37
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui adanya aktivitas antiinflamasi pada ekstrak n-heksana, etil asetat dan metanol dari daun tumbuhan paku
Pyrrosia lanceolata terhadap penghambatan denaturasi protein secara in vitro. Dapat disimpulkan bahwa:
a. Ekstrak n-heksana, etil asetat dan metanol daun tumbuhan paku Pyrrosia
lanceolata memiliki
aktivitas antiinflamasi
terhadap penghambatan denaturasi protein secara in vitro sebesar 21,860 100
ppm ekstrak n-heksana, 30,994 10 ppm ekstrak etil aseatat, dan 52,788 10 ppm ekstrak metanol.
b. Berdasarkan analisis data statistik, ekstrak n-heksana dan etil asetat pada konsentrasi 10 ppm berbeda bermakna terhadap kontrol positif natrium
diklofenak artinya aktivitas antiinflamasi kedua ekstrak ini lebih rendah dari kontrol positif. Sebaliknya ekstrak metanol tidak berbeda bermakna
dengan kontrol positif sehingga aktivitas antiinflamasi ekstrak metanol menyerupai kontrol positif.
c. Ekstrak metanol mempunyai aktivitas antidenaturasi protein tertinggi dari ekstrak n-heksana dan etil asetat secara in vitro antiinflamasi.
5.2 Saran
a. Dapat dilakukan uji aktivitas antiinflamasi dari ekstrak daun tumbuhan paku Pyrrosia lanceolata L. Farw. secara in vivo serta mengukur kadar
air dan uji homogenitas ekstrak.
b. Dapat dilakukan uji aktivitas lainnya dari daun tumbuhan paku Pyrrosia lanceolata L. Farw. selain sebagai antioksidan dan
antiinflamasi dari daun tumbuhan paku Pyrrosia lanceolata L. Farw.
37
38
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
DAFTAR PUSTAKA
Akhil TT dan Prabhu P. 2013. Evaluation of Anti-Oxidant, Anti-Inflammatory and Cytotoxicity Potential of Hemigraphis colorata. International Journal
of Pharmaceutical Sciences and Research; Vol. 49: 3477-3483. Ali et al., 2012. Phytochemical Screening, Antioxidant and Analgesic Activities
of Croton argyratus Ethanolic Extracts. Journal of Medicinal Plants Research Vol. 621, pp. 3724-3731.
Ayoola et al., 2008. Phytochemical Screening and Antioxidant Activities of Some Selected Medicinal Plants Used for Malaria Therapy in
Southwestern Nigeria. Tropical Journal of Pharmaceutical Research, September; 7 3: 1019-1024.
Benjamin A, Manickam V.S. 2007. Medicinal Pteridophytes from The Western Ghats. Indian Journal of Traditional Knowledge. Vol. 64, pp. 611-618.
BSA Bovine Serum Albumin. Product Information by Sigma. www.sigma- aldrich.com . Diakses pada tanggal 29032014, 19.20 WIB.
Chatterjee. P, Chandra. S, Dey. P, Bhattacharya. S. 2012. Evaluation of anti- inflammatory effects of green tea and black tea: A comparative in vitro
study. J. Adv. Pharm. Tech. Res. Chippada SC and Vangalapati. 2011. Antioxidant, an anti-inflammatory and
anti-arthritic activity of Centella asiatica extracts. J. Chem. Bio. Phy. Sci., Vol.1, No.2, Sec. B, 260
– 269. Chippada SC, Volluri SS, Bammidi SR and Vangalapati M. 2011. In Vitro Anti
Inflammatory Activity of Methanolic Extract of Centella asiatica by HRBC Membrane Stabilisation. Rasayan J.Chem. Vol.4, No.2, 457-460.
