14
1. Pembuatan Ekstrak Teh Awal
Teh hitam diblender kering sampai menghasilkan partikel halus 30 mesh yang homogen. Konsentrasi teh hitam dibuat sama, yaitu 0.02 gml 2 gram teh dilarutkan dengan 100 ml air. Teh
diseduh dengan kombinasi suhu dan waktu penyeduhan yang berbeda. Suhu awal air yang digunakan untuk menyeduh yaitu 70
o
C, 85
o
C, dan 100
o
C, sedangkan waktu penyeduhan yaitu, 5, 10, dan 15 menit. Larutan teh tersebut disaring dengan kain saring batis 2 lapis, disentrifus pada 3500 selama 10 menit,
dan disaring kembali dengan penyaringan vakum menggunakan kertas saring Whatman No. 41. Volume ekstrak kemudian ditepatkan ke volume awal 100 ml dengan penambahan akuades. Diagram alir
proses ekstraksi teh hitam dapat dilihat pada Gambar 9.
Gambar 9. Diagram alir proses ekstraksi teh hitam
2. Pengujian Pengaruh Simulasi pH Pencernaan In Vitro
Pada pengujian ini, ekstrak teh akan melalui proses simulasi pencernaan secara in vitro dengan mengubah nilai pH sesuai dengan pH saluran pencernaan, yaitu lambung dan usus halus. Ekstrak teh
awal pertama-tama diukur pH nya sehingga didapat pH ekstrak awal. Kemudian ekstrak diubah pH nya sesuai pH lambung yaitu pH 2 dengan menggunakan kurang lebih 3 hingga 4 pipet tetes HCl 11.98 N
dan didiamkan selama 30 menit. Setelah itu, pH ekstrak diubah kembali mengikuti pH usus halus, yaitu 6.8 dengan penambahan NaOH 10 N ± 10-11 tetes.
3. Analisis
a.
Total Fenol Metode Folin Ciocalteu
Analisis total polifenol dilakukan mengikuti prosedur Strycharz dan Shetty 2002 dengan modifikasi sesuai Zega 2010. Standar yang digunakan adalah asam galat yang merupakan salah satu
senyawa asam fenolat terbanyak dalam teh. Prinsip dari metode ini adalah reduksi dari reagen fosfomolibdat MoO
4 2-
dan fosfotungtat WO
4 2-
oleh komponen fenol sehingga terbentuk kompleks 2 gram teh hitam diseduh dengan 100 ml
air bersuhu awal 70
o
, 85
o
, atau 100
o
C Penyeduhan selama 5, 10, dan 15 menit
Penyaringan dengan kain saring Sentrifuse 3500 rpm 10 menit
Penyaringan dengan penyaring vakum Penepatan volume sampai 100 ml dengan
akuades Ekstrak teh hitam
Kategori