18
BAB III METODELOGI PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Jenis dan rancangan penelitian ini adalah deskriptif non eksperimental, karena pada penelitian ini tidak dilakukan manipulasi pada subjek uji dan hanya
menggambarkan keadaan yang ada.
B. Variabel Penelitian 1.
Variabel bebas
Variabel bebas pada penelitian ini adalah sistem KCKT yang telah dioptimasi yang meliputi komposisi fase gerak dan kecepatan alir fase gerak yang
telah dioptimasi.
2. Variabel tergantung
Variabel tergantung pada penelitian ini adalah parameter validasi metode analisis yang meliputi selektivitas, linieritas, akurasi, presisi, dan rentang.
3. Variabel pengacau terkendali
Kemurnian pelarut yang digunakan, untuk mengatasinya digunakan pelarut dengan kemurnian tinggi, yaitu pelarut pro analysis. Kemurnian baku
asam askorbat yang digunakan, untuk mengatasinya digunakan baku yang telah terjamin kualitasnya seperti tercantum pada Certificate of Analysis CoA.
C. Definisi Operasional
1. Sistem KCKT yang digunakan terdiri dari fase diam berupa kolom
Phenomenex® 250 x 4,6 mm, ukuran partikel 5 µm dan fase gerak campuran metanol : 0,01 M bufer fosfat dengan penambahan larutan 0,1 M asam fosfat
hingga pH 3 40 : 60. 2.
Baku asam askorbat yang divalidasi adalah baku yang tercantum pada Certificate of Analysis
CoA. 3.
Penelitian yang dilakukan termasuk dalam validasi metode katergori I, yaitu metode yang digunakan untuk analisis kualitatif dan kuantitatif komponen
utama dalam suatu matriks. Validasi yang dilakukan meliputi pengukuran terhadap parameter validasi yaitu selektivitas, linieritas, akurasi, presisi, dan
rentang.
D. Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah reference standard asam askorbat Supelco dengan kemurnian 98,7 yang tertera pada CoA di
Lampiran 1, metanol grade HPLC E.Merck, asam fosfat 85 E.Merck, kalium dihidrogen fosfat p.a E.Merck, akua demineralisata PT. Brataco,
penyaring Whatman 0,45µm, dan produk pemutih kulit merek “X” yang
diperoleh dari online shop “Y”.
E. Alat Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah seperangkat alat KCKT dengan detektor ultraviolet, Shimadzu LC-2010C, kolom C
18
merek Phenomenex® 250 x 4,6 mm, 5 µm, seperangkat komputer merek Dell
B6RDZ1S Connexant system RD01-D850 A03-0382 JP France S.A.S, printer HP Deskjet
D2566 HP-024-000 625730, UV-Vis Spechtrophotometer SP-3000
plus
merek OPTIMA dengan detektor silicon photo diode, milipore, ultrasonikator Refsch, Tipe : T460 Schwing 1 PXE, FTZ-Nr. C-06683, HF-Frequ:35 kHz,
timbangan analitik SCALTEC max 60210 g, min 0,001 g, alat vakum GAST, dan seperangkat alat gelas yang lazim digunakan di laboratorium analisis.
F. Tatacara Penelitian 1.