mengge lontor sampel ke kolom. Presisi penyuntikan dengan keluk sampel ini dapat mencapai nilai RSD 0,1.
2.5.5 Kolom Pada KCKT
Kolom KCKT pada umumnya terbuat dari pipa baja tahan karat. Panjang kolom antara 10-30 cm dengan diameter dalam 4,5-5,0 mm.
Kolom diisi dengan yang sesuai untuk pemisahan sampel tertentu. Kolom untuk pemisahan analitik umumnya mempunyai diameter
dalam 2-4 mm. Kolom dapat dipanaskan sampai 60
o
C agar dihasilkan pemisahan yang lebih efisien. Jika tidak dinyatakan lain, kolom
dipertahankan pada suhu kamar. Fase diam pada KCKT berupa silika yang dimodifikasi secara
kimiawi, silika yang tidak dimodifikasi, atau polimer-polimer stiren dan divinil benzene. Permukaan silika adalah polar dan sedikit asam
karena adanya residu gugus silanol Si-OH, Oktadesil silan ODS atau C18 merupakan fase diam yang paling banyak digunakan karena
mampu memisahkan senyawa-senyawa dengan kepolaran yang rendah, sedang, maupun tinggi. Fase diam eksklusi dan penukar ion dapat
menggunakan silika atau polimer.
2.5.6 Detektor KCKT
Detektor pada KCKT ada 2 yaitu 1 Detektor universal yang mampu mendeteksi zat secara umum, tidak bersifat spesifik dan tidak
bersifat selektif seperti detektor indeks bias dan detektor spektrometri massa, dan 2 Detektor yang spesifik yang hanya akan mendeteksi
analit secara spesifik dan selektif, seperti detector UV-VIS, detektor fluoresensi dan elektro kimia.
2.5.7 Komputer, Integrator atau Rekorder.
Alat pengumpul data seperti komputer, integrator atau rekorder, dihubungkan dengan detektor. Alat ini akan mengukur sinyal elektro-
nik yang dihasilkan oleh detektor lalu memplotkannya sebagai suatu kromatogram.
2.6 VALIDASI METODE ANALISIS
Suatu metode analisis terdiri atas serangkaian langkah yang harus diikuti untuk tujuan analisis kualitatif dan kuantitatif dengan menggunakan
teknik tertentu. Faktor-faktor yang harus diperhatikan dalam melakukan pemilihan metode analisis adalah: tujuan analisis, biaya yang dibutuhkan,
serta waktu yang diperlukan; level analit yang diharapkan dan batas deteksi yang diperlukan; macam sampel yang akan dianalisis serta pra-perlakuan
sampel yang dibutuhkan; jumlah sampel yang dianalisis; ketepatan dan ketelitian yang diinginkan untuk analisis kuantitatif; ketersediaan bahan
rujukan, senyawa baku, bahan-bahan kimia, dan pelarut yang dibutuhkan; peralatan yang tersedia; kemungkinan adanya gangguan pada saat deteksi
atau pada saat pengukuran sampel. Menurut Rohman dan Ibnu 2007, kriteria yang harus dipenuhi suatu metode analisis yang baik adalah:
1. Peka sensitive artinya metode harus dapat digunakan untuk mene- tapkan kadar senyawa dalam konsentrasi yang kecil.
2. Selektif, artinya untuk penetapan kadar senyawa tertentu, metode tersebut tidak banyak terpengaruh oleh adanya senyawa lain.
