29 5
Gerak-gerik hewan Hewan yang telah diberi ekstrak etanol daun kedongdong pagar diamati
gerak-geriknyaseperti berjalan mundur dan berjalan menggunakan perut.
3.10.2 Berat Badan
Mencit ditimbang setiap hari selama 28 hari untuk menentukan volume sediaan uji yang akan diberikan. Perubahan berat badan harus dianalisis
seminggusekali. Pada akhir penelitian, hewan yang masih bertahan hidup ditimbang dan kemudian dikorbankanBPOM RI., 2011.
3.10.3 Kematian Hewan
Mencit diamati kematiannya dari hari pertama sampai hari terakhir. Mencit yang mati selama waktu pemberian sediaan uji segera diotopsi dan organ diamati
secara histopatologiBPOM RI., 2011.
3.10.4 Pengukuran Kadar SGPTdan SGOT
Pada akhir periode pemberian sediaan uji semua mencit yang masih hidup diotopsi. Hewan didislokasi lehernya kemudian darah diambil melalui jantung
intra cardiac secara perlahan-lahan menggunakan alat suntik steril sebanyak 1-3 ml. Sebanyak 1 ml darah dimasukkan ke dalam tabung mikrosentrifuge dan
didiamkan pada suhu kamar selama 10 menit, kemudian dipindahkan ke dalam tangas es dan segera disentrifus selama 10 menit dengan kecepatan 3000 rpm
hingga dihasilkan serum yang bening. Serum dipisahkan, kemudian diperiksa kadar SGPT dan SGOT dengan menggunakan alat sprektrofotometer.
Penetapan kadar SGPT dan SGOT dengan cara sejumlah 100 µl serum uji direaksikan dengan 1000 µl pereaksi uji untuk pemeriksaan SGPT dan SGOTdalam
30 tabung reaksi 5 ml, dihomogenkan dengan bantuan vortex. Absorbansi diukur
dengan spektrofotometer pada suhu 37°C tepat setelah menit ke 1, 2, dan 3 pada panjang gelombang 340 nm. Hal yang sama dilakukan terhadap blanko
preaksi+akuades. Kadar SGPT dan SGOT dapat ditentukan dengan menghitung rata-rata selisih absorbansi sampel permenit dikalikan faktor 1745BPOM RI.,
2011.
3.10.5 Penimbangan Organ
Organ yang akan ditimbang absolut harus dikeringkan terlebih dahhulu dengan kertas penyerap, kemudian segera ditimbang, sedangkan yang dianalisis
adalah bobot relatif indeks organ, yaitu bobot organ absolut dibagi bobot badanBPOM RI., 2011.
3.10.6 Pengamatan Makropatologi Organ
