Gambar 12 Pengaruh buffer ringer dan buffer SM terhadap rata-rata ukuran plaque fage inkubasi 24 jam
Berdasarkan hasil penelitian tersebut, maka pada penelitian selanjutnya untuk membuat stock fage FR38 digunakan buffer stock buffer SM dan apabila
belum dimurnikan maka fage sebaiknya disimpan pada suhu 4
o
C.
4.1.3 Efisiensi Lisis
Pengamatan efektifitas lisis fage FR38 dilakukan berdasarkan nilai optical density OD. Pengamatan dilakukan pada 0, 30, 60, 90, dan 120 menit. Perlakuan
Fage ternyata berpengaruh sangat signifikan dalam menurunkan nilai OD media dengan selang kepercayaan 99
0,01
Gambar 13.
Gambar 13 Efektifitas Lisis fage FR38 yang diukur berdasarkan nilai OD Perbedaan secara signifikan terlihat pada perlakuan fage menit ke-30 0D =
0.621; 60 OD =0.477, 90 OD = 0.306, dan 120 0.110 dibandingkan perlakuan tanpa fage FR38 dimana nilai OD pada menit ke-120 adalah 0.717.
Fage FR38 efektif melisiskan Salmonella P38 sehingga jumlahnya menurun
2,15 1,1
2,15 1,85
0,5 1
1,5 2
2,5
30
U kuran
Zona B
e ni
ng F
age m
m
Hari ke-
Buffer ringer Buffer SM
0,2 0,4
0,6 0,8
1 1,2
30 60
90 120
Op tical
Den si
ty OD
waktu menit
Fage Tanpa Fage
signifikan pada menit ke-120 OD = 0.110. Pada menit ke-30 fage FR38 telah menurunkan secara signifikan Salmonella P38 OD = 0.621. Hal ini seiring
dengan laporan Hogg 2005 bahwa waktu yang dibutuhkan fage T4 dalam melisiskan sel bakteri adalah 22 menit dan menghasilkan 50-200 progeni.
Menurut Mclaughlin dan King 2008 fage memiliki periode laten 15-20 menit dan menghasilkan 100-230 progeni bila diinkubasi pada suhu 35
o
C. Salmonella bermultiplikasi membutuhkan waktu 25-30 menit, tergantung pada media
tumbuhnya Bell dan kyriakides, 2002.
Sebelum digunakan lebih lanjut, fage hasil perbanyakan diuji kemurniannya dengan melakukan uji bebas Salmonella host fage, uji
kuantifikasi fage serta melakukan pengamatan fage dengan menggunakan Transmission Electronic Microscope TEM. Hasil pengamatan terlihat pada
Gambar 14 berikut:
A. Uji bebas Salmonella B. Uji kuantifikasi fage
C. Tampilan fage FR38 perbesaran 80.000x.
Gambar 14 Uji bebas Salmonella host fage A, uji kuantifikasi fage B serta pengamatan fage dengan menggunakan TEM C
Hasil pengamatan menununjukkan dengan menggunakan metode tuang, pada permukaan media XLD terlihat tidak terdapat koloni apapun A; jumlah
fage yang terdapat pada sampel adalah 10
8
pfu B; dan sampel yang diamati benar-benar mengandung fage C. Hasil ini menunjukkan bahwa sampel fage
yang berhasil diperbanyak adalah murni dan tidak mengandung Salmonella P38 host fage FR38.
4.2. Efektifitas Fage FR 38 pada Susu 4.2.1 Kandungan Nutrisi