Daintith, J. 1994. Kamus Lengkap Kimia. Jakarta: Erlangga. Dalimartha, S. 1999. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Jilid 2. Jakarta : Trubus
Agriwidya. Dewoto. 2007. Pengembangan Obat Tradisonal Indonesia Menjadi
Fitofarmaka. Jakarta: FKUI. Maj Kedokt Indon, Volum: 57, Nomor: 7, Juli.
39
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Darnaedi, Dedy. 2000. Keanekaragaman Hayati Konservasi dan Pemanfaatan yang Berkelanjutan. Bogor: LIPI.
DEPKES. 2010. Farmakope Indonesia Edisi 4. DEPKES RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.
Farnsworth, N.R. 1996. Biological and Phytochemical Screnning of Plants. J. Pharm.
Harbone, J.B. 1987. Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Penerjemah: Kosasih P., Soediro Iwang. Bandung: Penerbit
ITB. Hariana, H.A. 2006. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya Seri 3. Depok: Penebar
Swadaya. Hartini, S. 2006. Tumbuhan Paku di Cagar Alam Sago Malintang, Sumatera
Barat dan Aklimatisasinya di Kebun Raya Bogor. Biodiversitas. 7 3: 230-236.
Health Professions Division. 1996. Goodman Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th edition. USA: McGraw-Hill,637.
Ho, R. Teai T. Bianchini J-P. Lafont R., Raharivelomanana, P. 2011. Fren: From Traditional Uses to Pharmaceutical Development, Chemical
Identification of Active Principles in Working with Fren. Spinger. Hammer et al., 2008. Antimicrobial and Anti-inflammatory Activity of Five
Taxandria fragrans Oils in vitro. Microbiol Immunol; 52: 522 –530.
Katzung, B. G. 2002 Farmakologi Dasar dan Klinik Edisi II. Jakarta: Salemba Medika.
Katzung, Bertram G. 2006. Basic and Cinical Pharmacology, 10th Edition. McGraw Hill Lange.
Komala, I. 2010. Laporan Penelitian Individu, Uji Aktivitas Antioksida Tumbuhan Paku Indonesia. Jakarta: Universitas Islam Negeri Syarif
Hidayatullah. Lai, Y, H. Lim Y, Y. 2011. Evaluation of Antioxidant Activities of the
Methanolic Extracts of Selected Ferns in Malaysia. International Journal of Environmental Science and Development, Vol. 2, No. 6.
40
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Mohan. 2003. Buffers: A guide for the preparation and use of buffers in biological systems. Germany: Calbiochem.
Mutairi and Jasser. 2012. Effect of using Rotary Evaporator on Date Dibs Quality. Journal of American Science;811.
Mycek M, Harvey, dan Champe. 2001. Farmakologi Ulasan Bergambar Edisi 2. Jakarta : Widia Medika.
Ncube NS, Aafolayan AJ, Okoh Al. 2008. Assesment Techniques of Antimicrobial Properties of Natural Compounds of Plant Origin: Current
Methods and Future Trends. African Journal of Biotechnology; 7 12. Nijveldt, R. J., E. van Nood, D.E.C. van Hoorn, P.G. Boelens, K. van Norren,
P.A.M. van Leeuwen. 2001. Flavonoids: a review of probable mechanisms of action and potential applications. American Journal of
Clinical and Nutrition 74: 418-425. Nugroho, B. W., Dadang, dan Prijono, D. 1999. Pengembangan dan
Pemanfaatan Insektisida Alami. Pusat Kajian Pengendalian Hama Terpadu, IPB. Bogor.
