Tempat dan Waktu Penelitian Alat dan Bahan

BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini telah dilaksanakan pada bulan Februari sampai dengan Agustus 2013 di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam FMIPA Biologi Universitas Sumatera Utara USU dan Laboratorium Biologi Balai Teknis Kesehatan Lingkungan dan Pemberantasan Penyakit Menular BTKL dan PPM Medan.

3.2 Alat dan Bahan

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini ialah pliek u tahap I, II dan III yang sudah berumur 2 hari yang diperoleh dari industri rumah tangga yang berlokasi di Desa Geundering Kecamatan Darul Imarah, Aceh Besar. Pliek u tersebut dibuat melalui 3 tahapan berdasarkan penelitian Nurliana 2009, namun setiap tahapan masing-masing dilakukan selama 4 hari. Medium untuk isolasi, identifikasi, uji antagonis serta uji biokimia lainnya terdiri dari medium de man rogosa sharpe agar MRSA, nutrient broth NB, triple sugar iron agar TSIA, sulfide indole motility SIM dan mueller hinton agar MHA, melacyt green, media agar susu skim, media garam minimum kitin MGMK, starch agar SA. Komposisi dan cara pembuatan media MGMK dan susu skim dapat dilihat pada Lampiran C. Bahan untuk pewarnaan Gram ialah kristal violet, akuades, lugol, alkohol 95, dan safranin. Kultur mikroorganisme uji yang digunakan ialah E. coli ATCC 25922, Staph. aureus ATCC 25923, dan isolat klinis C. albicans yang diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran USU. Larutan Universitas Sumatera Utara acetate buffer pH 3.5, pH 4, pH 4.5, pH 5, pH 5,5, dan phosphate buffer pH 6, pH 6.5, pH 7, pH 7.5, dan pH 8. Pembuatan buffer dapat dilihat pada Lampiran D. Alat-alat yang digunakan terdiri dari jarum ose, labu erlenmeyer, silinder ukur, gelas kimia, cawan petri, tabung reaksi, rak tabung, pipet serologi ukuran 0.1 ml, 1 ml, dan 10 ml, propipet, corong, kaca benda, bunsen, autoklaf STURDY SA-300VF, blank disc OXOID, mikroskop OLYMPUS, timbangan digital OHAUS, lemari pendingin DENPOO, oven MEMMERT, BR-2000 vortexer BIO-RAD, hot plate stirrer LabTech, inkubator LabTech dan Laminar Air Flow ESCO, cary 50 uv- visible spectrophotometer VARIAN Inc., mechanical hand counter, dan sentrifus SORVALL Biofuge Primo R.

3.3 Metode Penelitian