proses saponifikasi, ekstraksi, pemekatan dan melarutkan kembali menggunakan pelarut yang sesuai.
2.5 INTRUMENTASI KCKT
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi atau KCKT atau biasa juga disebut dengan HPLC High Performance Liquid Chromatography merupakan teknik
pemisahan yang diterima secara luas untuk analisis dan pemurnian senyawa tertentu dalam suatu sampel. Kegunaan umum KCKT adalah untuk pemisahan
senyawa organik, anorganik, maupun senyawa biologis. KCKT merupakan metode yang tidak destruktif dan dapat digunakan baik untuk analisis kuali-
tatif maupun kuantitatif Rohman 2007. Kromatografi adalah suatu prosedur pemisahan zat terlarut oleh suatu
proses migrasi difrensial dinamis dalam sistem yang terdiri dari dua fase atau lebih, salah satu diantaranya bergerak secara berkesinambungan dalam arah
tertentu dan di dalam zat tersebut menunjukkan perbedaan morbilitas disebab- kan adanya perbedaan dalam adsorbsi, partisi, kelarutan, tekanan uap, ukuran
molekul atau kerapatan muatan ion Depkes 2009
b
Instrumentasi KCKT pada dasarnya terdiri atas komponen pokok yaitu wadah fase gerak, sistem penghantaran fase gerak, alat untuk memasukkan
sampel kolom, detektor, wadah penampung buangan fase gerak, tabung peng- hubung dan suatu komputer atau integrator atau perekam Johnson, 1991.
Diagram blok untuk sistem kromatografi cair kinerja tinggi ditunjukkan pada Gambar 2.
2.5 I I
I INTR
d d
d deng
p pe
pe e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
mi m
mi mi
mi mi
mi mi
mi mi
mi mi
mi mi
mi m
m m
mi mi
mi mi
mi mi
mi mi
mi m
m m
mi mi
m m
m mi
mi mi
i mi
mi mi
m mi
mi mi
m m
i mi
m m
m mi
mi m
mi m
m mi
i mi
mi mi
m mi
i i
mi i
i mi
m m
i m
m m
m m
mi mi
mi m
m m
m m
m m
i m
m m
t e
e e
rt rt
rt rt
rt r
rt rt
t rt
rt t
rt rt
t rt
rt rt
rt t
rt t
rt rt
rt t
t rt
t rt
rt t
t t
t rt
r rt
t rt
r rt
rt t
t rt
t t
r t
t t
r r
rt t
t rt
rt t
r rt
t t
r t
rt rt
r t
t rt
t t
t t
r t
t t
rt rt
t t
t r
r r
rt r
rt t
r t
r t
rt t
t r
t t
t t
r r
t t
t e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e n
s s
se e
e ny
ny n
n ny
ny ny
ny ny
n ny
ny ny
ny ny
ny ny
ny ny
ny ny
ny ny
ny ny
n n
n ny
ny n
y n
n ny
ny ny
ny y
n n
ny n
n ny
ny ny
n n
ny ny
n ny
ny ny
ny y
y n
n n
ny y
y ny
n y
y y
y y
ny ny
n y
y n
ny y
y ny
ny y
y y
y y
y y
y y
a m
m me
me e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
t t
t t
t t
t to
to t
t t
t t
to t
t t
t t
t t
t t
t t
t t
t t
t to
t t
t t
t t
t t
t t
t t
t t
t t
t t
t t
t t
t t
t t
t t
t t
a a
a ti
ti ti
ti ti
ti t
ti i
t ti
i i
i ti
t i
ti i
ti ti
i ti
i t
i t
t t
t i
i i
i i
i i
ti i
i i
i i
i i
i i
i i
i i
i i
i i
i i
i i
i i
i i
t i
i i
i i
i i
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f f
f ff
f f
f f
f f
f f
f f
f m
p pr
pr r
os os
os os
os os
o o
os os
os os
os os
os os
o os
o o
o os
o o
o o
o o
os o
o o
o os
o o
o o
o o
o o
o os
s o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o os
o o
o o
s o
o o
o o
o s
o o
o o
s o
o s
o s
s e
le e
e e
bi bi
bi bi
bi bi
bi b
b bi
bi bi
bi bi
b b
b bi
i i
bi bi
b bi
b b
bi bi
i i
bi b
bi bi
bi i
bi b
i i
b bi
bi bi
bi bi
b bi
bi bi
bi i
bi b
b b
b b
bi b
b bi
b bi
b b
bi bi
b b
b i
i b
i i
b b
bi i
i bi
i bi
i i
i b
b bi
i i
i i
bi b
b b
i h
h h
h h
h h
h h
h h
h h
h h
h h
h h
t e
e e
rt rt
rt rt
rt rt
rt t
t t
t t
t rt
t t
t t
t t
t rt
rt t
rt t
rt t
t t
t t
rt rt
rt t
rt t
t rt
t t
t t
rt rt
t t
t t
t t
t rt
rt t
r rt
t t
rt t
t t
t t
rt t
t rt
t t
t r
t t
t rt
t t
t t
rt t
t rt
t t
t t
rt rt
rt r
t r
t t
t t
t t
t t
t t
e e
en e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
e e
k k
ka ka
a a
a n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
n n
a m
m mo
mo o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o o
o le
le le
le le
le e
l l
e e
l l
l e
l l
l l
l l
l l
l l
l l
l l
l l
l l
l l
l l
e l
e l
l l
l e
l l
l e
l l
l l
l l
e l
l
w w
w wada
s s
s amp
h h
h hubu
D D
D Diagr
G G
G Gam
Gambar 2. Diagram Blok Sistem KCKT
2.5.1 Wadah Fase Gerak pada KCKT
Wadah fase gerak harus bersih dan lembam inert. Wadah ini biasanya dapat menampung fase gerak antara 1 sampai 2 liter pelarut.
Fase gerak sebelum digunakan harus dilakukan degassing penghilang gas yang ada pada fase gerak, sebab adanya gas akan berkumpul
dengan komponen lain terutama di pompa dan detektor sehingga akan mengacaukan analisis.
2.5.2 Fase Gerak Pada KCKT
Fase gerak atau eluen biasanya terdiri atas campuran pelarut yang dapat bercampur yang secara keseluruhan berperan dalam daya
elusi dan resolusi. Daya elusi dan resolusi ini ditentukan oleh polaritas keseluruhan pelarut, polaritas fase diam dan sifat komponen-kompo-
nen sampel. Untuk fase normal fase diam lebih polar daripada fase
Kategori