Pranoto, E.N., Ma’ruf, W.F., dan Pringgenies, D. 2012. Kajian Aktivitas Bioaktif Ekstrak Teripang Pasir Holothuria scabra terhadap Jamur Candida
albicans. Jurnal Pengolahan dan Bioteknologi Hasil Perikanan. 11: 1-8. Pringgoutomo S, Himawan S, Tjarta A. 2002. Buku Ajar Patologi I Umum
Edisi ke-1. Jakarta : Sagung Seto. Pooja. 2004. Pterydophyta Discovery Publishing House. India: di dalam,
Komala, I. 2012. Uji Aktivitas Tumbuhan Paku Indonesia. Saifudin, A., Rahayu, V. and Teruna, H.Y. 2011. Standardisasi Bahan Obat
Alam. Yogyakarta: Graha Ilmu. Santoso, S. 2007. Menguasai Statistik di Era Informasi dengan SPSS 15. Jakarta:
PT Elex Media Komputindo Kelompok Gramedia. Sastrapradja, S., Afriastini, J.J., Darnaedi, D. Widjaja, E.A. 1979. Jenis Paku
Indonesia. Bogor: Lembaga Biologi Nasional – LIPI. hlm. 7-101.
Sekar, et al., 2011. Ethnomedicinal Uses of Pteridophytes in Kolli Hills, Eastern Ghats of Tamil Nadu, India. J. Nat. Prod. Plant Resour., 1 2:50-55.
41
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Sheikh, et al., 2013. Hypoglycemic, Anti-inflammatory and Analgesic Activity of Peperomea pellucida L. HBK Piperaceae. IJPSR, Vol. 4, Issue 1.
Silva G.L. lee, I.S. Kinghorn A.D. 1998. Special Problem with Extraction of Plants in Chanell R.JP. ed Methods in Biotechnology 4. Natural Product
Isolation Human Press, Totowa, New Jersey, USA. Sudjadi. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
Thermo Fisher Scientific. 2012. Product Information Bovine Serum Albumin BSA, molecular biology grade.
Tiwari, et al., 2011. Phytochemical screening and Extraction: A Review. Internationale Pharmaceutica Sciencia Vol 1 Issue 1.
Tjay TH dan Rahardja K. 2008. Obat-obat Penting. Jakarta : PT Elex Media Komputindo.
Verma et al., 2011. Anti Denaturation and Antioxidant Activities of Annona cherimola In Vitro. India: International Journal of Pharma and Bio
Sciences. Vickery. M and Vickery B. 1980. Secondary Plant Metabolism. London: The
Maccmillan Press LTD. Williams et al., 2008. The in vitro Anti-denaturation Effects Induded by Natural
Products and Non-steroidal Compounds in Heat Treated Immunogenic Bovine Serum Albumin is Prposed as a Screening Assay for the Detection
of Anti-inflammatory Compounds, without the uses of Animals, in the Early Stages of the Drug Discovery Process. West Indian Med J; 57 4:
327-330. Zakaria, et al. 2006. Antinociceptine and Anti-inflamatory Activities of
Dicranopteris Linearis Leaves Chloroform Extract in Experimental Animals. Yajugaju zasshi, 126, 1197-1203.
42
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 1. Tumbuhan Paku Pyrrosia lanceolata L. Farw
Sumber : Koleksi Pribadi, 11 Februari 2014
43
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 2. Alur Penelitian
Determinasi
- Sortasi basah - Pengeringan
- Penghalusan blender
Residu
- Ekstraksi dengan etil asetat - Penyaringan
- Pemekatan vacuum rotary evaporator
Residu Ekstrak kental
etil asetat semi polar Tumbuhan paku Pyrrosia lanceolata
Penyiapan Simplisia
Sampel kering
Penapisan Fitokimia
- Ekstraksi dengan n-heksana - Penyaringan
- Pemekatan vacuum rotary evaporator
Ekstrak kental n-heksana non polar
Uji Aktivitas Antiinflamasi secara In Vitro
Ekstrak kental metanol polar
Residu
- Ekstraksi dengan metanol - Penyaringan
- Pemekatan vacuum rotary evaporator
44
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 3. Alur Uji Aktivitas Antiinflamasi terhadap Penghamabatan Denaturasi Protein secara
In Vitro
Larutan konsentrasi 1 ppm, 10 ppm dan 100 ppm ekstrak n-heksana, etil asetat dan metanol serta larutan kosentrasi natrium diklofenak 1,3 ppm, 2,5 ppm, 5
ppm, 10 ppm, 20 ppm dan 40 ppm dalam metanol.
