24
BAB III METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental dengan rancangan penelitian eksperimental murni. Penelitian ini termasuk penelitian eksperimental
karena ada perlakuan terhadap sampel uji yaitu pembedaan cara ekstraksi dan variasi jenis serta komposisi fase gerak pada pemisahan secara KLTKT. Rancangan
penelitian bersifat eksperimental murni karena ada randomisasi saat pengambilan sampel.
B. Variabel Penelitian
1. Variabel bebas dalam penelitian ini adalah cara ekstraksi biji kopi serta jenis
dan komposisi fase gerak yang akan dioptimasi. 2.
Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah pemisahan asam kafeat hasil hidrolisis ekstrak air seduhan biji kopi yang dilihat dari bentuk puncak, nilai
faktor asimetris A
s
, nilai R
f,
dan KV. 3.
Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini: a.
Kemurnian pelarut, digunakan pelarut pro analysis yang memiliki kemurnian tinggi.
b. Ketidakstabilan larutan baku asam kafeat, pembuatan larutan baku yang
selalu baru setiap dilakukan penelitian.
C. Definisi Operasional
1. Asam kafeat merupakan salah satu senyawa polifenol hasil hidrolisis ekstrak
biji kopi arabika. 2.
Sistem KLTKT yang digunakan adalah seperangkat alat KLTKT normal dengan fase diam Silica Gel 60 F
254
dengan fase gerak digunakan yaitu toluen: etil asetat : asam format
Rastogi et al., 2008 dengan perbandingan
yang optimum hasil optimasi. 3.
Hidrolisis yang dilakukan berupa penambahan larutan NaOH pada larutan sampel untuk mengurai asam klorogenat di dalam ekstrak biji kopi menjadi
asam kafeat dan asam ferulat agar asam kafeat dapat terdeteksi. 4.
Densitometri merupakan pendeteksian substansi yang terpisah pada lempeng KLT dengan mengukur kerapatan bercak yang terpisah tersebut.
5. Optimasi pemisahan asam kafeat dilakukan dengan mengubah-ubah metode
ekstraksi kopi serta jenis dan perbandingan komposisi fase gerak. 6.
Parameter pemisahan yang optimum pada metode KLTKT-Densitometri adalah bentuk puncak peak yang dilihat dari nilai faktor retardasi R
f ;
nilai faktor asimetris A
s
; dan nilai KV.
D. Bahan Penelitian
Kategori