1. Home
  2. Ilmu pengetahuan

Waktu dan Tempat Alat dan Bahan Isolat Virus

BAB 3 BAHAN DAN METODE

3.1 Waktu dan Tempat

Penelitian ini dilaksanakan mulai bulan Januari 2011 sampai bulan April 2011 di Laboratorium Biologi Molekuler Balai Karantina Ikan kelas I Polonia, Medan dan di Laboratorium Patologi Anatomi dan Laboratorium Biokimia Balai Penyidikan dan Pengujian Veteriner Regional I Medan.

3.2 Alat dan Bahan

Adapun alat yang dipakai adalah akuarium 60x 40x 40 cm 3 , aeratorfilter air, alat diagnosis Polymerase Chain Reaction PCR, alat diagnosis hematologi, alat diagnosis histopatologi, termometer glass panjang, refraktometer, pH meterkertas lakmus, dissecting set, jarum suntik 1 ml, parafilm, sarung tangan dan masker, serokan ikantanggok, ember, dan kamera digital Canon Power Shot A560. Adapun bahan yang dipakai adalah kerapu macan Epinephelus fuscoguttatus dengan ukuran panjang ±10 cm, sebanyak 290 ekor, inokulum baku virus positif VNN, air laut, larutan Hanks Balanced Salt Solution HBSS, formalin 10, garam non yodium, bahan-bahan pemeriksaan PCR, kit VNN IQ 2000 lengkap 1 set, bahan-bahan pemeriksaan histopatologi, bahan-bahan pemeriksaan hematologi, anti koagulan EDTA. Universitas Sumatera Utara

3.3 Isolat Virus

Isolat virus berasal dari Dr. Uun Yanuhar Universitas Brawijaya-Malang. Ikan kerapu positif VNN hasil diagnosis PCR, organnya diambil untuk digunakan sebagai bahan suspensi organ 10. Ekstraksi virus dilakukan dengan metode Malole et al. 2006 yaitu dengan cara menggerus mata atau otak ikan dengan mortar dan ditambahkan larutan NaCl fisiologis, sehingga menghasilkan konsentrat virus 10. Pada pelaksanaan penggerusan ini, mortar dan larutan NaCl fisiologis dalam kondisi dingin. Hasil gerusan yang telah halus, disentrifugasi pada 3000 rpm selama 15 menit dengan temperatur 5 °C. Supernatan diambil dengan syringe kemudian disaring dengan kertas saring miliphore 0,45 µ m. Hasil saringan ini merupakan inokulan baku virus VNN. Untuk keperluan selama penelitian bahan inokulan virus ini kemudian diawetkan dalam deep freezer suhu -40 °C. Inokulan baku tersebut ditambahkan antibiotik Penicillin 10.000 IU dan Streptomicyn 10.000 µg tiap mililiter suspensi. Untuk menghindari adanya kuman, inkubasi selama 30 menit pada temperatur ruang.

3.4 Uji Fish Infectious Dosage 50 FID

Dokumen yang terkait

Pengaruh Salinitas Terhadap Prevalensi Ektoparasit Pada Ikan Kerapu Macan (Epinephelus fuscoguttatus)

3 106 53

Pengaruh pH Air Terhadap Tingkat Patogenitas Viral Nervous Necrosis Pada Benih Ikan Kerapu Macan (Epinephelus fuscoguttatus)

1 53 71

Infestasi Ektoparasit Pada Kerapu Macan (Epinephelus fuscoguttatus) Di Lingkungan Budidaya Ikan Sistem Race-Way Water

2 36 112

Peranan Rumput Laut (Gracilaria verrucosa) Dalam Menjaga Kualitas Air Pada Karamba Jaring Apung Kerapu Macan (Epinephelus fuscoguttatus)

5 65 87

ANALISIS KESESUAIAN PERAIRAN PULAU MAITAM UNTUK BUDIDAYA IKAN KERAPU MACAN (Epinephelus fuscoguttatus)

7 47 42

Seleksi bakteri probiotik untuk pengendalian penyakit vibriosis pada ikan kerapu macan (Epinephelus fuscoguttatus)

0 8 140

Kelangsungan Hidup dan Pertumbuhan Benih Ikan Kerapu Macan Epinephelus fuscoguttatus pada Padat Tebar Berbeda dalam Pendederan Sistem Resirkulasi

0 9 123

Respons Penciuman Ikan Kerapu Macan (Epinephelus fuscoguttatus) terhadap Umpan Buatan

4 36 137

Immunocytochemistry Streptavidin Biotin: Early Detection of Viral Nervous Necrosis Virus in the mucous of the Ikan Kerapu Macan(Epinephelus fuscoguttatus) | Sudaryatma | Jurnal Sain Veteriner 2487 4226 1 SM

0 2 14

B9 RESPONS PENGLIHATAN DAN PENCIUMAN IKAN KERAPU MACAN (Epinephelus fuscoguttatus) TERHADAP UMPAN BUATAN

0 0 16