Diambil sebanyak 50 µL dengan mikropipet ke dalam labu ukur 5 mL
Larutan 0,2 BSA dalam TBS
hingga volume
mencapai 5 mL.
Larutan 5 mL terdiri dari larutan 0,2 BSA dan larutan uji dalam tabung reaksi.
Diinkubasi : suhu 25 C selama 30 menit
Dipanaskan : di waterbath pada suhu 72
o
C selama 5 menit.
Diamkan : suhu 23
o
C selama 25 menit
Setelah larutan 5 mL tersebut dingin lalu di vortex dan dilakukan pengukuran inhibisi denaturasi protein
mengunakan alat spektofotometer Uv-Visible pada panjang gelombang 660 nanometer.
45
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 4. Analisis Statistik Konsentrasi 10 ppm Ekstrak n-heksana, etil asetat dan metanol Daun Paku
Pyrrosia lanceolata terhadap Natrium diklofenak.
1. Uji Normalitas Shapiro-wilk
Tujuan : untuk melihat data persentase inhibisi denaturasi protein terdistribusi normal atau tidak.
Hipotesis : H
: data persentase inhibisi denaturasi protein terdistribusi normal Ha : data persentase inhibisi denaturasi protein tidak terdistribusi
normal Pengambilan keputusan :
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05, maka H diterima
Jika nilai signifikansi ≤ 0,05, maka H ditolak
Hasil uji normalitas data persentase inhibisi denaturasi protein
Tests of Normality
konsentrasi Kolmogorov-Smirnov
a
Shapiro-Wilk Statistic
df Sig.
Statistic df
Sig. Persen
inhibisi 1. n-heksana
.237 3
. .977
3 .706
2. etil asetat .316
3 .
.890 3
.354 3. metanol
.278 3
. .940
3 .526
4. Na.diklofenak .355
3 .
.820 3
.163
Kesimpulan : Data persentase inhibisi denaturasi protein terdistribusi normal.
2. Uji Homogenitas Levene
Tujuan : untuk melihat data persentase inhibisi denaturasi protein homogen atau tidak.
Hipotesis : H
: data persentase inhibisi denaturasi protein bervariasi homogen
46
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Ha : data persentase inhibisi denaturasi protein tidak bervariasi
homogen Pengambilan keputusan :
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05, maka H diterima
Jika nilai signifikansi ≤ 0,05, maka H ditolak
Hasil uji homogenitas data persentase inhibisi denaturasi protein
Test of Homogeneity of Variances
perseninhibisi Levene Statistic
df1 df2
Sig. 5.494
3 8
.024
Keputusan : data persentase inhibisi denaturasi protein tidak bervariasi homogen.
Kesimpulan : syarat normalitas pada semua kelompok uji terpenuhi akan tetapi syarat homogenitas tidak terpenuhi, data persentase inhibisi
denaturasi protein tidak dapat dilanjutkan menggunakan ANOVA dan dilanjutkan dengan uji Kruskal Wallis.
3. Uji Kruskal Wallis terhadap Persentase Inhibisi Denaturasi Protein
Tujuan : untuk melihat data persentase inhibisi denaturasi protein homogen atau tidak.
Hipotesis :
Ho : data persentase inhibisi denaturasi protein tidak berbeda secara bermakna
Ha : data persentase inhibisi denaturasi protein berbeda secara bermakna
Pengambilan keputusan : Jika nilai signifikansi ≤ 0,05 Ho ditolak, berarti terdapat perbedaan
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05 Ho diterima, berarti tidak terdapat
perbedaan
47
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Hasil uji Kruskal Wallis data persentase inhibisi denaturasi protein