tabel 2.2 Karakteristik Lipoprotein Plasma ... 19 Tabel 2.3 Jenis-Jenis Apolipoprotein ... 22 Tabel 2.4 Kadar Lipid Serum Normal ... 28 Tabel 3.1 Jumlah Sampel, Standar, dan Reagensia Kolesterol yang

dibutuhkan dalam Pengukuran Kadar Kolesterol Total ... 43 Tabel 3.2 Jumlah Sampel, Standar dan Reagensia Trigliserida yang

dibutuhkan dalam Pengukuran Kadar Trigliserida ... 44 Tabel 3.3 Prosedur Presipitasi HDL ... 45 Tabel 3.4 Jumlah Sampel, Standar, dan Reagensia Kolesterol yang

dibutuhkan dalam Pengukuran Kadar HDL ... 45 Tabel 4.1 Hasil Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak Etanol Biji Pepaya 48 Tabel 4.2 Hasil Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak Etanol Biji

Pepaya ... 50 Tabel 4.3 Hasil Rata-Rata Kadar Kolesterol Total (mg/dl) pada Tikus

Setelah Perlakuan 21 Hari ... 50 Tabel 4.4 Hasil Rata-Rata Kadar Trigliserida (mg/dl) Serum Tikus

Setelah Perlakuan 21 Hari ... 54 Tabel 4.5 Hasil Rata-Rata Kadar HDL (High Density Lipoprotein)

(mg/dl) Serum Tikus Setelah Perlakua n 21 Hari ... 56 Tabel 4.6 Hasil Rata-Rata Kadar LDL (Low Density Lipoprotein)

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1.1 Diagram Kerangka Pikir Penelitian ... 6

Gambar 2.1 Struktur Propiltiourasil ... 13

Gambar 2.2 Efek Hormon Tiroid pada Metabolisme Lipid ... 14

Gambar 2.3 Struktur Simvastatin ... 15

Gambar 2.4 Struktur Lipoprotein ... 19

Gambar 2.5 Jalur Biosintesis Kolesterol ... 23

Gambar 4.1 Diagram Rata-Rata Kadar Kolesterol Total (mg/dl) Serum Tikus Setelah Perlakuan 21 Hari ... 51

Gambar 4.2 Diagram Rata-Rata Kadar Trigliserida (mg/dl) Serum Tikus Setelah Perlakuan 21 Hari ... 54

Gambar 4.3 Diagram Rata-Rata Kadar HDL (High Density Lipoprotein) (mg/dl) Serum Tikus Setelah Perlakuan 21 Hari ... 57

Gambar 4.4 Diagram Rata-Rata Kadar LDL (Low Density Lipoprotein) (mg/dl) Serum Tikus Setelah Perlakuan 21 Hari ... 59

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 69

Lampiran 2. Tumbuhan Pepaya (Carica papaya L.) ... 70

Lampiran 3. Karakteristik Biji Pepaya ... 71

Lampiran 4. Hasil Pemeriksaan Mikroskopik Serbuk Simplisia Biji Pepaya ... 72

Lampiran 5. Bagan Pembuatan, Skrining Fitokimia dan Karakterisasi Serbuk Simplisia ... 73

Lampiran 6. Bagan Pembuatan, Skrining Fitokimia dan Karakterisasi Ekstrak ... 74

Lampiran 7. Bagan Kerja Pengujian Ekstrak Etanol Biji Pepaya ... 75

Lampiran 8. Bagan Kerja Pengambilan Darah Tikus ... 76

Lampiran 9. Bagan Kerja Pengukuran Kadar Kolesterol Total ... 77

Lampiran 10. Bagan Kerja Pengukuran Kadar Trigliserida ... 78

Lampiran 11. Bagan Kerja Pengukuran Kadar High Density Lipoprotein (HDL) ... 79

Lampiran 12. Perhitungan Hasil Pemeriksaan Karakteristisasi Simplisia Biji Pepaya ... 80

Lampiran 13. Perhitungan Hasil Pemeriksaan Karakteristisasi Ekstrak Etanol Biji Pepaya ... 85

Lampiran 14. Contoh Perhitungan Dosis ... 90

Lampiran 15. Data Hasil Pengukuran Profil Lipid pada Tikus ... 93