Penelitian Utama 1 Pengukuran Kurva Pertumbuhan Bakteri Kultivasi Sel Cell Dry Weight CDW

38 Optimasi waktu inkubasi 5,6 hari, temperatur inkubasi 37 C untuk bakteri strain terpilih yang diinokulasikan pada media RANUT dengan penyaringan pada kertas saring 48 mm dengan nutrisi tambahan 1,5 g ekstrak sapi, 2,5 g pepton, 0,5 g yeast ekstrak, dan 1 g glukosa. 3.3.2. Penelitian Utama 3.3.2.1 Pengukuran Kurva Pertumbuhan Bakteri 2 liter larutan nutrient broth 6 g ekstrak sapi, 10 g pepton dan 2 liter aquadest yang sudah disterilisasi pada suhu 121 C diinokulasikan kedalamnya bakteri L 1 3 1 kemudian diinkubasikan pada suhu ±30 C dan diaduk dengan menggunakan magnetik bar. Diambil sebanyak 2 ml, dimasukkan ke dalam kuvet untuk diukur absorbansinya pada panjang gelombang 486 nm setiap 12 jam. Dibuat kurva pertumbuhannya. Diukur juga berat sel keringnya dengan mengambil 50 ml dan ditimbang berat sel basah, kemudian dioven pada suhu 105 C, disimpan dalam desikator kemudian ditimbang berat selnya, dihitung berat sel kering dan dibuat kurvanya. Dilakukan hal yang sama untuk limbah RANUT tanpa sterilisasi dan pada panjang gelombang 646 nm. 3.3.2.2 Optimasi Media Biakan dan Kondisi Strain yang terpilih kemudian dibiakkan dengan cara diinokulasikan dalam media LCPKS dari keluaran Ranut dan ditambahkan nutrisi yang sama dengan media Universitas Sumatera Utara 39 sintetik yaitu 3 g ekstrak sapi, 5 g pepton, 1 g yeast ekstrak, dan glukosa yang divariasikan 2, 3, 5, 7,8 g per liter media biakan pengembangan dari metode yang digunakan Das, dkk, 2005, pH diatur tetap 7 dengan penambahan NaOH 0,1N, temperatur inkubasi 25, 27, 30, 33, 35 C , variasi waktu inkubasi 2, 3, 5, 7, 8 hari. Dilakukan analisa berat CDW, PHA, kadar TSS dan kadar COD setelah pemanenan.

3.3.3 Kultivasi Sel Cell Dry Weight CDW

Setelah diinkubasi, sel dipanen dengan cara disentrifugasi pada 9000 rpm selama 12 menit, kemudian dicuci dengan air destilasi steril dan disentrifugasi kembali, lalu sel basah yang diperoleh ditimbang kemudian dikeringkan di atas penangas air selanjutnya disimpan dalam desikator sampai berat konstan untuk kemudian ditimbang Pengembangan metode Clowes dan Hayes, 1968. Berat CDW ditentukan dengan penimbangan, dihitung sebagai berikut: CDW = W 1 = Berat cawan kosong beserta tutup gram W 2 = Berat cawan + sel basah gram W 3 = Berat cawan + sel kering setelah dioven pada suhu 105 o C gram Universitas Sumatera Utara 40

3.3.4 Pengekstraksian dan Purifikasi Polimer PHA