3. Tepat precise artinya metode tersebut menghasilkan suatu hasil analisis yang sama atau hampir sama dalam satu seri pengukuran
penetapan. 4. Teliti accurate artinya metode dapat menghasilkan nilai rata-rata
mean yang sangat dekat dengan nilai sebenarnya true value. 5. Kasar rugged artinya ada perubahan komposisi pelarut atau variasi
lingkungan tidak menyebabkan perubahan hasil analisis. 6. Praktis artinya metode tersebut mudah dikerjakan serta tidak banyak
memerlukan waktu dan biaya. Pengembangan metode analisis biasanya didasarkan pada metode yang
sudah ada menggunakan instrumen yang sama atau hampir sama. Pengem- bangan metode analisis biasanya membutuhkan syarat-syarat metode
tertentu dan memutuskan jenis alat yang akan digunakan. Pada tahap pengembangan metode, keputusan yang terkait dengan pemilihan kolom,
2.6 V V
V VAL
diik tek
pe p
p m se
se s
se se
se e
se se
se se
se se
se se
s se
se e
se se
se se
se se
e se
se e
se se
e se
se e
se s
s e
se se
s s
e e
e se
se e
s s
e se
e s
s s
e e
se se
e e
s s
e e
e e
e e
e e
e e
se e
e s
e e
s s
e e
s e
e s
se s
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
ya ya
ya ya
ya y
ya y
ya ya
y ya
ya y
y ya
ya ya
ya ya
ya y
ya y
y a
y y
ya y
y ya
y y
y y
ya y
ya ya
y y
y y
y ya
a ya
ya y
y y
a y
y y
ya ya
y ya
ya y
y a
y y
y ya
y y
y y
y ya
y y
y y
y y
y ya
y a
a ya
y y
a y
y y
y ya
y ya
y y
y y
y y
y y
y ya
y y
a a
a y
y y
y y
y y
y y
y y
y y
y n
sa sa
sa sa
sa sa
sa sa
sa sa
sa s
s sa
sa sa
sa sa
a sa
s sa
sa a
s a
a a
a sa
sa sa
sa sa
sa a
a a
s sa
a a
s sa
s sa
s sa
s s
sa a
a s
s s
sa a
sa s
s sa
s s
s sa
s s
s s
a a
s s
a sa
s a
s s
a s
a s
s a
m ke
ke ke
ke ke
ke e
ke ke
ke k
ke ke
ke e
k ke
ke e
k ke
ke ke
ke ke
k ke
ke k
k k
k k
k e
e ke
ke k
k k
ke ke
k k
ke k
e e
e k
ke e
ke ke
e e
e ke
k k
k k
k k
k ke
e k
ke k
k k
ke k
k k
k k
k k
k ke
e e
t ru
ru ru
ru ru
ru ru
ru ru
ru ru
ru ru
ru r
ru r
ru u
u u
u u
u ru
u ru
ru r
ru ru
ru u
ru ru
u u
r r
ru u
u r
ru u
u u
ru ru
r r
u ru
u r
ru ru
ru ru
u r
r u
u u
r ru
u r
ru u
r r
ru r
r r
u u
r r
u u
r r
u u
r r
r j
j j
j j
j j
j j
jj pe
pe pe
p p
pe pe
pe p
pe p
pe pe
pe pe
pe pe
p pe
pe p
p p
e pe
e pe
e pe
pe pe
pe pe
pe pe
p p
e e
pe e
pe e
pe p
pe e
p p
p e
pe pe
p p
pe pe
e p
pe pe
pe p
p p
p p
pe e
p pe
e p
p p
pe p
p e
p p
p p
p p
p p
p p
p p
p p
p p
p p
r at
at at
at at
a at
at at
t at
at at
t at
at at
a at
at at
at at
at a
at a
at t
at a
a a
a a
a at
at at
t at
a at
a at
at at
at a
a at
at a
a a
at a
at a
a at
t at
at a
at a
at t
a a
at t
at a
a a
a t
a at
a t
t a
at a
at t
a at
t a
a t
at a
at a
a a
a a
at a
t t
a t
t t
t t
a a
a k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
k k
ri r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r r
r 1.
1. 1.
1. 1.
1. 1
1 1.
1 1
1 1
1 1.
1 1.
1 1
1 1
1 1
1 1.
1. 1
1. 1.
1. 1
1 1
1 1
1 1
1. 1
1 1.
1. 1
1 1
1 1
1 1
1. 1
1 1
1 1
1 1
1. 1
1 1
1 1
1 1.
1 1
1 1
1 1
1 .
1 1
1 1
1 1
1
2. 2.
2 2
2 2.
2. 2
2 2.
2 2
2 2.
2. 2
2 2
2 2
2. 2
2 2
2 2
2 2
2 2.
2 2
2 2.
2. 2.
2 2.
2. 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
2 2
3.
4.
5.
6. 6.
6. 6.
6 6
6 6.
6. 6
6 6
6 6.
6 6
6 6
6 6
6 6.
6 6
6 6.
6 6.
6. 6
6 6
6 6.
6 6
6 6
6 6
6. 6
6 6
6. 6
6 6.
6 .
6. 6
6 6
6. 6
6 6
. 6
6 6
6 6.
6. 6.
6. 6.
. .
6 6
su su
su u
su su
u u
su su
u u
u u
su u
u u
u u
u u
su su
u su
u u
su u
u su
su su
u u
u su
u u
su u
u u
u u
su su
u u
u u
su u
u u
su u
u u
u s
d d
d d
d d
d d
d d
d d
d d
d d
d d
d d
ba ba
ba ba
ba b
a ba
ba ba
ba ba
ba b
ba b
b b
b b
b b
a ba
b b
b b
b ba
b b
b b
b b
b b
b b
b b
b b
b ba
a a
a a
a a
a a
n te
te t
te te
te te
te t
t te
t t
te t
t t
te t
t t
t t
t t
t t
te t
te e
e te
te te
te e
te e
e te
e e
r r
r pe
pe pe
pe pe
pe p
pe p
pe pe
pe pe
pe pe
p pe
pe e
pe pe
pe p
p pe
pe pe
p e
pe p
pe p
pe p
p p
p p
p p
p p
p p
p pe
e e
e e
p pe
e e
e p
p p
p p
e pe
pe pe
e e
n n
n n